| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 褐飞虱概况 | 第12-14页 |
| 1.1.1 褐飞虱的特征及危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 褐飞虱防治新形势 | 第13-14页 |
| 1.2 胰岛素及其信号转导的研究概况 | 第14-15页 |
| 1.2.1 胰岛素 | 第14页 |
| 1.2.2 胰岛素信号通路 | 第14-15页 |
| 1.3 昆虫胰岛素信号通路 | 第15-18页 |
| 1.3.1 昆虫胰岛素受体 | 第16-17页 |
| 1.3.2 昆虫胰岛素信号途径的生理功能 | 第17-18页 |
| 1.4 昆虫胰岛素信号通路与其它激素的相互作用 | 第18-19页 |
| 1.4.1 昆虫胰岛素信号与蜕皮激素的相互作用 | 第18页 |
| 1.4.2 昆虫胰岛素信号通路与保幼激素的相互作用 | 第18-19页 |
| 1.5 RNAi技术的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.5.1 RNAi技术研究 | 第19-20页 |
| 1.5.2 RNAi在害虫防治领域中的应用 | 第20-22页 |
| 第二章 常用仪器、试剂与方法 | 第22-32页 |
| 2.1 常用仪器及主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 常用仪器 | 第22-23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 2.2 常规试剂配制 | 第23-25页 |
| 2.2.1 LB培养基 | 第23页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| 2.2.3 磷酸缓冲液(1×PBS)配制 | 第23-24页 |
| 2.2.4 抗生素的配制 | 第24页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE试剂 | 第24页 |
| 2.2.6 Western blot试剂 | 第24-25页 |
| 2.3 常规实验方法 | 第25-29页 |
| 2.3.1 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞 | 第25页 |
| 2.3.2 载体pMD-19T的连接 | 第25页 |
| 2.3.3 热击转化 | 第25-26页 |
| 2.3.4 质粒DNA提取 | 第26页 |
| 2.3.5 酶切反应 | 第26页 |
| 2.3.6 琼脂糖凝胶回收纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.7 褐飞虱总RNA的提取及反转录 | 第27-28页 |
| 2.3.8 褐飞虱cDNA的合成 | 第28页 |
| 2.3.9 SDS-PAGE | 第28-29页 |
| 2.3.10 实时荧光定量PCR | 第29页 |
| 2.4 RNA干扰技术操作步骤 | 第29-32页 |
| 2.4.1 dsRNA的合成 | 第29-30页 |
| 2.4.2 毛细管注射针的制作 | 第30页 |
| 2.4.3 褐飞虱摆放板制作 | 第30页 |
| 2.4.4 显微注射 | 第30-32页 |
| 第三章 褐飞虱胰岛素受体基因的克隆及序列分析 | 第32-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-34页 |
| 3.1.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第33页 |
| 3.1.3 生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 3.2 褐飞虱胰岛素受体基因克隆及分析 | 第34-44页 |
| 3.2.1 NlInR1和NlInR2基因全长cDNA序列的基本信息 | 第34页 |
| 3.2.2 NlInR1和NlInR2基因信号肽和跨膜区域预测 | 第34-35页 |
| 3.2.3 NlInR1和NlInR2蛋白结构域的预测 | 第35-38页 |
| 3.2.4 昆虫InRs进化树的构建 | 第38-42页 |
| 3.2.5 NlInR1和NlInR2基因组座位分析 | 第42-44页 |
| 3.3 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 褐飞虱InR基因的功能研究 | 第46-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 供试昆虫与饲养条件 | 第46页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第46页 |
| 4.1.3 试剂盒 | 第46页 |
| 4.1.4 仪器 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-49页 |
| 4.2.1 褐飞虱InR基因dsRNA的合成 | 第47页 |
| 4.2.2 褐飞虱InR基因的RNAi | 第47-48页 |
| 4.2.3 褐飞虱甘油三酯含量测定 | 第48-49页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR | 第49页 |
| 4.3 实验结果 | 第49-53页 |
| 4.3.1 干扰InRs后的基因沉默效果检测 | 第49页 |
| 4.3.2 NlInRs对褐飞虱体型调控 | 第49-50页 |
| 4.3.3 NlInRs对褐飞虱体重的调控 | 第50-51页 |
| 4.3.4 NlInRs对褐飞虱发育历期的调控 | 第51-52页 |
| 4.3.5 NlInRs对褐飞虱脂代谢的调控 | 第52-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 第五章 褐飞虱胰岛素受体蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 | 第54-60页 |
| 5.1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 5.1.1 材料 | 第54-55页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 5.2 结果与分析 | 第56-59页 |
| 5.2.1 原核表达载体构建 | 第56-57页 |
| 5.2.2 诱导表达及蛋白纯化 | 第57-59页 |
| 5.3 讨论 | 第59-60页 |
| 第六章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 6.1 主要结论 | 第60页 |
| 6.2 创新点 | 第60页 |
| 6.3 展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 缩略词表 | 第68-70页 |
| 在读期间发表的论文 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
