摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
符号说明 | 第8-12页 |
1. 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 研究背景 | 第12-13页 |
1.2 卵母细胞的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 卵母细胞的发生 | 第13页 |
1.2.2 卵母细胞的发育 | 第13-14页 |
1.2.3 卵母细胞的成熟 | 第14-15页 |
1.2.4 卵母细胞内的脂质 | 第15-16页 |
1.3 细胞内脂滴的研究进展 | 第16-20页 |
1.3.1 脂滴的起源 | 第16-17页 |
1.3.2 脂滴的结构与发育 | 第17-18页 |
1.3.3 脂滴的动态过程 | 第18-19页 |
1.3.4 脂滴的生物学功能 | 第19-20页 |
1.4 细胞内脂滴定量的方法 | 第20-23页 |
1.4.1 平面光密度检测方法 | 第21页 |
1.4.2 三维重建检测方法 | 第21-23页 |
1.4.2.1 激光共聚焦显微镜工作原理 | 第21-22页 |
1.4.2.2 计算机三维重建技术 | 第22-23页 |
2. 本实验的研究内容与意义 | 第23-24页 |
3. 材料与方法 | 第24-33页 |
3.1 试验材料 | 第24-27页 |
3.1.1 实验动物来源 | 第24页 |
3.1.2 时间与地点 | 第24页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
3.1.4 实验所需试剂 | 第25-26页 |
3.1.5 常用试剂的配制 | 第26-27页 |
3.2 试验方法 | 第27-32页 |
3.2.1 猪卵母细胞脂滴定量分析 | 第27-29页 |
3.2.1.1 猪卵母细胞的采集 | 第27页 |
3.2.1.2 猪卵母细胞特异性荧光染色 | 第27-28页 |
3.2.1.3 不同发育阶段猪卵母细胞的分类标准及样本的选取 | 第28-29页 |
3.2.1.4 激光共聚焦显微镜扫描 | 第29页 |
3.2.2 猪卵母细胞脂质相关基因表达量分析 | 第29-32页 |
3.2.2.1 总RNA提取 | 第29-30页 |
3.2.2.2 RNA 反转录 | 第30-31页 |
3.2.2.3 Realtime PCR引物设计 | 第31页 |
3.2.2.4 实时荧光定量 | 第31-32页 |
3.3 数据处理方法 | 第32-33页 |
4. 结果与分析 | 第33-46页 |
4.1 三维重建检测方法和平面光密度检测方法的检测结果 | 第33-37页 |
4.1.1 三维重建检测方法和平面光密度检测方法对卵母细胞脂滴的定量分析 | 第33-34页 |
4.1.2 三维重建检测方法和平面光密度检测方法脂滴定量准确性的对比结果 | 第34-35页 |
4.1.3 三维重建检测方法和平面光密度检测方法脂滴定量重复性的对比结果 | 第35-37页 |
4.2 三维重建检测方法对不同发育阶段的猪卵母细胞进行脂滴定量结果 | 第37-44页 |
4.2.1 猪与其他物种卵母细胞内脂滴分布情况的对比结果 | 第37-38页 |
4.2.2 不同发育阶段猪卵母细胞内脂滴分布情况 | 第38-40页 |
4.2.3 AF期猪卵母细胞内脂滴的定量结果 | 第40-41页 |
4.2.4 不同发育阶段猪卵母细胞内脂滴定量的结果 | 第41-42页 |
4.2.5 不同发育阶段猪卵母细胞内脂滴的个数与体积 | 第42-44页 |
4.3 RT-PCR检测AF期猪卵母细胞内脂质相关基因的相对表达量 | 第44-46页 |
5. 讨论 | 第46-51页 |
5.1 三维重建检测方法和平面光密度检测方法的优缺点 | 第46-47页 |
5.2 猪卵母细胞内脂滴的发育规律 | 第47-48页 |
5.3 AF期猪卵母细胞脂质生成相关基因的表达量 | 第48-51页 |
6. 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第58页 |