| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 常用词语缩写 | 第8-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 CTSD的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2 CSTB的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-28页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 试验动物与样品采集 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 提取RNA的质量和浓度检测 | 第20页 |
| 2.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第20-21页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第21-22页 |
| 2.2.5 CTSD和CSTB基因的克隆PCR | 第22页 |
| 2.2.6 PCR产物的回收纯化 | 第22-23页 |
| 2.2.7 PCR产物克隆及测序 | 第23-24页 |
| 2.2.8 荧光定量PCR | 第24-26页 |
| 2.2.9 蛋白质免疫杂交(Western Bloting) | 第26-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-53页 |
| 3.1 总RNA的检测 | 第28-29页 |
| 3.2 CTSD和CSTB基因克隆与序列分析 | 第29-46页 |
| 3.2.1 CTSD基因RT-PCR结果 | 第29-30页 |
| 3.2.2 CTSD基因的克隆测序 | 第30-31页 |
| 3.2.3 CTSD基因的序列比对结果 | 第31-33页 |
| 3.2.4 CTSD系统发育树的构建 | 第33页 |
| 3.2.5 CTSD蛋白质序列分析 | 第33-38页 |
| 3.2.6 CSTB基因的RT-PCR | 第38-39页 |
| 3.2.7 CSTB基因的克隆测序 | 第39-40页 |
| 3.2.8 CSTB序列比对 | 第40页 |
| 3.2.9 CSTB系统发育树的构建 | 第40-41页 |
| 3.2.10 CSTB蛋白的序列分析 | 第41-46页 |
| 3.3 CTSD和CSTB基因荧光定量PCR结果 | 第46-52页 |
| 3.3.1 引物正确性验证 | 第46-47页 |
| 3.3.2 内参与目的基因的标准曲线 | 第47-48页 |
| 3.3.3 CTSD和CSTB基因的组织表达 | 第48-52页 |
| 3.4 CTSD和CSTB蛋白表达差异 | 第52-53页 |
| 3.4.1 CTSD蛋白表达差异 | 第52-53页 |
| 3.4.2 CSTB蛋白表达差异 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-59页 |
| 4.1 CTSD和CSTB基因生物信息学分析 | 第53-54页 |
| 4.2 CTSD和CSTB蛋白疏水性、跨膜区、亚细胞定位及磷酸化位点分析 | 第54-55页 |
| 4.3 CTSD和CSTB蛋白二级、三级结构、信号肽、糖基化位点及结构域分析 | 第55-57页 |
| 4.4 CTSD和CSTB的组织表达分析 | 第57-59页 |
| 4.4.1 CTSD的组织表达分析 | 第57-58页 |
| 4.4.2 CSTB的组织表达分析 | 第58-59页 |
| 4.4.3 CTSD和CSTB的相关性分析 | 第59页 |
| 5 结论 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第68页 |
