| 1 前言 | 第9-25页 |
| 1.1 鸟苷的理化性质 | 第9页 |
| 1.2 鸟苷的用途 | 第9-10页 |
| 1.2.1 在食品行业中的应用 | 第9-10页 |
| 1.2.2 在医药工业中的应用 | 第10页 |
| 1.3 鸟苷的测定方法 | 第10-11页 |
| 1.3.1 离子交换法分离测定鸟苷 | 第10-11页 |
| 1.3.2 酶法分析测定鸟苷 | 第11页 |
| 1.3.3 纸层析法分离测定鸟苷 | 第11页 |
| 1.3.4 纸电泳法测定鸟苷 | 第11页 |
| 1.3.5 薄层层析分离测定鸟苷 | 第11页 |
| 1.4 鸟苷的生产方法 | 第11-12页 |
| 1.5 鸟苷的提取 | 第12-14页 |
| 1.5.1 发酵液中鸟苷提取的工艺流程 | 第12页 |
| 1.5.2 发酵液的前处理 | 第12-13页 |
| 1.5.3 离子交换法提取鸟苷 | 第13-14页 |
| 1.5.4 鸟苷的精制 | 第14页 |
| 1.6 国内外研究状况、水平及发展趋势 | 第14-16页 |
| 1.7 生物合成途径 | 第16-18页 |
| 1.8 鸟苷合成的代谢调节机制 | 第18-19页 |
| 1.9 代谢工程与鸟苷工程菌的构建 | 第19-22页 |
| 1.10 鸟苷工程菌发酵过程控制 | 第22-23页 |
| 1.10.1 碳源和氮源对产苷的影响 | 第22-23页 |
| 1.10.2 无机盐及生长因子对产苷的影响 | 第23页 |
| 1.10.3 温度、pH 对产苷的影响 | 第23页 |
| 1.11 菌种保藏 | 第23页 |
| 1.12 论文立题背景及主要研究内容 | 第23-25页 |
| 2. 材料与方法 | 第25-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.3 相关溶液 | 第27-28页 |
| 2.1.4 菌株和质粒 | 第28-29页 |
| 2.1.5 培养基 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-36页 |
| 2.2.1 发酵液中鸟苷的测定方法 | 第30-32页 |
| 2.2.1.1 发酵液预处理 | 第31页 |
| 2.2.1.2 发酵液中鸟苷的定性测定 | 第31页 |
| 2.2.1.3 离子交换法 | 第31-32页 |
| 2.2.1.4 纸层析法 | 第32页 |
| 2.2.2 pH的测定 | 第32页 |
| 2.2.3 吸光度的测定 | 第32页 |
| 2.2.4 菌体生长测定 | 第32-33页 |
| 2.2.5 发酵液中残糖测定 | 第33页 |
| 2.2.6 菌体生长曲线的测定 | 第33页 |
| 2.2.7 pUBLW2 质粒的提取 | 第33页 |
| 2.2.8 原生质体制备、再生及转化 | 第33-34页 |
| 2.2.9 转化子阳性菌落的检出 | 第34页 |
| 2.2.10 鸟苷生产菌摇瓶发酵方法 | 第34页 |
| 2.2.11 鸟苷生产菌5L罐发酵方法 | 第34页 |
| 2.2.12 分批发酵动力学模型研究方法 | 第34-35页 |
| 2.2.13 菌体生长量测定 | 第35页 |
| 2.2.14 平板菌落计数法 | 第35-36页 |
| 3. 结果与讨论 | 第36-68页 |
| 3.1 鸟苷的测定方法 | 第36-45页 |
| 3.1.1 树脂的筛选 | 第36-38页 |
| 3.1.1.1 静态吸附 | 第36-37页 |
| 3.1.1.2 静态解吸 | 第37-38页 |
| 3.1.2 分离条件的确定 | 第38-43页 |
| 3.1.2.1 树脂装柱量的确定 | 第41页 |
| 3.1.2.2 洗脱液流速的确定 | 第41-42页 |
| 3.1.2.3 洗脱液与洗脱体积的确定 | 第42-43页 |
| 3.1.3 标准曲线的确定 | 第43-44页 |
| 3.1.4 回收率验证 | 第44页 |
| 3.1.5 离子交换法与纸层析测定方法的比较 | 第44-45页 |
| 3.1.6 小结 | 第45页 |
| 3.2 鸟苷工程菌的构建 | 第45-52页 |
| 3.2.1 受体菌遗传标记及产苷能力的测定 | 第47页 |
| 3.2.2 生长曲线的测定 | 第47-48页 |
| 3.2.3 酶浓度与TA208原生质体的形成率及再生率的关系 | 第48-49页 |
| 3.2.4 溶菌酶作用时间与原生质体的形成率及再生率的关系 | 第49页 |
| 3.2.5 目的转化子的筛选 | 第49-50页 |
| 3.2.6 受体菌TA208和转化子的SG 抗性比较 | 第50-51页 |
| 3.2.7 受体菌TA208、供体菌Q2901 和转化子TA424 的质粒DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
| 3.2.8 小结 | 第51-52页 |
| 3.3 鸟苷工程菌株TA424(pUBLW2)发酵条件的初步研究 | 第52-59页 |
| 3.3.1 种子培养基的均匀设计法优化 | 第52-54页 |
| 3.3.1.1 试验数据的回归分析及方程的建立 | 第53-54页 |
| 3.3.1.2 优化结果 | 第54页 |
| 3.3.2 发酵培养基的优化 | 第54-59页 |
| 3.3.2.1 模式识别优化方法 | 第54-55页 |
| 3.3.2.2 变量选择与数据预处理 | 第55页 |
| 3.3.2.3 评判标准 | 第55页 |
| 3.3.2.4 运算过程 | 第55-59页 |
| 3.3.3 小结 | 第59页 |
| 3.4 鸟苷工程菌分批发酵动力学模型研究 | 第59-68页 |
| 3.4.1 菌体生长动力学模型 | 第61-62页 |
| 3.4.2 产物生成动力学模型 | 第62-64页 |
| 3.4.3 基质消耗动力学模型 | 第64-66页 |
| 3.4.4 模型准确性的验证 | 第66-67页 |
| 3.4.5 小结 | 第67-68页 |
| 4. 结论 | 第68-69页 |
| 5. 展望 | 第69-70页 |
| 6. 参考文献 | 第70-74页 |
| 7. 研究生期间发表论文情况 | 第74-75页 |
| 8. 致谢 | 第75页 |
