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甲磺隆降解菌株的分离筛选、降解机制及应用研究

摘要第10-13页
ABSTRACT第13-15页
符号与缩略语说明第16-17页
前言第17-18页
第一部分 文献综述第18-60页
    第一节 农药污染概况第18-24页
        1 我国农药发展及使用现状第18-19页
        2 农药污染现状第19-23页
            2.1 农药对水体的污染第20页
            2.2 农药对土壤的污染第20-21页
            2.3 农药对大气的污染第21-22页
            2.4 农药对生物的影响第22-23页
        3 农药残留的微生物降解现状第23-24页
    第二节 磺酰脲类除草剂研究概况第24-38页
        1 磺酰脲类除草剂简介第24-26页
        2 磺酰脲类除草剂活性机理第26页
        3 磺酰脲类除草剂在土壤中的行为第26-29页
            3.1 吸附第26-27页
            3.2 淋溶第27页
            3.3 水解第27-28页
            3.4 光解第28-29页
        4 磺酰脲类除草剂药害第29-32页
            4.1 磺酰脲类除草剂对后茬作物的药害第29-31页
            4.2 磺酰脲类除草剂对对其它环境生物的影响第31-32页
        5 磺酰脲类除草剂的微生物降解第32-34页
            5.1 降解磺酰脲类除草剂的微生物种类第32-33页
            5.2 磺酰脲类除草剂的微生物代谢途径第33-34页
        6 磺酰脲类除草剂检测方法第34-38页
            6.1 化学分析第34-36页
            6.2 酶联免疫法第36页
            6.3 生物分析法第36-37页
            6.4 其它方法第37-38页
    第三节 微生物修复研究概况第38-47页
        1 生物修复的定义和分类第38-41页
            1.1 原位(In situ)生物修复技术第39-40页
            1.2 异位生物修复技术第40-41页
        2 微生物修复的作用机制第41-43页
            2.1 矿化作用第41页
            2.2 共代谢作用第41-42页
            2.3 间接作用第42页
            2.4 参与微生物降解作用的生物化学过程第42-43页
        3 生物修复的影响因素第43-47页
            3.1 污染物特性第43-44页
            3.2 微生物活性第44-45页
            3.3 环境因素第45-47页
    参考文献第47-60页
第二部分 实验部分第60-152页
    第一章 甲磺隆降解菌的分离、鉴定及生长特性研究第60-80页
        1 材料与方法第60-64页
            1.1 实验材料第60-61页
            1.2 实验方法第61-64页
        2 结果与分析第64-74页
            2.1 甲磺隆降解菌株的富集和分离第64-65页
            2.2 降解菌株的形态和培养特征第65-66页
            2.3 降解菌株的生理生化特征第66-67页
            2.4 降解菌株的16S rDNA鉴定第67-69页
            2.5 环境条件对降解菌株生长的影响第69-74页
        3 本章讨论第74-75页
        4 本章小结第75-77页
        参考文献第77-80页
    第二章 甲磺隆降解菌降解特性研究第80-94页
        1 材料与方法第80-82页
            1.1 供试菌株第80页
            1.2 培养基与试剂第80页
            1.3 菌株的培养及菌悬液的制备第80页
            1.4 土壤浸出液的制备第80-81页
            1.5 温度和初始pH值对降解菌降解甲磺隆的影响第81页
            1.6 通气量和接种量对降解菌降解甲磺隆的影响第81页
            1.7 不同营养物质对降解菌降解甲磺隆的影响第81页
            1.8 NaCl浓度对降解菌降解甲磺隆的影响第81页
            1.9 金属离子对降解菌降解甲磺隆的影响第81-82页
            1.10 降解谱试验第82页
            1.11 甲磺隆及其它几种磺酰脲类除草剂含量的测定第82页
        2 结果与分析第82-90页
            2.1 降解菌利用甲磺隆作为唯一碳、氮源利用情况第82-83页
            2.2 温度对降解菌降解甲磺隆的影响第83-84页
            2.3 pH值对降解菌降解甲磺隆的影响第84-85页
            2.4 盐浓度对降解菌降解甲磺隆的影响第85-86页
            2.5 通气量对降解菌降解甲磺隆的影响第86页
            2.6 接种量对降解菌降解甲磺隆的影响第86-87页
            2.7 添加营养物质对降解菌降解甲磺隆的影响第87-89页
            2.8 添加金属离子对降解菌降解甲磺隆的影响第89页
            2.9 降解菌XJ-412-1对常见磺酰脲类除草剂的降解第89-90页
        3 本章讨论第90-91页
        4 本章小结第91-92页
        参考文献第92-94页
    第三章 降解菌XJ-412-1对三种磺酰脲类除草剂去酯化代谢途径的研究第94-108页
        1 材料与方法第94-96页
            1.1 供试菌株第94页
            1.2 培养基与试剂第94-95页
            1.3 实验仪器第95页
            1.4 代谢产物提取第95页
            1.5 代谢产物与代谢途径分析第95-96页
            1.6 羧酸酯酶活性检测第96页
        2 结果与分析第96-103页
            2.1 代谢产物的HPLC检测第96-98页
            2.2 代谢产物的定性分析第98-100页
            2.3 代谢产物甲醇的GC检测第100-101页
            2.4 代谢途径推测第101-102页
            2.5 降解菌XJ-412-1羧酸酯酶活性检测第102-103页
        3 本章讨论第103-104页
        4 本章小结第104-105页
        参考文献第105-108页
    第四章 甲磺隆羧酸酯酶酶学特性及部分分离纯化第108-126页
        1 材料与方法第108-112页
            1.1 菌株、培养基与试剂第108-109页
            1.2 主要仪器设备第109页
            1.3 粗酶液的制备第109-110页
            1.4 粗酶中羧酸酯酶酶活反应体系第110页
            1.5 蛋白质含量的测定第110页
            1.6 羧酸酯酶的定位第110-111页
            1.7 羧酸酯酶的类型第111页
            1.8 羧酸酯酶定性检测第111页
            1.9 甲磺隆羧酸酯酶的部分纯化第111-112页
            1.10 酯酶酶谱分析第112页
        2 结果与分析第112-123页
            2.1 菌株生长曲线和产酶曲线第112-113页
            2.2 粗酶制备方法提取效率的比较第113-114页
            2.3 羧酸酯酶的定域第114页
            2.4 降解酶的类型第114-115页
            2.5 pH对羧酸酯酶酶促降解的影响第115-116页
            2.6 温度对羧酸酯酶酶促降解的影响第116页
            2.7 羧酸酯酶的酸碱稳定性第116-117页
            2.8 羧酸酯酶的热稳定性第117页
            2.9 金属离子及化学试剂对酶活性的影响第117-118页
            2.10 粗酶中羧酸酯酶底物特异性第118-119页
            2.11 甲磺隆羧酸酯酶的硫酸铵沉淀粗分第119-120页
            2.12 DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析第120-121页
            2.13 酯酶活性染色及电泳鉴定第121-123页
        3 本章讨论第123页
        4 本章小结第123-124页
        参考文献第124-126页
    第五章 甲磺隆降解菌XJ-412-1应用特性研究第126-152页
        第一节 甲磺隆对土壤微生物量和酶活的影响第126-136页
            1 材料与方法第126-129页
                1.1 供试土壤第126-127页
                1.2 试剂与培养基第127页
                1.3 实验设计第127页
                1.4 土壤细菌、放线菌、自生固氮菌及真菌的计数第127页
                1.5 土壤呼吸强度的测定第127-128页
                1.6 土壤各种酶活性的测定第128-129页
            2 结果与分析第129-136页
                2.1 甲磺隆对土壤细菌的影响第129-130页
                2.2 甲磺隆对土壤真菌的影响第130页
                2.3 甲磺隆对土壤放线菌的影响第130-131页
                2.4 甲磺隆对土壤好气固氮菌的影响第131页
                2.5 甲磺隆对土壤呼吸强度的影响第131-132页
                2.6 甲磺隆对土壤过氧化氢酶活的影响第132页
                2.7 甲磺隆对土壤蔗糖酶活性的影响第132-133页
                2.8 甲磺隆对土壤脱氢酶活性的影响第133-134页
                2.9 甲磺隆对土壤脲酶活性的影响第134-136页
        第二节 甲磺隆降解菌XJ-412-1的土壤修复应用第136-149页
            1 材料与方法第136-139页
                1.1 供试培养基及试剂第136页
                1.2 供试除草剂敏感作物第136页
                1.3 供试菌株和质粒第136-137页
                1.4 供试土壤第137页
                1.5 降解菌剂的制备第137页
                1.6 土壤中残留甲磺隆的测定第137页
                1.7 土壤中降解菌的跟踪第137-138页
                1.8 土壤降解实验第138页
                1.9 不同接种量对土壤中甲磺隆降解的影响第138页
                1.10 不同初始甲磺隆浓度对土壤中甲磺隆降解的影响第138页
                1.11 不同温度对土壤中甲磺隆降解的影响第138页
                1.12 不同湿度对土壤中甲磺隆降解的影响第138页
                1.13 添加外源有机物对土壤中甲磺隆降解的影响第138-139页
                1.14 降解菌灌根对玉米甲磺隆药害的解除作用第139页
                1.15 数据处理第139页
            2 结果与分析第139-146页
                2.1 降解菌XJ-412-1的GFP标记第139页
                2.2 土壤中XJ-412-1(pTR102gfp)的计数第139-141页
                2.3 XJ-412-1对土壤中甲磺隆的降解效果第141-142页
                2.4 不同接种量对土壤中甲磺隆降解的影响第142页
                2.5 不同初始浓度对土壤中甲磺隆降解的影响第142-143页
                2.6 不同温度对土壤中甲磺隆降解的影响第143-144页
                2.7 不同湿度对土壤中甲磺隆降解的影响第144页
                2.8 外源有机物对土壤中甲磺隆降解的影响第144-145页
                2.9 XJ-412-1灌根对玉米药害的解除作用第145-146页
            3 本章讨论第146-148页
            4 本章小结第148-149页
        参考文献第149-152页
全文总结第152-154页
本论文主要创新点第154-156页
附录一 文中所用培养基及试剂配方第156-160页
附录二 研究获得的相关DNA序列第160-162页
攻读博士学位期间发表的学术论文第162-164页
致谢第164页

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