| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-51页 |
| 第一章 大豆抗虫研究进展 | 第13-45页 |
| 1 大豆虫害种类及危害 | 第13-15页 |
| 2 植物抗虫性研究进展 | 第15-19页 |
| 2.1 植物抗虫性及其分类 | 第16-17页 |
| 2.2 植物抗虫性的生理基础 | 第17-19页 |
| 2.2.1 植物外观形态结构 | 第17页 |
| 2.2.2 植物体内化学物质 | 第17-19页 |
| 2.3 植物抗虫性的进化 | 第19页 |
| 3 大豆抗虫性的研究进展 | 第19-21页 |
| 3.1 大豆抗虫性遗传类型 | 第19-20页 |
| 3.2 大豆抗虫性资源鉴定 | 第20-21页 |
| 4 大豆抗虫育种的发展历程 | 第21-29页 |
| 4.1 大豆形态学抗虫育种 | 第21-25页 |
| 4.2 大豆生化抗虫抗虫育种 | 第25-26页 |
| 4.3 大豆抗虫基因工程育种 | 第26-29页 |
| 4.3.1 来源于微生物、细菌中的抗虫基因 | 第26-27页 |
| 4.3.2 来源于高等植物的抗虫基因 | 第27-29页 |
| 5 次生代谢物与植物抗虫性 | 第29-37页 |
| 5.1 植物次生代谢物概念及分类 | 第29-33页 |
| 5.1.1 酚类 | 第30-31页 |
| 5.1.2 萜类 | 第31-32页 |
| 5.1.3 含氮化合物 | 第32-33页 |
| 5.2 植物次生代谢物的合成途径 | 第33-35页 |
| 5.3 植物次生代谢物的生物防御作用 | 第35-37页 |
| 5.3.1 对病原微生物的防御 | 第35-36页 |
| 5.3.2 对植食性昆虫的防御 | 第36页 |
| 5.3.3 对种内和种间植物的防御 | 第36-37页 |
| 5.4 植物抗虫性次生代谢物基因工程的发展前景 | 第37页 |
| 6 植物茉莉酸的研究进展 | 第37-45页 |
| 6.1 茉莉酸及其衍生物简介 | 第37-38页 |
| 6.2 茉莉酸的分布和生物合成 | 第38-39页 |
| 6.3 茉莉酸的生理功能 | 第39-42页 |
| 6.3.1 茉莉酸类物质对植物生长发育的影响 | 第39-41页 |
| 6.3.2 茉莉酸类化合物在植物非生物胁迫中的作用 | 第41页 |
| 6.3.3 茉莉酸类化合物提高植物对生物胁迫的防御能力 | 第41-42页 |
| 6.4 茉莉酸类物质促进植物抗虫的机制 | 第42-45页 |
| 第二章 植物丙二烯氧化物环化酶的研究进展 | 第45-51页 |
| 1 丙二烯氧化物环化酶的发现 | 第45-46页 |
| 2 丙二烯氧化物环化酶基因的克隆 | 第46页 |
| 3 丙二烯氧化物环化酶的特性 | 第46-47页 |
| 3.1 丙二烯氧化物环化酶的分布 | 第46-47页 |
| 3.2 丙二烯氧化物环化酶的亚细胞定位 | 第47页 |
| 4 丙二烯氧化物环化酶的作用 | 第47-50页 |
| 4.1 丙二烯氧化物环化酶与茉莉酸 | 第47-48页 |
| 4.2 丙二烯氧化物环化酶与水杨酸,脱落酸,过氧化氢 | 第48页 |
| 4.3 丙二烯氧化物环化酶与植物抗逆 | 第48-49页 |
| 4.4 丙二烯氧化物环化酶与次生代谢产物 | 第49页 |
| 4.5 丙二烯氧化物环化酶的进化 | 第49-50页 |
| 5 研究展望 | 第50-51页 |
| 研究目的与意义 | 第51-53页 |
| 第二部分 研究报告 | 第53-95页 |
| 第三章 丙二烯氧化物环化酶基因家族的克隆、进化与表达分析 | 第53-69页 |
| 1 材料与方法 | 第53-58页 |
| 1.1 植物材料 | 第53-54页 |
| 1.2 植物材料的处理 | 第54页 |
| 1.3 大豆总DNA和RNA的提取 | 第54页 |
| 1.4 大豆RNA的纯化与cDNA第一链的合成 | 第54页 |
| 1.5 序列搜索与引物设计 | 第54-55页 |
| 1.6 cDNA末端的快速扩增(RACE) | 第55页 |
| 1.7 GmAOCs基因完整ORF及基因组序列克隆 | 第55页 |
| 1.8 GmAOCs基因序列及结构分析 | 第55-56页 |
| 1.9 GmAOCs基因系统进化分析 | 第56页 |
| 1.10 GmAOCs基因的启动子克隆与顺式作用元件分析 | 第56页 |
| 1.11 荧光定量PCR及数据分析 | 第56-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-68页 |
| 2.1 GmAOCs基因的克隆 | 第58-59页 |
| 2.2 GmAOCs基因的生物信息学分析 | 第59-64页 |
| 2.2.1 GmAOCs基因的结构特征和基因组分布 | 第59-60页 |
| 2.2.2 GmAOCs基因的氨基酸序列分析 | 第60-61页 |
| 2.2.3 多序列比对与系统发生分析 | 第61页 |
| 2.2.4 选择压(Ka/Ks)分析 | 第61-64页 |
| 2.3 GmAOCs基因启动子克隆与序列分析 | 第64页 |
| 2.4 GmAOCs基因的表达分析 | 第64-68页 |
| 2.4.1 组织表达分析 | 第64-65页 |
| 2.4.2 胁迫响应表达分析 | 第65-68页 |
| 3 讨论 | 第68-69页 |
| 第四章 GmAOCs基因转化烟草及功能分析 | 第69-95页 |
| 1 材料与方法 | 第69-75页 |
| 1.1 实验材料 | 第69页 |
| 1.2 主要仪器及试剂 | 第69-70页 |
| 1.3 宿主菌与质粒载体 | 第70页 |
| 1.4 表达载体的构建 | 第70页 |
| 1.5 表达载体的构建 | 第70-72页 |
| 1.5.1 受体材料准备 | 第70-71页 |
| 1.5.2 农杆菌的培养 | 第71页 |
| 1.5.3 农杆菌浸染叶盘 | 第71页 |
| 1.5.4 选择培养 | 第71页 |
| 1.5.5 继代选择培养 | 第71页 |
| 1.5.6 生根培养 | 第71-72页 |
| 1.5.7 T_1代植株获得 | 第72页 |
| 1.6 转基因烟草T1代阳性植株的鉴定 | 第72页 |
| 1.7 GmAOC1,GmAOC3和GmAOC5基因在转基因烟草中亚细胞定位 | 第72页 |
| 1.8 转基因烟草的抗虫性实验 | 第72-73页 |
| 1.8.1 斜纹夜蛾自由取食试验 | 第72-73页 |
| 1.8.2 斜纹夜蛾强迫试验饲喂试验 | 第73页 |
| 1.9 转基因烟草茸毛的扫描电镜观察 | 第73页 |
| 1.10 转基因烟草抗虫性相关基因表达的分析 | 第73页 |
| 1.11 转基因烟草抗虫性相关生理指标的测定 | 第73-75页 |
| 1.11.1 多酚含量测定 | 第73-74页 |
| 1.11.2 苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活测定 | 第74页 |
| 1.11.3 茉莉酸含量测定 | 第74页 |
| 1.11.4 转基因烟草挥发物测定 | 第74-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-91页 |
| 2.1 植物表达载体的构建 | 第75-77页 |
| 2.2 转基因烟草阳性鉴定和外源基因表达的荧光定量分析 | 第77-80页 |
| 2.3 GmAOC1,GmAOC3和GmAOC5蛋白的亚细胞定位 | 第80-81页 |
| 2.4 转基因烟草抗虫性的鉴定和分析 | 第81-82页 |
| 2.4.1 斜纹夜蛾自由取食试验 | 第81页 |
| 2.4.2 斜纹夜蛾强迫饲喂试验 | 第81-82页 |
| 2.5 转基因烟草茉莉酸含量测定 | 第82-83页 |
| 2.6 转基因烟草绒毛密度的分析 | 第83-84页 |
| 2.7 转基因烟草抗虫相关基因的表达分析 | 第84-87页 |
| 2.7.1 可诱导型胰蛋白酶抑制剂基因表达的荧光定量分析 | 第85-86页 |
| 2.7.2 烟碱合成途径关键酶基因表达荧光定量分析 | 第86-87页 |
| 2.8 转基因烟草抗虫性相关生理指标的测定 | 第87-89页 |
| 2.8.1 苯丙氨酸解氨酶(PAL)酶活测定 | 第87-88页 |
| 2.8.2 多酚含量测定 | 第88-89页 |
| 2.9 转基因烟草挥发物测定 | 第89-91页 |
| 3 讨论 | 第91-95页 |
| 全文结论 | 第95-97页 |
| 本研究创新之处 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-121页 |
| 附录 | 第121-129页 |
| 攻读学位期间发表与待发表的论文 | 第129-131页 |
| 致谢 | 第131页 |
