摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-36页 |
第一章 水稻细菌性条斑病菌的毒性和致病机理研究 | 第12-24页 |
1 稻黄单胞菌稻生致病变种和水稻细菌性条斑病概述 | 第12-14页 |
2 水稻细菌性条斑病菌的分类与分化 | 第14-15页 |
3 水稻细菌性条斑病菌的毒性和致病机理 | 第15-24页 |
·胞外水解酶类 | 第16-17页 |
·胞外多糖和脂多糖 | 第17-19页 |
·依赖dsp基因的效应分子 | 第19-20页 |
·hrp基因 | 第20-21页 |
·毒素 | 第21-22页 |
·生长调节物质 | 第22-24页 |
第二章 群体感应系统及其毒性调控 | 第24-32页 |
1 群体感应系统的发现 | 第24-25页 |
2 不同类型的QS信号分子 | 第25-27页 |
3 DSF型QS信号传导通路 | 第27-30页 |
·RpfC和RpfG构成双组分系统感应和转换DSF信号 | 第28页 |
·第二信使cyclic-di-GMP的调节DSF信号传导 | 第28-29页 |
·全局性转录调节因子Clp与DSF信号传导有关 | 第29-30页 |
4 群体感应系统的应用 | 第30-32页 |
·细菌群感效应的淬灭 | 第30页 |
·细菌群体感应的应用研究进展 | 第30-32页 |
第三章 细菌鞭毛的研究进展 | 第32-36页 |
1 细菌鞭毛的结构 | 第32-33页 |
2 细菌鞭毛的合成 | 第33-34页 |
3 细菌鞭毛的运动机理 | 第34页 |
4 细菌鞭毛的功能 | 第34-36页 |
第二部分 研究内容 | 第36-82页 |
第一章 水稻细菌性条斑病菌中受DSF调控的鞭毛基因flgD、flgE的功能分析 | 第36-64页 |
1 材料与方法 | 第37-51页 |
·供试菌株、质粒和引物 | 第37-38页 |
·培养基及抗生素 | 第38-40页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
·质粒的提取 | 第41-42页 |
·DNA酶切、连接和PCR产物回收 | 第42页 |
·质粒的转化 | 第42-44页 |
·Southern杂交 | 第44-47页 |
·缺失突变体的构建 | 第47-48页 |
·互补菌株的构建 | 第48页 |
·细胞形态和鞭毛观察 | 第48页 |
·游动性和趋化性试验 | 第48页 |
·细菌沉降性试验 | 第48-49页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第49页 |
·胞外多糖的检测 | 第49页 |
·生物膜的检测 | 第49页 |
·过敏性反应和致病性的测定 | 第49-50页 |
·总RNA的提取及RT-PCR扩增 | 第50-51页 |
·序列分析 | 第51页 |
2 结果与分析 | 第51-62页 |
·flgD和flgE基因的克隆 | 第51-52页 |
·flgD和flgE突变株的构建 | 第52-54页 |
·互补菌株的构建 | 第54-55页 |
·flgD和flgE基因突变影响Xoc鞭毛合成和运动性 | 第55-56页 |
·flgD和flgE基因的突变不影响Xoc正常生长 | 第56-57页 |
·flgD和flgE基因突变后产生沉降现象 | 第57-58页 |
·flgD和flgE基因突变后不影响胞外蛋白酶的产生 | 第58页 |
·flgD和flgE基因突变后不影响胞外多糖的产生 | 第58-59页 |
·flgD和flgE基因与生物膜的形成无关 | 第59-60页 |
·flgD和dgE基因突变影响Xoc致病性,但不影响过敏性反应 | 第60-61页 |
·RT-PCR检测结果 | 第61-62页 |
3 讨论与结论 | 第62-64页 |
·flgD和flgE基因与水稻细菌性条斑病菌鞭毛合成相关 | 第62-63页 |
·flgD和flgE基因与水稻细菌性条斑病菌致病性相关,但不影响过敏性反应 | 第63页 |
·flgD和flgE基因受DSF调控 | 第63-64页 |
第二章 水稻细菌性条斑病菌中受DSF调控的基因asnB的功能分析 | 第64-82页 |
1 材料与方法 | 第65-68页 |
·供试菌株、质粒和引物 | 第65页 |
·培养基及抗生素 | 第65页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第65页 |
·质粒的提取 | 第65-66页 |
·DNA酶切、连接和PCR产物回收 | 第66页 |
·质粒的转化 | 第66页 |
·Southern杂交 | 第66页 |
·缺失突变体的构建 | 第66页 |
·互补菌株的构建 | 第66页 |
·细胞形态和鞭毛观察 | 第66-67页 |
·游动性和趋化性试验 | 第67页 |
·细菌沉降性试验 | 第67页 |
·胞外蛋白酶的检测 | 第67页 |
·胞外多糖(EPS)的检测 | 第67页 |
·生物膜的检测 | 第67页 |
·过敏性反应和致病性的测定 | 第67页 |
·细菌在水稻叶片内的繁殖能力测定 | 第67页 |
·氮源利用检测 | 第67-68页 |
·总RNA的提取及RT-PCR扩增 | 第68页 |
·序列分析 | 第68页 |
2 结果与分析 | 第68-79页 |
·asnB基因的克隆 | 第68-69页 |
·asnB基因突变株的构建 | 第69-71页 |
·互补菌株的构建 | 第71-72页 |
·asnB基因突变不影响Xoc鞭毛合成和运动性 | 第72-73页 |
·asnB基因突变后不产生沉降现象 | 第73页 |
·asnB基因突变后不影响胞外蛋白酶的产生 | 第73-74页 |
·asnB基因突变后不影响胞外多糖的产生 | 第74-75页 |
·asnB基因与生物膜的形成无关 | 第75页 |
·asnB基因突变影响Xoc致病性,但不影响过敏性反应 | 第75-76页 |
·asnB基因的突变影响细菌在水稻叶片内的繁殖能力 | 第76-77页 |
·asnB基因的突变影响Xoc对不同氮源的利用 | 第77-79页 |
·RT-PCR检测结果 | 第79页 |
3 讨论与结论 | 第79-82页 |
·asnB基因与水稻细菌性条斑病菌致病性相关,但不影响过敏性反应 | 第80页 |
·asnB基因影响水稻细菌性条斑病菌的生长能力 | 第80页 |
·asnB基因受DSF调控 | 第80-82页 |
附录 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
致谢 | 第92页 |