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水稻细菌性条斑病菌中受DSF调控的鞭毛基因和天冬酰胺合成酶基因的功能分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一部分 文献综述第12-36页
 第一章 水稻细菌性条斑病菌的毒性和致病机理研究第12-24页
  1 稻黄单胞菌稻生致病变种和水稻细菌性条斑病概述第12-14页
  2 水稻细菌性条斑病菌的分类与分化第14-15页
  3 水稻细菌性条斑病菌的毒性和致病机理第15-24页
   ·胞外水解酶类第16-17页
   ·胞外多糖和脂多糖第17-19页
   ·依赖dsp基因的效应分子第19-20页
   ·hrp基因第20-21页
   ·毒素第21-22页
   ·生长调节物质第22-24页
 第二章 群体感应系统及其毒性调控第24-32页
  1 群体感应系统的发现第24-25页
  2 不同类型的QS信号分子第25-27页
  3 DSF型QS信号传导通路第27-30页
   ·RpfC和RpfG构成双组分系统感应和转换DSF信号第28页
   ·第二信使cyclic-di-GMP的调节DSF信号传导第28-29页
   ·全局性转录调节因子Clp与DSF信号传导有关第29-30页
  4 群体感应系统的应用第30-32页
   ·细菌群感效应的淬灭第30页
   ·细菌群体感应的应用研究进展第30-32页
 第三章 细菌鞭毛的研究进展第32-36页
  1 细菌鞭毛的结构第32-33页
  2 细菌鞭毛的合成第33-34页
  3 细菌鞭毛的运动机理第34页
  4 细菌鞭毛的功能第34-36页
第二部分 研究内容第36-82页
 第一章 水稻细菌性条斑病菌中受DSF调控的鞭毛基因flgD、flgE的功能分析第36-64页
  1 材料与方法第37-51页
   ·供试菌株、质粒和引物第37-38页
   ·培养基及抗生素第38-40页
   ·细菌基因组DNA的提取第40-41页
   ·质粒的提取第41-42页
   ·DNA酶切、连接和PCR产物回收第42页
   ·质粒的转化第42-44页
   ·Southern杂交第44-47页
   ·缺失突变体的构建第47-48页
   ·互补菌株的构建第48页
   ·细胞形态和鞭毛观察第48页
   ·游动性和趋化性试验第48页
   ·细菌沉降性试验第48-49页
   ·胞外蛋白酶的检测第49页
   ·胞外多糖的检测第49页
   ·生物膜的检测第49页
   ·过敏性反应和致病性的测定第49-50页
   ·总RNA的提取及RT-PCR扩增第50-51页
   ·序列分析第51页
  2 结果与分析第51-62页
   ·flgD和flgE基因的克隆第51-52页
   ·flgD和flgE突变株的构建第52-54页
   ·互补菌株的构建第54-55页
   ·flgD和flgE基因突变影响Xoc鞭毛合成和运动性第55-56页
   ·flgD和flgE基因的突变不影响Xoc正常生长第56-57页
   ·flgD和flgE基因突变后产生沉降现象第57-58页
   ·flgD和flgE基因突变后不影响胞外蛋白酶的产生第58页
   ·flgD和flgE基因突变后不影响胞外多糖的产生第58-59页
   ·flgD和flgE基因与生物膜的形成无关第59-60页
   ·flgD和dgE基因突变影响Xoc致病性,但不影响过敏性反应第60-61页
   ·RT-PCR检测结果第61-62页
  3 讨论与结论第62-64页
   ·flgD和flgE基因与水稻细菌性条斑病菌鞭毛合成相关第62-63页
   ·flgD和flgE基因与水稻细菌性条斑病菌致病性相关,但不影响过敏性反应第63页
   ·flgD和flgE基因受DSF调控第63-64页
 第二章 水稻细菌性条斑病菌中受DSF调控的基因asnB的功能分析第64-82页
  1 材料与方法第65-68页
   ·供试菌株、质粒和引物第65页
   ·培养基及抗生素第65页
   ·细菌基因组DNA的提取第65页
   ·质粒的提取第65-66页
   ·DNA酶切、连接和PCR产物回收第66页
   ·质粒的转化第66页
   ·Southern杂交第66页
   ·缺失突变体的构建第66页
   ·互补菌株的构建第66页
   ·细胞形态和鞭毛观察第66-67页
   ·游动性和趋化性试验第67页
   ·细菌沉降性试验第67页
   ·胞外蛋白酶的检测第67页
   ·胞外多糖(EPS)的检测第67页
   ·生物膜的检测第67页
   ·过敏性反应和致病性的测定第67页
   ·细菌在水稻叶片内的繁殖能力测定第67页
   ·氮源利用检测第67-68页
   ·总RNA的提取及RT-PCR扩增第68页
   ·序列分析第68页
  2 结果与分析第68-79页
   ·asnB基因的克隆第68-69页
   ·asnB基因突变株的构建第69-71页
   ·互补菌株的构建第71-72页
   ·asnB基因突变不影响Xoc鞭毛合成和运动性第72-73页
   ·asnB基因突变后不产生沉降现象第73页
   ·asnB基因突变后不影响胞外蛋白酶的产生第73-74页
   ·asnB基因突变后不影响胞外多糖的产生第74-75页
   ·asnB基因与生物膜的形成无关第75页
   ·asnB基因突变影响Xoc致病性,但不影响过敏性反应第75-76页
   ·asnB基因的突变影响细菌在水稻叶片内的繁殖能力第76-77页
   ·asnB基因的突变影响Xoc对不同氮源的利用第77-79页
   ·RT-PCR检测结果第79页
  3 讨论与结论第79-82页
   ·asnB基因与水稻细菌性条斑病菌致病性相关,但不影响过敏性反应第80页
   ·asnB基因影响水稻细菌性条斑病菌的生长能力第80页
   ·asnB基因受DSF调控第80-82页
附录第82-84页
参考文献第84-92页
致谢第92页

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