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基于qRT-PCR建立评价Ⅱ型登革病毒抗体中和效应的微量中和试验方法

缩略语表第5-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-16页
文献回顾第16-30页
第一部分 一步法TaqMan探针qRT-PCR检测DENV2方法的建立及优化第30-46页
    1 材料第30-33页
        1.1 毒种和细胞株第30页
        1.2 主要试剂第30-31页
        1.3 常用培养液(基)与缓冲液第31-32页
        1.4 主要仪器与器材第32-33页
    2 方法第33-40页
        2.1 细胞培养第33页
        2.2 病毒的增殖与毒力检测第33-35页
        2.3 引物设计与合成第35-36页
        2.4 标准品的制备第36-38页
        2.5 标准曲线第38-40页
    3 结果第40-44页
        3.1 浓缩DENV2毒力检测第40-41页
        3.2 DENV2 NS5基因片段的PCR扩增第41-44页
    4 讨论第44-46页
第二部分 检测DENV2抗体中和效应的qRT-PCR-MN方法的建立第46-59页
    1 材料第46-47页
        1.1 毒种和细胞株第46页
        1.2 主要试剂与抗体第46页
        1.3 常用培养液(基)与缓冲液第46-47页
        1.4 主要仪器与器材第47页
    2 方法第47-50页
        2.1 引物、探针设计与合成第47页
        2.2 空斑减少中和试验第47-48页
        2.3 qRT-PCR-MN测定第48-49页
        2.4 提取DENV2感染细胞内总RNA第49-50页
        2.5 不同的实时定量PCR仪比对第50页
    3 结果第50-56页
        3.1 最佳病毒感染剂量和感染后检测时间的确定第50-51页
        3.2 感染后细胞内外病毒量的相关性第51页
        3.3 qRT-PCR方法可以辨别病毒感染剂量两倍的变化第51-52页
        3.4 PRNT与qRT-PCR-MN相关性分析第52-54页
        3.5 qRT-PCR-MN方法的特异性、灵敏度和一致性分析结果第54-55页
        3.6 qRT-PCR-MN方法在不同实时定量PCR仪上一致性的分析第55-56页
    4 讨论第56-59页
小结第59-60页
参考文献第60-73页
个人简历和研究成果第73-74页
致谢第74-75页

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