| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-37页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 水稻细胞质雄性不育(CMS) | 第15-22页 |
| 1.2.1 水稻CMS类型及育性相关基因 | 第15-18页 |
| 1.2.2 水稻CMS的产生机制 | 第18-20页 |
| 1.2.3 水稻CMS的育性恢复机理 | 第20-22页 |
| 1.3 水稻光温敏核雄性不育(PTGMS) | 第22-35页 |
| 1.3.1 水稻PTGMS的种质资源及其分类 | 第22-23页 |
| 1.3.2 水稻PTGMS的育性转换模式 | 第23-24页 |
| 1.3.3 水稻PTGMS的细胞学及生理生化特性研究 | 第24-26页 |
| 1.3.4 水稻PTGMS的蛋白质组学研究 | 第26-28页 |
| 1.3.5 水稻PTGMS基因的定位与克隆 | 第28-33页 |
| 1.3.6 水稻PTGMS育性调控机理研究 | 第33-35页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.2 实验材料的种植及光周期处理 | 第37页 |
| 2.3 实验材料的采集 | 第37-38页 |
| 2.4 水稻花粉的育性鉴定 | 第38-39页 |
| 2.5 双向电泳(2-DE)及质谱分析 | 第39-44页 |
| 2.5.1 水稻不同组织蛋白样品制备 | 第39页 |
| 2.5.2 蛋白质样品预处理 | 第39-40页 |
| 2.5.3 蛋白质含量测定 | 第40页 |
| 2.5.4 第一向等点聚焦(IEF) | 第40-41页 |
| 2.5.5 第二向SDS-PAGE垂直板电泳 | 第41-42页 |
| 2.5.6 蛋白凝胶染色 | 第42页 |
| 2.5.7 凝胶扫描与图像分析 | 第42-43页 |
| 2.5.8 蛋白点的脱色与胶内酶解 | 第43页 |
| 2.5.9 MALDI-TOF/TOF-MS质谱分析 | 第43-44页 |
| 2.5.10 差异表达蛋白的生物信息学分析 | 第44页 |
| 2.6 荧光定量PCR(qPCR) | 第44-47页 |
| 2.6.1 总RNA的提取 | 第44-45页 |
| 2.6.2 DNase Ⅰ处理及RNA质量检测 | 第45-46页 |
| 2.6.3 反转录及产物的PCR检测 | 第46-47页 |
| 2.6.4 引物设计及qPCR分析 | 第47页 |
| 2.7 Western Blot | 第47-51页 |
| 2.7.1 人工合成多肽 | 第47-48页 |
| 2.7.2 多克隆抗体制备及抗体纯化 | 第48-49页 |
| 2.7.3 蛋白样品制备 | 第49-50页 |
| 2.7.4 SDS-PAGE | 第50页 |
| 2.7.5 蛋白免疫印迹分析 | 第50-51页 |
| 2.8 类黄酮含量的测定 | 第51-52页 |
| 3 结果与分析 | 第52-80页 |
| 3.1 光周期处理对花粉育性转换的诱导 | 第52-54页 |
| 3.2 水稻不同组织双向电泳图像分析及差异蛋白点的质谱鉴定 | 第54-64页 |
| 3.2.1 凝胶图像分析与蛋白质谱鉴定 | 第54-62页 |
| 3.2.2 D52S和农垦58S差异表达蛋白的比较分析 | 第62-64页 |
| 3.3 差异表达蛋白的功能与聚类分析 | 第64-73页 |
| 3.4 差异表达蛋白的qPCR分析 | 第73-77页 |
| 3.4.1 RNA质量及反转录检测和qPCR条件优化 | 第73-75页 |
| 3.4.2 基因表达的相对定量分析 | 第75-77页 |
| 3.5 差异表达蛋白的Western Blot分析 | 第77-79页 |
| 3.6 类黄酮含量分析 | 第79-80页 |
| 4 讨论 | 第80-90页 |
| 4.1 D52S的育性光反应特性及应用价值 | 第80-81页 |
| 4.2 蛋白质表达差异凝胶图的分析 | 第81页 |
| 4.3 差异表达蛋白与育性的关系 | 第81-86页 |
| 4.3.1 次生代谢相关蛋白 | 第81-82页 |
| 4.3.2 能量与代谢相关蛋白 | 第82-84页 |
| 4.3.3 蛋白质的合成与加工 | 第84-85页 |
| 4.3.4 胁迫与防御蛋白 | 第85页 |
| 4.3.5 信号转导调控与细胞结构生长相关蛋白 | 第85-86页 |
| 4.4 光周期诱导育性转变的蛋白调控网络 | 第86-88页 |
| 4.5 转录水平、蛋白免疫印迹和类黄酮含量分析 | 第88-90页 |
| 5 结论与下一步研究的思考 | 第90-92页 |
| 5.1 结论 | 第90-91页 |
| 5.2 下一步研究的思考 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-109页 |
| 在读期间发表或待发表论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
