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游离放线菌发酵废渣中肽聚糖的提取、纯化与活性研究

致谢第4-5页
中文摘要第5-7页
英文摘要第7-8页
缩略词简表第9-14页
第一章 绪论第14-23页
    1.1 阿卡波糖发酵菌渣处理方法介绍第14页
    1.2 放线菌的研究进展第14-15页
    1.3 细菌细胞壁肽聚糖(PG)的研究进展第15-22页
        1.3.1 肽聚糖的特性第15-17页
            1.3.1.1 糖链第17页
            1.3.1.2 肽部分第17页
        1.3.2 PG的提取第17-19页
        1.3.3 PG的生物活性和功能第19-22页
            1.3.3.1 PG的免疫作用机制第19-20页
            1.3.3.2 PG刺激机体免疫应答研究进展第20-22页
    1.4 课题设计及研究意义第22-23页
第二章 肽聚糖的提取工艺研究及组分分析第23-52页
    前言第23-25页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 仪器与试剂第25-26页
        2.1.2 放线菌肽聚糖(PG)的菌渣的预处理第26页
    2.2 去除磷壁酸方法的研究第26-28页
        2.2.1 传统溶液法去除磷壁酸第26页
        2.2.2 机械球磨法除去除磷壁酸第26页
        2.2.3 菌渣肽聚糖磷壁酸去除率的测定第26-27页
        2.2.4 菌渣肽聚糖破坏程度检测第27-28页
    2.3 去除蛋白质方法的研究第28-29页
        2.3.1 传统溶液法去除蛋白质第28页
        2.3.2 机械球磨法去除蛋白质第28页
        2.3.3 上清液中蛋白质含量检测第28-29页
    2.4 传统溶液法与机械球磨法提取肽聚糖总路线第29页
    2.5 放线菌肽聚糖的初步鉴定和相关分析第29-32页
        2.5.1 溶菌酶消化实验第29页
        2.5.2 氨基酸组分分析实验第29-30页
        2.5.3 红外光谱分析第30页
        2.5.4 肽聚糖提取物化学成分分析第30-32页
            2.5.4.1 中性糖含量测定第30页
            2.5.4.2 氨基己糖含量测定第30-31页
            2.5.4.3 蛋白质含量测定第31-32页
            2.5.4.4 脂质含量测定第32页
            2.5.4.5 总磷含量测定第32页
    2.6 结果与讨论第32-51页
        2.6.1 传统溶液法去除磷璧酸研究第33-35页
            2.6.1.1 TCA用量对磷壁酸去除的影响第33-34页
            2.6.1.2 温度、时间对磷壁酸去除的影响第34-35页
        2.6.2 机械球磨法去除磷壁酸单因素实验第35-38页
            2.6.2.1 碱类别对磷壁酸去除及肽聚糖破坏的影响第35-36页
            2.6.2.2 碱用量对磷壁酸去除及肽聚糖破坏的影响第36页
            2.6.2.3 球磨时间对磷壁酸去除及肽聚糖破坏的影响第36-37页
            2.6.2.4 球磨转速对磷壁酸去除及肽聚糖破坏效果第37-38页
            2.6.2.5 球料比对磷壁酸去除及肽聚糖破坏的影响第38页
        2.6.3 机械球磨法去除磷壁酸响应面结果第38-42页
            2.6.3.1 回归模型的建立与分析第38-41页
            2.6.3.2 磷壁酸去除工艺响应面分析与优化第41-42页
        2.6.4 传统溶液法去除蛋白质研究第42-43页
            2.6.4.1 SDS用量对蛋白质去除效果第42页
            2.6.4.2 时间、温度对蛋白质去除的影响第42-43页
        2.6.5 机械球磨法去除蛋白质研究第43-46页
            2.6.5.1 球磨时间对蛋白质去除作用考察第43-44页
            2.6.5.2 助剂用量对蛋白质去除作用考察第44-45页
            2.6.5.3 球料比对蛋白质去除作用考察第45页
            2.6.5.4 三因素三水平正交实验第45-46页
        2.6.6 传统溶液法与机械球磨法工艺比较第46-48页
        2.6.7 溶菌酶消化实验第48页
        2.6.8 氨基酸组分分析第48-49页
        2.6.9 红外光谱分析第49-50页
        2.6.10 肽聚糖提取物化学成分分析第50-51页
    本章小结第51-52页
第三章 肽聚糖可溶性片段分离纯化与生物活性研究第52-67页
    前言第52-54页
    3.1 主要实验材料及仪器第54-55页
    3.2 HPLC液相条件及半制备液相条件第55页
    3.3 可溶性肽聚糖(SPG)提取时间的研究第55页
    3.4 SPG组分分析与制备第55页
    3.5 SPG组分的脱盐纯化第55-56页
    3.6 SPG-1 对鼠免疫活性影响实验第56-57页
        3.6.1 SPG-1 对鼠脾脏淋巴细胞的增殖影响第56页
            3.6.1.1 脾脏淋巴细胞悬液制备第56页
            3.6.1.2 脾脏淋巴细胞增殖实验第56页
        3.6.2 SPG-1 对鼠巨噬细胞的体外免疫刺激实验第56-57页
            3.6.2.1 巨噬细胞培养第56-57页
            3.6.2.2 细胞因子检测第57页
    3.7 SPG-1 对肿瘤细胞抑制实验第57-58页
    3.8 数据统计第58页
    3.9 结果与讨论第58-66页
        3.9.1 溶菌酶酶解时间的研究第58-59页
        3.9.2 SPG组分分析与制备第59-60页
        3.9.3 SPG-1 组分的脱盐纯化第60页
        3.9.4 SPG-1 对鼠脾脏淋巴细胞的增殖研究第60-61页
        3.9.5 SPG-1 对巨噬细胞体外刺激研究第61-62页
        3.9.6 SPG-1 对raw264.7 细胞产生细胞因子效果第62-64页
        3.9.7 SPG-1 对A549、HT29、Eca-109、对HepG2癌细胞的抑制效果第64-66页
    本章小结第66-67页
总结与展望第67-69页
参考文献第69-76页
硕士期间发表的论文和专利第76页

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