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转录因子HOXC9在胶质母细胞瘤中的作用及其对细胞自噬的调控研究

摘要第9-13页
Abstract第13-17页
第1章 文献综述第18-28页
    1.1 前言第18-19页
    1.2 HOX基因与肿瘤第19-22页
    1.3 细胞自噬第22-24页
    1.4 细胞自噬与肿瘤第24-28页
第2章 引言第28-32页
    2.1 研究背景及目的意义第28页
    2.2 主要研究内容第28-30页
    2.3 技术路线第30-32页
第3章 HOXC9对胶质母细胞瘤预后的影响及其表达分析第32-48页
    3.1 实验材料第32-38页
        3.1.1 实验细胞及组织样本第32页
        3.1.2 实验所用数据库第32页
        3.1.3 数据处理软件第32页
        3.1.4 实验试剂第32-34页
        3.1.5 主要实验试剂的配制第34-37页
        3.1.6 主要仪器第37-38页
    3.2 实验方法第38-43页
        3.2.1 细胞复苏第38页
        3.2.2 细胞培养第38页
        3.2.3 细胞传代第38页
        3.2.4 细胞冻存第38-39页
        3.2.5 免疫印迹法检测蛋白表达第39-40页
        3.2.6 组织包埋及切片第40-41页
        3.2.7 H&E染色第41-42页
        3.2.8 免疫组织化学(IHC)第42-43页
        3.2.9 预后分析第43页
        3.2.10 基因表达量与临床分级关系分析第43页
        3.2.11 统计分析第43页
    3.3 实验结果与分析第43-46页
        3.3.1 HOXC9的表达量与胶质瘤病人的预后关系分析第43-44页
        3.3.2 HOXC9在不同分级的胶质瘤中的表达及预后差异分析第44-45页
        3.3.3 HOXC9在胶质母细胞瘤细胞系及临床样本中的表达分析第45-46页
    3.4 讨论第46-48页
第4章 HOXC9对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移侵袭及成瘤能力的影响第48-74页
    4.1 实验材料第48-55页
        4.1.1 实验细胞及动物第48页
        4.1.2 实验试剂第48-51页
        4.1.3 主要仪器第51-52页
        4.1.4 主要实验试剂的配制第52-55页
    4.2 实验方法第55-66页
        4.2.1 RNA提取第55-56页
        4.2.2 RNA反转录第56页
        4.2.3 荧光实时定量PCR第56-57页
        4.2.4 免疫印迹法检测蛋白表达第57-58页
        4.2.5 超纯质粒提取第58-59页
        4.2.6 慢病毒转染及细胞感染第59-60页
        4.2.7 MTT法测细胞增殖能力第60-61页
        4.2.8 BrdU实验第61页
        4.2.9 细胞划痕实验第61-62页
        4.2.10 Transwell实验第62页
        4.2.11 统计分析第62页
        4.2.12 软琼脂克隆形成实验(Soft Agar Assay)第62-63页
        4.2.13 小鼠皮下成瘤第63页
        4.2.14 小鼠原位移植瘤第63-64页
        4.2.15 组织包埋及切片第64页
        4.2.16 H&E染色第64-65页
        4.2.17 免疫组织化学(IHC)第65-66页
    4.3 实验结果与分析第66-73页
        4.3.1 shHOXC9载体RNA干扰效率测定第66-67页
        4.3.2 下调HOXC9对胶质母细胞瘤细胞增殖能力的影响第67-69页
        4.3.3 下调HOXC9对胶质母细胞瘤细胞迁移及侵袭能力的影响第69-70页
        4.3.4 下调HOXC9抑制胶质母细胞瘤细胞克隆形成能力第70-71页
        4.3.5 下调HOXC9抑制胶质母细胞瘤细胞体内成瘤能力第71-73页
    4.4 讨论第73-74页
第5章 HOXC9对胶质母细胞瘤自噬的影响及其调控机制第74-102页
    5.1 实验材料第74-81页
        5.1.1 实验细胞第74页
        5.1.2 实验试剂第74-76页
        5.1.3 主要仪器第76-77页
        5.1.4 主要实验试剂的配制第77-81页
    5.2 实验方法第81-92页
        5.2.1 流式细胞凋亡检测第81页
        5.2.2 免疫印迹法检测蛋白表达第81-83页
        5.2.3 细胞瞬时转染第83页
        5.2.4 免疫荧光实验第83页
        5.2.5 DAPK1和Beclin1慢病毒干扰载体构建第83-86页
        5.2.6 双荧光素酶报告系统分析第86-89页
        5.2.7 染色体免疫共沉淀实验第89-91页
        5.2.8 慢病毒转染及细胞感染第91-92页
    5.3 实验结果与分析第92-99页
        5.3.1 下调HOXC9并不引起胶质母细胞瘤细胞凋亡第92页
        5.3.2 下调HOXC9引起胶质母细胞瘤细胞自噬第92-94页
        5.3.3 DAPK1是下调HOXC9引发细胞自噬的重要下游效应原件第94-98页
        5.3.4 HOXC9通过转录调控DAPK1的表达第98-99页
    5.4 讨论第99-102页
第六章 综合与讨论第102-104页
    6.1 HOXC9对胶质母细胞瘤预后的影响及其表达分析第102页
    6.2 HOXC9对胶质母细胞瘤增殖、迁移侵袭能力的影响第102页
    6.3 HOXC9对胶质母细胞瘤细胞成瘤能力的影响第102-103页
    6.4 HOXC9对胶质母细胞瘤自噬的影响及其调控机制第103-104页
论文创新点第104-106页
参考文献第106-118页
攻读学位期间发表论文第118-120页
参研课题情况第120-122页
致谢第122页

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