摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
第1章 文献综述 | 第18-28页 |
1.1 前言 | 第18-19页 |
1.2 HOX基因与肿瘤 | 第19-22页 |
1.3 细胞自噬 | 第22-24页 |
1.4 细胞自噬与肿瘤 | 第24-28页 |
第2章 引言 | 第28-32页 |
2.1 研究背景及目的意义 | 第28页 |
2.2 主要研究内容 | 第28-30页 |
2.3 技术路线 | 第30-32页 |
第3章 HOXC9对胶质母细胞瘤预后的影响及其表达分析 | 第32-48页 |
3.1 实验材料 | 第32-38页 |
3.1.1 实验细胞及组织样本 | 第32页 |
3.1.2 实验所用数据库 | 第32页 |
3.1.3 数据处理软件 | 第32页 |
3.1.4 实验试剂 | 第32-34页 |
3.1.5 主要实验试剂的配制 | 第34-37页 |
3.1.6 主要仪器 | 第37-38页 |
3.2 实验方法 | 第38-43页 |
3.2.1 细胞复苏 | 第38页 |
3.2.2 细胞培养 | 第38页 |
3.2.3 细胞传代 | 第38页 |
3.2.4 细胞冻存 | 第38-39页 |
3.2.5 免疫印迹法检测蛋白表达 | 第39-40页 |
3.2.6 组织包埋及切片 | 第40-41页 |
3.2.7 H&E染色 | 第41-42页 |
3.2.8 免疫组织化学(IHC) | 第42-43页 |
3.2.9 预后分析 | 第43页 |
3.2.10 基因表达量与临床分级关系分析 | 第43页 |
3.2.11 统计分析 | 第43页 |
3.3 实验结果与分析 | 第43-46页 |
3.3.1 HOXC9的表达量与胶质瘤病人的预后关系分析 | 第43-44页 |
3.3.2 HOXC9在不同分级的胶质瘤中的表达及预后差异分析 | 第44-45页 |
3.3.3 HOXC9在胶质母细胞瘤细胞系及临床样本中的表达分析 | 第45-46页 |
3.4 讨论 | 第46-48页 |
第4章 HOXC9对胶质母细胞瘤细胞增殖、迁移侵袭及成瘤能力的影响 | 第48-74页 |
4.1 实验材料 | 第48-55页 |
4.1.1 实验细胞及动物 | 第48页 |
4.1.2 实验试剂 | 第48-51页 |
4.1.3 主要仪器 | 第51-52页 |
4.1.4 主要实验试剂的配制 | 第52-55页 |
4.2 实验方法 | 第55-66页 |
4.2.1 RNA提取 | 第55-56页 |
4.2.2 RNA反转录 | 第56页 |
4.2.3 荧光实时定量PCR | 第56-57页 |
4.2.4 免疫印迹法检测蛋白表达 | 第57-58页 |
4.2.5 超纯质粒提取 | 第58-59页 |
4.2.6 慢病毒转染及细胞感染 | 第59-60页 |
4.2.7 MTT法测细胞增殖能力 | 第60-61页 |
4.2.8 BrdU实验 | 第61页 |
4.2.9 细胞划痕实验 | 第61-62页 |
4.2.10 Transwell实验 | 第62页 |
4.2.11 统计分析 | 第62页 |
4.2.12 软琼脂克隆形成实验(Soft Agar Assay) | 第62-63页 |
4.2.13 小鼠皮下成瘤 | 第63页 |
4.2.14 小鼠原位移植瘤 | 第63-64页 |
4.2.15 组织包埋及切片 | 第64页 |
4.2.16 H&E染色 | 第64-65页 |
4.2.17 免疫组织化学(IHC) | 第65-66页 |
4.3 实验结果与分析 | 第66-73页 |
4.3.1 shHOXC9载体RNA干扰效率测定 | 第66-67页 |
4.3.2 下调HOXC9对胶质母细胞瘤细胞增殖能力的影响 | 第67-69页 |
4.3.3 下调HOXC9对胶质母细胞瘤细胞迁移及侵袭能力的影响 | 第69-70页 |
4.3.4 下调HOXC9抑制胶质母细胞瘤细胞克隆形成能力 | 第70-71页 |
4.3.5 下调HOXC9抑制胶质母细胞瘤细胞体内成瘤能力 | 第71-73页 |
4.4 讨论 | 第73-74页 |
第5章 HOXC9对胶质母细胞瘤自噬的影响及其调控机制 | 第74-102页 |
5.1 实验材料 | 第74-81页 |
5.1.1 实验细胞 | 第74页 |
5.1.2 实验试剂 | 第74-76页 |
5.1.3 主要仪器 | 第76-77页 |
5.1.4 主要实验试剂的配制 | 第77-81页 |
5.2 实验方法 | 第81-92页 |
5.2.1 流式细胞凋亡检测 | 第81页 |
5.2.2 免疫印迹法检测蛋白表达 | 第81-83页 |
5.2.3 细胞瞬时转染 | 第83页 |
5.2.4 免疫荧光实验 | 第83页 |
5.2.5 DAPK1和Beclin1慢病毒干扰载体构建 | 第83-86页 |
5.2.6 双荧光素酶报告系统分析 | 第86-89页 |
5.2.7 染色体免疫共沉淀实验 | 第89-91页 |
5.2.8 慢病毒转染及细胞感染 | 第91-92页 |
5.3 实验结果与分析 | 第92-99页 |
5.3.1 下调HOXC9并不引起胶质母细胞瘤细胞凋亡 | 第92页 |
5.3.2 下调HOXC9引起胶质母细胞瘤细胞自噬 | 第92-94页 |
5.3.3 DAPK1是下调HOXC9引发细胞自噬的重要下游效应原件 | 第94-98页 |
5.3.4 HOXC9通过转录调控DAPK1的表达 | 第98-99页 |
5.4 讨论 | 第99-102页 |
第六章 综合与讨论 | 第102-104页 |
6.1 HOXC9对胶质母细胞瘤预后的影响及其表达分析 | 第102页 |
6.2 HOXC9对胶质母细胞瘤增殖、迁移侵袭能力的影响 | 第102页 |
6.3 HOXC9对胶质母细胞瘤细胞成瘤能力的影响 | 第102-103页 |
6.4 HOXC9对胶质母细胞瘤自噬的影响及其调控机制 | 第103-104页 |
论文创新点 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-118页 |
攻读学位期间发表论文 | 第118-120页 |
参研课题情况 | 第120-122页 |
致谢 | 第122页 |