摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第一章 空肠弯曲菌检测方法的国内外研究进展 | 第10-16页 |
·概述 | 第10页 |
·空肠弯曲菌的主要表面抗原 | 第10-11页 |
·脂多糖 | 第10-11页 |
·鞭毛蛋白 | 第11页 |
·外膜蛋白 | 第11页 |
·国内外检测空肠弯曲菌的方法 | 第11-15页 |
·传统生化检测方法 | 第12页 |
·分子生物学方法 | 第12-15页 |
·论文研究的目的和意义 | 第15-16页 |
第二章 空肠弯曲菌peblA和cadF基因的克隆、表达和纯化 | 第16-43页 |
摘要 | 第16页 |
·前言 | 第16页 |
·实验材料、设备与仪器 | 第16-19页 |
·菌株及质粒 | 第17页 |
·仪器设备 | 第17页 |
·培养基 | 第17-18页 |
·试剂配制 | 第18-19页 |
·实验方法 | 第19-32页 |
·空肠弯曲菌peblA和cadF的克隆 | 第19-28页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第28-31页 |
·重组目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
·结果与分析 | 第32-42页 |
·基因组DNA的提取 | 第32页 |
·目的基因的PCR扩增后结果 | 第32-33页 |
·PCR产物回收结果 | 第33-34页 |
·阳性克隆子的验证 | 第34-35页 |
·peblA、cadF基因核酸比对结果与分析 | 第35页 |
·peblA、cadF片段及pET-28a、pET-30a质粒双酶切纯化结果 | 第35-36页 |
·表达载体质粒的提取与双酶切验证阳性克隆子 | 第36-37页 |
·重组PEB1和CadF蛋白的诱导表达及表达形式的鉴定 | 第37-39页 |
·重组PEB1和CadF蛋白表达量和IPTG浓度的关系 | 第39-40页 |
·SDS-PAGE验证纯化结果 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-43页 |
第三章 PEB1和CadF蛋白多克隆抗体的制备 | 第43-55页 |
摘要 | 第43页 |
·前言 | 第43页 |
·实验材料、设备与仪器 | 第43-45页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·实验仪器设备及试剂 | 第44页 |
·菌株及质粒 | 第44-45页 |
·试剂配制 | 第45页 |
·实验方法 | 第45-47页 |
·抗血清的制备 | 第45页 |
·间接ELISA法检测抗体效价 | 第45-46页 |
·多克隆抗体的特异性检测 | 第46页 |
·多克隆抗体的初步纯化 | 第46-47页 |
·多克隆抗体的特异性纯化 | 第47页 |
·结果与分析 | 第47-53页 |
·抗血清效价 | 第47-48页 |
·抗体纯化结果 | 第48-49页 |
·交叉反应结果 | 第49-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第四章 结论与展望 | 第55-57页 |
·结论 | 第55页 |
·构建了PEB1和CadF蛋白的大肠杆菌表达系统 | 第55页 |
·制备及纯化PEB1和CadF蛋白 | 第55页 |
·制备抗PEB1和CadF蛋白的多克隆抗体及特异性检测 | 第55页 |
·展望 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录A1 仪器设备 | 第62-63页 |
附录A2 试剂 | 第63-65页 |
附录B DNA测序结果 | 第65-67页 |
附录C 质粒图谱 | 第67-69页 |
个人介绍 | 第69页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第69页 |
获奖情况 | 第69页 |