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空肠弯曲菌peblA和cadF的克隆表达及多克隆抗体制备与纯化

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 空肠弯曲菌检测方法的国内外研究进展第10-16页
   ·概述第10页
   ·空肠弯曲菌的主要表面抗原第10-11页
     ·脂多糖第10-11页
     ·鞭毛蛋白第11页
     ·外膜蛋白第11页
   ·国内外检测空肠弯曲菌的方法第11-15页
     ·传统生化检测方法第12页
     ·分子生物学方法第12-15页
   ·论文研究的目的和意义第15-16页
第二章 空肠弯曲菌peblA和cadF基因的克隆、表达和纯化第16-43页
 摘要第16页
   ·前言第16页
   ·实验材料、设备与仪器第16-19页
     ·菌株及质粒第17页
     ·仪器设备第17页
     ·培养基第17-18页
     ·试剂配制第18-19页
   ·实验方法第19-32页
     ·空肠弯曲菌peblA和cadF的克隆第19-28页
     ·目的蛋白的诱导表达第28-31页
     ·重组目的蛋白的纯化第31-32页
   ·结果与分析第32-42页
     ·基因组DNA的提取第32页
     ·目的基因的PCR扩增后结果第32-33页
     ·PCR产物回收结果第33-34页
     ·阳性克隆子的验证第34-35页
     ·peblA、cadF基因核酸比对结果与分析第35页
     ·peblA、cadF片段及pET-28a、pET-30a质粒双酶切纯化结果第35-36页
     ·表达载体质粒的提取与双酶切验证阳性克隆子第36-37页
     ·重组PEB1和CadF蛋白的诱导表达及表达形式的鉴定第37-39页
     ·重组PEB1和CadF蛋白表达量和IPTG浓度的关系第39-40页
     ·SDS-PAGE验证纯化结果第40-42页
   ·讨论第42-43页
第三章 PEB1和CadF蛋白多克隆抗体的制备第43-55页
 摘要第43页
   ·前言第43页
   ·实验材料、设备与仪器第43-45页
     ·实验材料第43-44页
     ·实验仪器设备及试剂第44页
     ·菌株及质粒第44-45页
     ·试剂配制第45页
   ·实验方法第45-47页
     ·抗血清的制备第45页
     ·间接ELISA法检测抗体效价第45-46页
     ·多克隆抗体的特异性检测第46页
     ·多克隆抗体的初步纯化第46-47页
     ·多克隆抗体的特异性纯化第47页
   ·结果与分析第47-53页
     ·抗血清效价第47-48页
     ·抗体纯化结果第48-49页
     ·交叉反应结果第49-53页
   ·讨论第53-55页
第四章 结论与展望第55-57页
   ·结论第55页
     ·构建了PEB1和CadF蛋白的大肠杆菌表达系统第55页
     ·制备及纯化PEB1和CadF蛋白第55页
     ·制备抗PEB1和CadF蛋白的多克隆抗体及特异性检测第55页
   ·展望第55-57页
参考文献第57-61页
致谢第61-62页
附录A1 仪器设备第62-63页
附录A2 试剂第63-65页
附录B DNA测序结果第65-67页
附录C 质粒图谱第67-69页
个人介绍第69页
攻读学位期间的研究成果第69页
获奖情况第69页

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