| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-10页 |
| 第一章 空肠弯曲菌检测方法的国内外研究进展 | 第10-16页 |
| ·概述 | 第10页 |
| ·空肠弯曲菌的主要表面抗原 | 第10-11页 |
| ·脂多糖 | 第10-11页 |
| ·鞭毛蛋白 | 第11页 |
| ·外膜蛋白 | 第11页 |
| ·国内外检测空肠弯曲菌的方法 | 第11-15页 |
| ·传统生化检测方法 | 第12页 |
| ·分子生物学方法 | 第12-15页 |
| ·论文研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 空肠弯曲菌peblA和cadF基因的克隆、表达和纯化 | 第16-43页 |
| 摘要 | 第16页 |
| ·前言 | 第16页 |
| ·实验材料、设备与仪器 | 第16-19页 |
| ·菌株及质粒 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17-18页 |
| ·试剂配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-32页 |
| ·空肠弯曲菌peblA和cadF的克隆 | 第19-28页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第28-31页 |
| ·重组目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-42页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第32页 |
| ·目的基因的PCR扩增后结果 | 第32-33页 |
| ·PCR产物回收结果 | 第33-34页 |
| ·阳性克隆子的验证 | 第34-35页 |
| ·peblA、cadF基因核酸比对结果与分析 | 第35页 |
| ·peblA、cadF片段及pET-28a、pET-30a质粒双酶切纯化结果 | 第35-36页 |
| ·表达载体质粒的提取与双酶切验证阳性克隆子 | 第36-37页 |
| ·重组PEB1和CadF蛋白的诱导表达及表达形式的鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组PEB1和CadF蛋白表达量和IPTG浓度的关系 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE验证纯化结果 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 PEB1和CadF蛋白多克隆抗体的制备 | 第43-55页 |
| 摘要 | 第43页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料、设备与仪器 | 第43-45页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验仪器设备及试剂 | 第44页 |
| ·菌株及质粒 | 第44-45页 |
| ·试剂配制 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-47页 |
| ·抗血清的制备 | 第45页 |
| ·间接ELISA法检测抗体效价 | 第45-46页 |
| ·多克隆抗体的特异性检测 | 第46页 |
| ·多克隆抗体的初步纯化 | 第46-47页 |
| ·多克隆抗体的特异性纯化 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-53页 |
| ·抗血清效价 | 第47-48页 |
| ·抗体纯化结果 | 第48-49页 |
| ·交叉反应结果 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 结论与展望 | 第55-57页 |
| ·结论 | 第55页 |
| ·构建了PEB1和CadF蛋白的大肠杆菌表达系统 | 第55页 |
| ·制备及纯化PEB1和CadF蛋白 | 第55页 |
| ·制备抗PEB1和CadF蛋白的多克隆抗体及特异性检测 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录A1 仪器设备 | 第62-63页 |
| 附录A2 试剂 | 第63-65页 |
| 附录B DNA测序结果 | 第65-67页 |
| 附录C 质粒图谱 | 第67-69页 |
| 个人介绍 | 第69页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第69页 |
| 获奖情况 | 第69页 |