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鲫鱼PKR-like(PKZ)Zα能将含GC片段的B-DNA翻转为Z-DNA

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
目录第5-8页
第1章 文献综述第8-16页
   ·Zα结构域第8-11页
     ·ADAR1第9页
     ·DLM-1(ZBP1)第9-10页
     ·E3L第10页
     ·PKZ第10-11页
   ·左手螺旋DNA(Z-DNA)第11-12页
     ·Z-DNA的发现命名第11页
     ·Z-DNA的形成条件第11-12页
     ·Z-DNA的功能第12页
   ·与Zα、Z-DNA相关的研究方法第12-15页
     ·扫描隧道显微技术(Scanning Tunnelling Microscopy,STM)第12页
     ·酵母单杂交体系(yeast one-hybrid system)第12-13页
     ·圆二色谱(Circular Dichroism,CD)第13-14页
     ·表面等离子共振光谱(surface plasmon resonance,SPR)第14页
     ·荧光光谱第14-15页
   ·鲫鱼PKZ(CaPKR-like)Zα研究现状、目的和意义第15-16页
第2章 材料和方法第16-24页
   ·主要仪器设备第16页
   ·主要试剂、试剂盒第16-17页
   ·缓冲配方第17页
     ·镍柱缓冲液体系第17页
     ·透析缓冲液第17页
     ·Oligo DNA溶解及稀释缓冲液第17页
     ·寻求合适的实验条件第17页
     ·高盐溶液第17页
   ·载体和菌株第17-18页
   ·构建第18页
   ·蛋白的诱导表达及纯化第18-19页
   ·Bradford法定量蛋白第19-20页
     ·蛋白质标准曲线的测定第20页
     ·样品的测定第20页
     ·数据处理第20页
   ·Oligo DNA第20-21页
   ·Oligo DNA的圆二色光谱第21-22页
     ·高盐下的Hairpin6与Hairpin3 Oligo DNA第21-22页
     ·各种多肽与oligo DNA相互作用第22页
   ·蛋白的圆二色光谱及荧光光谱第22-24页
第3章 实验结果第24-47页
   ·蛋白纯化结果第24页
   ·蛋白定量结果第24-26页
     ·标准曲线的绘制第24-25页
     ·12个表达多肽定量结果第25页
     ·以蛋白浓度确定每一步滴加量第25-26页
     ·表达多肽圆二色光谱、天然荧光、ANS荧光的测定第26页
   ·Oligo DNA滴定与单独圆二色光谱第26-42页
     ·Hairpin 6在4.5 mol/L NaCl高盐浓度条件下能够形成Z-DNA第26-27页
     ·表达多肽翻转Hairpin 6最佳NaCl浓度的确定第27-28页
     ·PKZ Zα滴定不同长度Hairpin DNA的CD谱第28-30页
     ·点突变Zα多肽对Hairpin 6构象的影响第30-35页
     ·Zα对含有GC或TA重复片段Oligo DNA构象的影响第35-38页
     ·Zα对非GC重复DNA构象的影响第38-39页
     ·替换型Zα1Zα1对Hairpin系列构象的影响第39-42页
   ·10个表达多肽的光谱性质第42-47页
     ·10个表达多肽的圆二色光谱第42-44页
     ·10个表达多肽天然荧光第44-45页
     ·10个表达多肽ANS荧光第45-47页
第4章 分析与讨论第47-52页
   ·实验结果的分析与讨论第47-51页
     ·发夹DNA形成Z-DNA能力的分析第47-48页
     ·盐浓度影响Zα与Hairpin 6滴定效果第48页
     ·各个突变体蛋白影响Hairpin 6的构象第48-50页
     ·Zα翻转GC、TA和非GC重复DNA片段第50-51页
   ·PKZ整体功能的设想第51-52页
     ·翻转酶flippase第51页
     ·胞质抑制翻译模型第51-52页
参考文献第52-56页
致谢第56-57页
攻读学位期间的研究成果第57页

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