摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
第1章 文献综述 | 第8-16页 |
·Zα结构域 | 第8-11页 |
·ADAR1 | 第9页 |
·DLM-1(ZBP1) | 第9-10页 |
·E3L | 第10页 |
·PKZ | 第10-11页 |
·左手螺旋DNA(Z-DNA) | 第11-12页 |
·Z-DNA的发现命名 | 第11页 |
·Z-DNA的形成条件 | 第11-12页 |
·Z-DNA的功能 | 第12页 |
·与Zα、Z-DNA相关的研究方法 | 第12-15页 |
·扫描隧道显微技术(Scanning Tunnelling Microscopy,STM) | 第12页 |
·酵母单杂交体系(yeast one-hybrid system) | 第12-13页 |
·圆二色谱(Circular Dichroism,CD) | 第13-14页 |
·表面等离子共振光谱(surface plasmon resonance,SPR) | 第14页 |
·荧光光谱 | 第14-15页 |
·鲫鱼PKZ(CaPKR-like)Zα研究现状、目的和意义 | 第15-16页 |
第2章 材料和方法 | 第16-24页 |
·主要仪器设备 | 第16页 |
·主要试剂、试剂盒 | 第16-17页 |
·缓冲配方 | 第17页 |
·镍柱缓冲液体系 | 第17页 |
·透析缓冲液 | 第17页 |
·Oligo DNA溶解及稀释缓冲液 | 第17页 |
·寻求合适的实验条件 | 第17页 |
·高盐溶液 | 第17页 |
·载体和菌株 | 第17-18页 |
·构建 | 第18页 |
·蛋白的诱导表达及纯化 | 第18-19页 |
·Bradford法定量蛋白 | 第19-20页 |
·蛋白质标准曲线的测定 | 第20页 |
·样品的测定 | 第20页 |
·数据处理 | 第20页 |
·Oligo DNA | 第20-21页 |
·Oligo DNA的圆二色光谱 | 第21-22页 |
·高盐下的Hairpin6与Hairpin3 Oligo DNA | 第21-22页 |
·各种多肽与oligo DNA相互作用 | 第22页 |
·蛋白的圆二色光谱及荧光光谱 | 第22-24页 |
第3章 实验结果 | 第24-47页 |
·蛋白纯化结果 | 第24页 |
·蛋白定量结果 | 第24-26页 |
·标准曲线的绘制 | 第24-25页 |
·12个表达多肽定量结果 | 第25页 |
·以蛋白浓度确定每一步滴加量 | 第25-26页 |
·表达多肽圆二色光谱、天然荧光、ANS荧光的测定 | 第26页 |
·Oligo DNA滴定与单独圆二色光谱 | 第26-42页 |
·Hairpin 6在4.5 mol/L NaCl高盐浓度条件下能够形成Z-DNA | 第26-27页 |
·表达多肽翻转Hairpin 6最佳NaCl浓度的确定 | 第27-28页 |
·PKZ Zα滴定不同长度Hairpin DNA的CD谱 | 第28-30页 |
·点突变Zα多肽对Hairpin 6构象的影响 | 第30-35页 |
·Zα对含有GC或TA重复片段Oligo DNA构象的影响 | 第35-38页 |
·Zα对非GC重复DNA构象的影响 | 第38-39页 |
·替换型Zα1Zα1对Hairpin系列构象的影响 | 第39-42页 |
·10个表达多肽的光谱性质 | 第42-47页 |
·10个表达多肽的圆二色光谱 | 第42-44页 |
·10个表达多肽天然荧光 | 第44-45页 |
·10个表达多肽ANS荧光 | 第45-47页 |
第4章 分析与讨论 | 第47-52页 |
·实验结果的分析与讨论 | 第47-51页 |
·发夹DNA形成Z-DNA能力的分析 | 第47-48页 |
·盐浓度影响Zα与Hairpin 6滴定效果 | 第48页 |
·各个突变体蛋白影响Hairpin 6的构象 | 第48-50页 |
·Zα翻转GC、TA和非GC重复DNA片段 | 第50-51页 |
·PKZ整体功能的设想 | 第51-52页 |
·翻转酶flippase | 第51页 |
·胞质抑制翻译模型 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第57页 |