| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-22页 |
| 1 桔小实蝇研究概况 | 第14页 |
| 2 昆虫消化酶概述 | 第14-19页 |
| 2.1 天冬氨酸蛋白酶 | 第15-16页 |
| 2.2 羧肽酶 | 第16-17页 |
| 2.3 丝氨酸蛋酶 | 第17-19页 |
| 3 丝氨酸蛋白酶抑制剂 | 第19-20页 |
| 4 论文的研究思路和整体框架 | 第20-22页 |
| 第二章 桔小实蝇消化酶基因序列分析 | 第22-34页 |
| 1 材料和方法 | 第22-26页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第22页 |
| 1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 1.4 总RNA提取 | 第23-24页 |
| 1.5 总RNA中基因组DNA(gDNA)的去除 | 第24页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 1.7 引物设计和合成 | 第25页 |
| 1.8 PCR扩增反应 | 第25-26页 |
| 1.9 数据分析 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-31页 |
| 2.1 桔小实蝇胰蛋白酶基因序列分析 | 第26-27页 |
| 2.2 桔小实蝇天冬氨酸蛋白酶基因序列分析 | 第27-29页 |
| 2.3 桔小实蝇羧肽酶基因序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-34页 |
| 第三章 蛋白酶基因不同发育阶段表达模式分析 | 第34-40页 |
| 1 材料和方法 | 第34-36页 |
| 1.1 供试昆虫 21 | 第34页 |
| 1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 1.4 总RNA提取 | 第34页 |
| 1.5 总RNA中基因组DNA(gDNA)的去除 | 第34页 |
| 1.6 cDNA合成 | 第34-35页 |
| 1.7 cDNA合成 | 第35页 |
| 1.8 实时定量PCR | 第35-36页 |
| 1.9 标准曲线制作 | 第36页 |
| 1.10 数据分析 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 桔小实蝇蛋白酶基因在饥饿-饲喂后的表达变化分析 | 第40-44页 |
| 1 材料和方法 | 第40-41页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂及仪器 | 第40页 |
| 1.3 总RNA的提取 | 第40页 |
| 1.4 总RNA中gDNA去除 | 第40页 |
| 1.5 cDNA合成 | 第40页 |
| 1.6 引物设计与合成 | 第40页 |
| 1.7 实时定量PCR | 第40-41页 |
| 1.8 数据分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-42页 |
| 2.1 桔小实蝇蛋白酶基因在饥饿-饲喂条件下表达变化分析 | 第41-42页 |
| 3 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 蛋白酶抑制剂胁迫下桔小实蝇蛋白酶基因的表达模式分析 | 第44-50页 |
| 1 材料和方法 | 第44-45页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 主要仪器 | 第45页 |
| 1.4 生物测定 | 第45页 |
| 1.5 RT-qPCR | 第45页 |
| 1.6 数据分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-47页 |
| 2.1 生物测定 | 第45-46页 |
| 2.2 蛋白酶抑制剂胁迫下胰蛋白酶基因的表达情况 | 第46页 |
| 2.3 蛋白酶抑制剂胁迫后天冬氨酸蛋白酶及金属羧肽酶基因的表达情况 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-50页 |
| 第六章 高效氯氰菊酯对桔小实蝇胰蛋白酶活性及基因表达的影响 | 第50-54页 |
| 1 材料方法 | 第50-51页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第50页 |
| 1.2 高效氯氰菊酯处理 | 第50页 |
| 1.3 RT-qPCR | 第50页 |
| 1.4 数据分析 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-52页 |
| 2.1 高效氯氰菊酯处理下桔小实蝇幼虫表型变化 | 第51页 |
| 2.2 高效氯氰菊酯胁迫对胰蛋白酶基因表达量的影响 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第七章 不同条件下桔小实蝇体内胰蛋白酶及总蛋白酶活性的测定 | 第54-62页 |
| 1 材料和方法 | 第54-56页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第54页 |
| 1.2 试虫处理 | 第54页 |
| 1.3 主要试剂 | 第54-55页 |
| 1.4 主要仪器 | 第55页 |
| 1.5 蛋白样品制备 | 第55页 |
| 1.6 牛血清蛋白标准曲线制作 | 第55页 |
| 1.7 蛋白含量测定 | 第55-56页 |
| 1.8 丝氨酸蛋白酶活性测定 | 第56页 |
| 1.9 总蛋白酶酶活测定 | 第56页 |
| 2.0 数据分析 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-59页 |
| 2.1 不同温度及pH对胰蛋白酶活性的影响 | 第56-57页 |
| 2.2 胰蛋白酶活性的分布 | 第57-58页 |
| 2.3 胰蛋白酶抑制剂对蛋白酶活性的影响 | 第58页 |
| 2.4 高效氯氰菊酯对胰蛋白酶活性的影响 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 第八章 主要结果和结论、创新点及研究展望 | 第62-64页 |
| 1 主要结果和结论 | 第62-63页 |
| 1.1 明确了蛋白酶基因在桔小实蝇不同发育阶段的表达模式 | 第62页 |
| 1.2 明确了桔小实蝇蛋白酶基因对饥饿-饲喂处理的响应模式 | 第62页 |
| 1.3 明确了桔小实蝇成虫消化酶对胰蛋白酶专性抑制剂的响应机制 | 第62-63页 |
| 1.4 明确了桔小实蝇成虫胰蛋白酶对搞笑氯氰菊酯的响应机制 | 第63页 |
| 2 创新点 | 第63页 |
| 3 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 在读期间发表论文 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
