| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一部分 NLK在IL-1β诱导的C/EBP信号通路中的作用研究 | 第11-55页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-22页 |
| 第一节 炎症反应与IL-1 | 第11-15页 |
| 一、炎症反应概述 | 第11页 |
| 二、IL-1概述 | 第11-14页 |
| 三、IL-1在炎症反应及其信号转导中的作用 | 第14-15页 |
| 第二节 C/EBP与ATF5 | 第15-19页 |
| 一、C/EBP概述 | 第15-17页 |
| 二、ATF5概述 | 第17-18页 |
| 三、C/EBP与ATF5的联系 | 第18-19页 |
| 第三节 NLK概述 | 第19-22页 |
| 第二章 实验材料和实验方法 | 第22-38页 |
| 第一节 实验材料 | 第22-24页 |
| 一、细胞系及细胞因子 | 第22页 |
| 二、抗体及药物 | 第22-23页 |
| 三、表达载体 | 第23-24页 |
| 四、溶液配制 | 第24页 |
| 第二节 实验方法 | 第24-38页 |
| 一、普通分子克隆构建 | 第24-26页 |
| 二、基因点突变和缺失突变 | 第26-27页 |
| 三、细胞培养基本操作 | 第27-28页 |
| 四、荧光素酶报告基因实验 | 第28页 |
| 五、体细胞基因敲除和敲入 | 第28-29页 |
| 六、RNA干扰 | 第29-32页 |
| 七、Flag亲和纯化及质谱鉴定 | 第32页 |
| 八、免疫共沉淀(Co-IP)和免疫印迹(Western blot) | 第32-33页 |
| 九、RNA提取、cDNA第一链合成及荧光定量PCR | 第33-35页 |
| 十、Phos-tag实验 | 第35页 |
| 十一、融合荧光蛋白定位实验和免疫荧光 | 第35-36页 |
| 十二、变性免疫沉淀及泛素化分析 | 第36页 |
| 十三、细胞重悬贴壁实验 | 第36-37页 |
| 十四、C2C12细胞诱导分化 | 第37页 |
| 十五、数据统计分析 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第38-55页 |
| 第一节 研究背景和立项依据 | 第38页 |
| 第二节 实验结果 | 第38-52页 |
| 一、NLK调控基础水平和IL-1β诱导的C/EBP激活 | 第38-39页 |
| 二、利用基因敲入和亲和纯化-质谱联用技术鉴定NLK相互作用蛋白 | 第39-41页 |
| 三、NLK与ATF5相互作用 | 第41-42页 |
| 四、NLK通过ATF5激活C/EBP信号通路 | 第42-44页 |
| 五、NLK磷酸化ATF5 | 第44页 |
| 六、NLK稳定ATF5 | 第44-46页 |
| 七、NLK抑制ATF5的泛素化-蛋白酶体降解 | 第46-47页 |
| 八、NLK通过ATF5的N端介导ATF5的稳定 | 第47-48页 |
| 九、NLK稳定和磷酸化ATF5是两个独立事件 | 第48-49页 |
| 十、NLK通过稳定ATF5正调控C/EBP信号通路 | 第49-50页 |
| 十一、IL-1β通过TAK1-NLK稳定ATF5并激活C/EBP信号通路 | 第50-52页 |
| 第三节 小结和讨论 | 第52-55页 |
| 第二部分 NLK调控SRF信号通路介导的肌细胞分化 | 第55-75页 |
| 第一章 研究背景 | 第55-61页 |
| 第一节 肌细胞分化及其主要信号通路 | 第55-57页 |
| 第二节 MRTFs与SRF信号通路 | 第57-61页 |
| 第二章 实验材料和实验方法 | 第61-62页 |
| 第三章 实验结果和讨论 | 第62-75页 |
| 第一节 研究背景和立项依据 | 第62页 |
| 第二节 实验结果 | 第62-73页 |
| 一、NLK缺失影响细胞形态及贴壁性能 | 第62-64页 |
| 二、RNA-Seq分析NLK影响的基因表达及信号通路 | 第64-65页 |
| 三、NLK正调控SRF/ELK1信号通路 | 第65-67页 |
| 四、NLK负调控SRF/MKL信号通路 | 第67-68页 |
| 五、NLK通过Rho GTPase/actin调控SRF信号通路 | 第68-69页 |
| 六、NLK通过MICAL2调节Rho GTPase/actin和SRF信号通路 | 第69-70页 |
| 七、NLK在C2C12分化过程中下调表达并且抑制C2C12分化 | 第70-73页 |
| 第三节 小结和讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-88页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
