| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 表观遗传学 | 第14页 |
| 1.1.1 表观遗传学概述 | 第14页 |
| 1.1.2 表观遗传学研究内容 | 第14页 |
| 1.2 DNA甲基化概述 | 第14-15页 |
| 1.2.1 DNA甲基转移酶活性抑制剂 | 第14-15页 |
| 1.3 DNA甲基化检测技术 | 第15-17页 |
| 1.3.1 亚硫酸盐方法检测DNA甲基化 | 第15-16页 |
| 1.3.2 高效液相色谱法 | 第16页 |
| 1.3.3 敏感甲基化单个核苷酸引物延伸法 | 第16-17页 |
| 1.3.4 电化学方法 | 第17页 |
| 1.4 DNA羟甲基化概述 | 第17-18页 |
| 1.5 DNA羟甲基检测技术 | 第18-19页 |
| 1.6 电化学生物传感器 | 第19-20页 |
| 1.6.1 酶信号扩增电化学生物传感器 | 第19页 |
| 1.6.3 电化学免疫传感器 | 第19页 |
| 1.6.4 电化学DNA传感器 | 第19-20页 |
| 1.7 光电化学生物传感器 | 第20-21页 |
| 1.8 本课题的提出及主要研究内容 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第23-26页 |
| 2.1.1 仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.2 试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.3 实验中主要缓冲溶液的配置 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-35页 |
| 2.2.1 基于信号扩增策略的光电化学生物传感器检测甲基转移酶活性 | 第26-29页 |
| 2.2.1.1 Au纳米粒子的制备 | 第26页 |
| 2.2.1.2 链霉亲和素标记纳米金 | 第26-27页 |
| 2.2.1.3 硫化铋的制备 | 第27页 |
| 2.2.1.4 ITO电极预处理 | 第27页 |
| 2.2.1.5 生物传感器的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.1.6 光电化学信号检测 | 第28-29页 |
| 2.2.1.7 生物传感器的选择性和抑制因子的筛选 | 第29页 |
| 2.2.1.8 光电材料稳定性检测 | 第29页 |
| 2.2.2 基于G-四连体和外切酶III的电化学方法检测Dam甲基转移酶活性 | 第29-31页 |
| 2.2.2.1 电极预处理 | 第29-30页 |
| 2.2.2.2 工作电极的制备 | 第30页 |
| 2.2.2.3 探针DNA的固定 | 第30页 |
| 2.2.2.4 DNA甲基化及酶切处理 | 第30页 |
| 2.2.2.5 G-四连体的形成 | 第30页 |
| 2.2.2.6 电化学信号检测 | 第30-31页 |
| 2.2.2.7 生物传感器选择性检测和抑制因子的筛选。 | 第31页 |
| 2.2.3 基于全光照射的光电生物传感器检测DNA羟甲基化。 | 第31-33页 |
| 2.2.3.1 CdS量子点的制备和工作电极 | 第31页 |
| 2.2.3.2 磁性微球对双链DNA的固定 | 第31-32页 |
| 2.2.3.3 氨基-衍生化 5-hmC | 第32页 |
| 2.2.3.4 NHS-生物素和亲和素标记的碱性磷脂酶的固定 | 第32页 |
| 2.2.3.5 光电信号测量 | 第32-33页 |
| 2.2.3.8 特异性检测 | 第33页 |
| 2.2.4 基于电化学免疫传感器定量分析乳腺癌细胞中的 5-hmC | 第33-35页 |
| 2.2.4.1 玻碳电极预处理 | 第33页 |
| 2.2.4.2 石墨烯-苝四羧酸（GR-PTCA）的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.4.3 生物传感器的制备 | 第34页 |
| 2.2.4.4 工作电极的制备 | 第34页 |
| 2.2.4.5 电化学检测 | 第34-35页 |
| 2.2.4.6 实际样品的检测 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| 3.1 基于信号增加的光电化学生物传感器检测甲基转移酶活性 | 第35-38页 |
| 3.1.1 EIS分析和可行性分析 | 第35-36页 |
| 3.1.2 优化甲基化时间 | 第36-37页 |
| 3.1.3 甲基转移酶活性的检测 | 第37-38页 |
| 3.1.4 抑制因子的筛选 | 第38页 |
| 3.2 基于G-四连体和外切酶III的电化学方法检测Dam甲基转移酶活性 | 第38-41页 |
| 3.2.1 实验可行性分析 | 第38-39页 |
| 3.2.2 Dam甲基转移酶活性分析 | 第39-40页 |
| 3.2.3 精确性，重现性和特异性分析 | 第40页 |
| 3.2.4 抑制因子的筛选 | 第40-41页 |
| 3.3 基于全光射的的光电生物传感器检测DNA羟甲基化 | 第41-44页 |
| 3.3.1 实验可行性分析 | 第41-42页 |
| 3.3.2 条件优化 | 第42页 |
| 3.3.3 标准曲线的绘制，传感器选择性和重现性的分析 | 第42-44页 |
| 3.4 基于电化学免疫传感器定量分析乳腺癌细胞中的 5-hmC | 第44-48页 |
| 3.4.1 EIS和可行性分析 | 第44-45页 |
| 3.4.2 条件优化 | 第45页 |
| 3.4.4 标准曲线的绘制，特异性和重现性分析 | 第45-46页 |
| 3.4.5 实际样品检测 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 基于信号增加策略的光电化学生物传感器检测甲基转移酶活性 | 第48页 |
| 4.2 基于G-四连体和外切酶III的电化学方法检测Dam甲基转移酶活性 | 第48-49页 |
| 4.3 基于全光射的光电生物传感器检测DNA羟甲基化 | 第49-50页 |
| 4.4 基于电化学免疫传感器定量分析乳腺癌细胞中的 5-hmC | 第50-51页 |
| 5. 结论 | 第51-52页 |
| 5.1 基于信号增加策略的光电化学生物传感器检测甲基转移酶活性 | 第51页 |
| 5.2 基于G-四连体和外切酶III的电化学方法检测Dam甲基转移酶活性 | 第51页 |
| 5.3 基于全光射的光电生物传感器检测DNA羟甲基化 | 第51页 |
| 5.4 基于电化学免疫传感器定量分析乳腺癌细胞中的 5-hmC | 第51-52页 |
| 6 创新之处 | 第52-53页 |
| 7 参考文献 | 第53-62页 |
| 8 致谢 | 第62-64页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第64页 |
