| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 研究背景 | 第11-21页 |
| 1.1 表皮蜡质 | 第11-12页 |
| 1.2 蜡质相关研究进展 | 第12-15页 |
| 1.3 超长链脂肪酸延伸的相关研究进展 | 第15-18页 |
| 1.4 莲相关研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 莲的综述 | 第18-19页 |
| 1.4.2 莲的系统分类研究 | 第19页 |
| 1.4.3 莲基因组测序和遗传连锁图谱构建 | 第19-20页 |
| 1.4.4 莲蜡质相关研究进展 | 第20页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 主要仪器和生化试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 菌株及质粒载体 | 第22页 |
| 2.1.4 酶及试剂盒 | 第22页 |
| 2.1.5 引物及测序 | 第22页 |
| 2.1.6 常用溶液 | 第22-24页 |
| 2.1.7 常用培养基 | 第24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-37页 |
| 2.2.2 莲叶表皮蜡质结构与化学成分分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2.1 莲叶表皮蜡质电镜扫描 | 第24页 |
| 2.2.2.2 莲叶表皮蜡质提取及观察 | 第24页 |
| 2.2.2.3 莲叶表皮蜡质成分分离 | 第24-25页 |
| 2.2.2.4 莲叶表皮蜡质成分分析 | 第25页 |
| 2.2.3 候选基因筛选与进化分析 | 第25-26页 |
| 2.2.4 目的基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.4.1 莲叶RNA提取 | 第26页 |
| 2.2.4.2 cDNA第一链的合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4.3 PCR扩增获得目的基因片段 | 第27页 |
| 2.2.5 qRT-PCR表达分析 | 第27页 |
| 2.2.6 拟南芥遗传转化 | 第27-33页 |
| 2.2.6.1 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第27-28页 |
| 2.2.6.2 拟南芥过量表达载体构建 | 第28-29页 |
| 2.2.6.3 GV3101农杆菌感受态细胞制备 | 第29页 |
| 2.2.6.4 质粒转化农杆菌 | 第29-30页 |
| 2.2.6.5 拟南芥转化 | 第30页 |
| 2.2.6.6 转基因阳性苗筛选 | 第30-31页 |
| 2.2.6.7 PCR验证 | 第31页 |
| 2.2.6.8 拟南芥总RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.6.9 RT-PCR鉴定过量表达株系 | 第32页 |
| 2.2.6.10 过量表达材料茎蜡质测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 酵母异源表达 | 第33-35页 |
| 2.2.7.1 采用同源重组法进行载体构建 | 第33-34页 |
| 2.2.7.2 酵母转化 | 第34页 |
| 2.2.7.3 SUR4基因敲除菌株的构建及PCR验证 | 第34-35页 |
| 2.2.7.4 酵母脂肪酸成分诱导分析 | 第35页 |
| 2.2.8 亚细胞定位实验 | 第35-37页 |
| 第三章 结果分析 | 第37-53页 |
| 3.1 莲叶表皮蜡质化学结构及成分分析 | 第37-39页 |
| 3.1.1 不同品种莲的莲叶表皮蜡质电镜扫描 | 第37-39页 |
| 3.1.2 不同品种莲的莲叶表皮蜡质成分分离 | 第39页 |
| 3.2 莲叶表皮蜡质与"荷花效应"关系 | 第39-40页 |
| 3.3 古代莲莲叶表皮蜡质成分分离与分析 | 第40-42页 |
| 3.4 莲NnCER26基因的克隆及功能验证 | 第42-53页 |
| 3.4.1 候选基因筛选及进化树分析 | 第42页 |
| 3.4.2 NnCERLIKEI和NnCER26LIKE2的表达模式分析 | 第42-44页 |
| 3.4.3 NnCERLIKE1蛋白亚细胞定位 | 第44页 |
| 3.4.4 拟南芥遗传转化与过量表达株系鉴定 | 第44-46页 |
| 3.4.5 过量表达株系表型分析 | 第46-48页 |
| 3.4.6 NnCER26LIKE1、NnCER26LIKE2过量表达株系茎蜡质组成发生改变 | 第48-49页 |
| 3.4.7 NnCER26LIKE2与Nn CER6共同参与了超长链脂肪酸的生成 | 第49-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 不同品种莲蜡质结构与成分存在差异 | 第53页 |
| 4.2 NnCER26LIKE1、NnCER26LIKE2组织特异性表达模式符合蜡质合成相关基因的表达模式 | 第53页 |
| 4.3 NnCER26LIKE1、NnCER26LIKE2在超长链脂肪酸延伸中发挥不同作用 | 第53-55页 |
| 第五章 结论与展望 | 第55-56页 |
| 5.1 结论 | 第55页 |
| 5.2 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录1 论文所用引物列表 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第67页 |
