| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 1.1 研究背景 | 第13-14页 |
| 1.2 植物遗传转化研究现状 | 第14-21页 |
| 1.2.1 植物遗传转化研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 植物遗传转化的主要方法 | 第15-17页 |
| 1.2.3 影响植物遗传转化的因素 | 第17-21页 |
| 1.3 葡萄遗传转化研究现状 | 第21-23页 |
| 1.4 ERF抗寒相关转录因子的研究 | 第23-24页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第24-27页 |
| 第二章 山葡萄遗传转化体系的建立 | 第27-57页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 试验材料 | 第27-31页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.2.2 菌株和载体 | 第27-28页 |
| 2.2.3 酶及化学试剂 | 第28页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 药品及培养基的配制 | 第29-30页 |
| 2.2.6 引物合成及测序 | 第30-31页 |
| 2.3 试验方法 | 第31-44页 |
| 2.3.1 植物表达载体的构建 | 第31-35页 |
| 2.3.2 农杆菌感受态制备、转化及活化 | 第35-37页 |
| 2.3.3 不同外植体的分化能力 | 第37-38页 |
| 2.3.4 卡那霉素浓度的筛选 | 第38页 |
| 2.3.5 山葡萄的遗传转化流程 | 第38-39页 |
| 2.3.6 遗传转化条件的优化 | 第39-40页 |
| 2.3.7 阳性愈伤的验证 | 第40页 |
| 2.3.8 阳性愈伤组织的分子检测 | 第40-44页 |
| 2.4 结果与分析 | 第44-53页 |
| 2.4.1 用于遗传转化的外植体的筛选 | 第44-45页 |
| 2.4.2 最适卡那霉素浓度的筛选 | 第45-47页 |
| 2.4.3 遗传转化条件的优化 | 第47-51页 |
| 2.4.4 转基因愈伤的荧光验证 | 第51-52页 |
| 2.4.5 转基因愈伤的分子检测 | 第52-53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-57页 |
| 第三章 VaERF057的遗传转化 | 第57-63页 |
| 3.1 前言 | 第57页 |
| 3.2 试验材料 | 第57-58页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第57页 |
| 3.2.2 菌株和载体 | 第57页 |
| 3.2.3 酶及化学试剂 | 第57页 |
| 3.2.4 主要仪器设备 | 第57页 |
| 3.2.5 药品及培养基的配制 | 第57-58页 |
| 3.2.6 引物合成与测序 | 第58页 |
| 3.3 试验方法 | 第58-59页 |
| 3.3.1 农杆菌感受态的制备、转化及活化 | 第58页 |
| 3.3.2 VaERF057的遗传转化 | 第58-59页 |
| 3.3.3 愈伤组织的NPTII基因插入检测 | 第59页 |
| 3.3.4 愈伤组织的实时荧光定量PCR检测 | 第59页 |
| 3.4 结果与分析 | 第59-61页 |
| 3.4.1 转VaERF057基因愈伤系的NPTII基因插入检测 | 第59-60页 |
| 3.4.2 转VaERF057基因愈伤系的实时荧光定量检测 | 第60-61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-63页 |
| 第四章 结论与展望 | 第63-65页 |
| 4.1 结论 | 第63页 |
| 4.2 展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第72页 |