| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-36页 |
| 1 淀粉的生物合成 | 第14-26页 |
| 1.1 淀粉的结构 | 第14-15页 |
| 1.2 淀粉的生物合成途径 | 第15-23页 |
| 1.2.1 淀粉合成前体ADPG的形成 | 第16-17页 |
| 1.2.2 直链淀粉的合成 | 第17-18页 |
| 1.2.3 支链淀粉的合成 | 第18-21页 |
| 1.2.4 支链淀粉合成的三种模型 | 第21-23页 |
| 1.3 淀粉合成的相关调控 | 第23-26页 |
| 1.3.1 淀粉合成基因的表达调控 | 第23-24页 |
| 1.3.2 淀粉合成相关酶类的协同调节作用 | 第24-25页 |
| 1.3.3 影响淀粉合成的其它基因 | 第25-26页 |
| 2 淀粉颗粒的研究进展 | 第26-33页 |
| 2.1 淀粉颗粒的起始 | 第26-27页 |
| 2.2 淀粉颗粒的分类 | 第27-29页 |
| 2.3 淀粉颗粒的分裂方式 | 第29-30页 |
| 2.4 淀粉颗粒的大小 | 第30-32页 |
| 2.5 淀粉颗粒的膜结构研究 | 第32-33页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第33-36页 |
| 第二章 水稻粉质突变体fl07的表型鉴定、基因精细定位和功能互补 | 第36-54页 |
| 1 材料与方法 | 第36-43页 |
| 1.1 材料种植 | 第36-37页 |
| 1.2 生理生化指标的测定 | 第37页 |
| 1.2.1 直链淀粉含量的测定 | 第37页 |
| 1.2.2 总蛋白含量的测定 | 第37页 |
| 1.2.3 总脂肪含量的测定 | 第37页 |
| 1.2.4 总淀粉含量的测定 | 第37页 |
| 1.2.5 种子千粒重测定 | 第37页 |
| 1.3 米粉支链淀粉链长分布检测 | 第37-38页 |
| 1.4 灌浆过程干物质积累测定 | 第38页 |
| 1.5 成熟种子断面的扫描电镜观察 | 第38页 |
| 1.6 胚乳样品的透射电镜观察 | 第38-39页 |
| 1.7 不同发育时期的胚乳半薄切片的制作与观察 | 第39页 |
| 1.8 目的基因的图位克隆 | 第39-41页 |
| 1.8.1 隐性极端个体的挑选 | 第39-40页 |
| 1.8.2 叶片总DNA的提取(SDS方法提取) | 第40页 |
| 1.8.3 PCR扩增 | 第40-41页 |
| 1.8.4 多态标记筛选及精细定位 | 第41页 |
| 1.9 候选基因预测和测序 | 第41-42页 |
| 1.10 转基因互补载体的构建及农杆菌转化 | 第42-43页 |
| 1.10.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第42页 |
| 1.10.2 大肠感菌感受态的转化 | 第42页 |
| 1.10.3 农杆菌感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
| 1.10.4 农杆菌冻融转化法(热激法) | 第43页 |
| 1.11 转基因阳性植株的鉴定 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-52页 |
| 2.1 水稻flo7突变体的表型分析 | 第43-46页 |
| 2.2 野生型与突变体flo7胚乳复合淀粉颗粒的观察 | 第46-49页 |
| 2.3 野生型与突变体flo7部分生理生化性状的测定 | 第49-50页 |
| 2.4 FLO7的图位克隆及转基因功能互补 | 第50-52页 |
| 3 小结 | 第52-54页 |
| 3.1 FLO7编码一个新的参与胚乳发育的关键基因 | 第52-53页 |
| 3.2 FLO7参与水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成 | 第53-54页 |
| 第三章 FLO7的功能研究 | 第54-74页 |
| 1 材料与方法 | 第54-62页 |
| 1.1 氨基酸序列比对以及同源分析 | 第54页 |
| 1.2 大量抽提质粒DNA | 第54页 |
| 1.3 RNA提取、cDNA第一链的合成及Real-time PCR | 第54-56页 |
| 1.4 淀粉活性胶的制取与酶活染色 | 第56页 |
| 1.5 原位杂交 | 第56-58页 |
| 1.6 Western杂交 | 第58-59页 |
| 1.7 GUS组织染色 | 第59页 |
| 1.8 水稻原生质体的分离与转化 | 第59-60页 |
| 1.9 烟草叶片表皮细胞瞬时侵染方法 | 第60-61页 |
| 1.10 荧光素酶活性检测 | 第61页 |
| 1.11 酵母双杂 | 第61-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-71页 |
| 2.1 FLO7编码了一个含有DUF1338结构域的未知功能的保守蛋白 | 第62-63页 |
| 2.2 FLO7的组织表达分析 | 第63-66页 |
| 2.3 FLO7的亚细胞定位 | 第66-68页 |
| 2.4 蛋白的稳定性检测 | 第68-70页 |
| 2.5 淀粉合成相关基因荧光定量PCR分析及相关淀粉酶酶活检测 | 第70-71页 |
| 2.6 FLO7与淀粉合成相关蛋白的互作分析 | 第71页 |
| 3 讨论 | 第71-74页 |
| 3.1 FLO7和其同源基因是植物界内所特有的一类基因家族 | 第71-72页 |
| 3.2 FLO7是一个质体定位蛋白 | 第72页 |
| 3.3 FLO7在胚乳中的特异性表达 | 第72-73页 |
| 3.4 突变后的FLO7蛋白稳定性下降 | 第73页 |
| 3.5 淀粉合成相关基因和相关酶类在flo7中的表达分析 | 第73-74页 |
| 第四章 全文总结 | 第74-78页 |
| 1 flo7是一个新的种子发育异常突变体 | 第74页 |
| 2 FLO7参与水稻胚乳中复合淀粉颗粒的形成 | 第74-75页 |
| 3 FLO7编码一个植物中特有的DUF1338蛋白 | 第75页 |
| 4 FLO7定位在造粉体基质 | 第75页 |
| 5 FLO7在胚乳中的特异性表达 | 第75-76页 |
| 6 C端缺失氨基酸对FLO7蛋白稳定性起着重要作用 | 第76页 |
| 7 本研究的创新之处 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附录 | 第88-98页 |
| 在读期间发表论文 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
