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水稻籼粳杂种胚囊败育基因S7的图位克隆和功能分析

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语表第13-14页
第一章 文献综述第14-38页
    1 水稻籼粳杂种不育机理的研究第14-29页
        1.1 籼粳亚种间的遗传分化第14-16页
        1.2 籼粳杂种不育的细胞学研究第16-20页
            1.2.1 雌配子败育第16-17页
            1.2.2 雄配子败育第17-18页
            1.2.3 花药开裂异常第18页
            1.2.4 花粉在柱头上的附着及萌发障碍第18-19页
            1.2.5 雌雄异熟第19页
            1.2.6 环境条件第19-20页
        1.3 籼粳杂种不育的遗传模式第20-21页
            1.3.1 重复隐性基因配子体致死模式第20页
            1.3.2 单位点孢子体-配子体互作模式第20-21页
        1.4 水稻籼粳杂种不育基因的定位及克隆第21-29页
            1.4.1 雌配子败育位点的定位第22-24页
            1.4.2 雌配子败育位点的克隆第24-25页
            1.4.3 雄配子败育位点的定位第25-27页
            1.4.4 雄配子败育位点的克隆第27-28页
            1.4.5 雌、雄配子同时败育位点的定位第28-29页
    2 被子植物雌配子体的发育及受精第29-35页
        2.1 胚囊的发育第29-31页
        2.2 胚囊发育过程中细胞骨架的变化第31-32页
        2.3 胚囊发育过程中的调控基因第32-34页
            2.3.1 参与大孢子发生过程的基因第32-33页
            2.3.2 参与雌配子体发生过程的基因第33-34页
        2.4 胚囊对花粉管的引导和受精第34-35页
    3 Tetratricopeptide repeat (TPR)结构域第35-37页
        3.1 TPR的序列和结构特征第35-36页
        3.2 包含TPR结构域的蛋白及功能第36-37页
    4 本研究的目的和意义第37-38页
第二章 水稻籼粳杂种胚囊败育的细胞学研究第38-48页
    1 材料与方法第39-41页
        1.1 供试材料第39页
        1.2 I_2-KI染色法测定花粉育性第39页
        1.3 花粉离体培养测定花粉萌发率第39-40页
        1.4 花粉在柱头上的附着、萌发与伸长观察第40页
        1.5 核特异荧光染色与整体透明技术观察胚囊发育第40-41页
        1.6 盐酸浸泡结合I_2-KI染色法观察胚囊受精情况第41页
        1.7 饱和授粉第41页
        1.8 小穗育性的考察第41页
    2 结果与分析第41-46页
        2.1 亲本和F_1的花粉、小穗育性第41-43页
        2.2 亲本和F_1花粉萌发、伸长及饱和授粉第43-44页
        2.3 亲本和F_1胚囊发育过程的观察及其育性统计第44-46页
    3 讨论第46-48页
        3.1 雌配子的成熟第46页
        3.2 S7位点胚囊败育的细胞学探究第46-48页
第三章 水稻籼粳杂种败育基因S7的精细定位第48-60页
    1 材料与方法第49-51页
        1.1 供试材料第49页
        1.2 I_2-KI染色法测定花粉育性第49页
        1.3 小穗育性的考察第49页
        1.4 DNA的提取及PCR分析第49-50页
        1.5 配子传递率第50页
        1.6 dCAPS、CAPS标记的开发第50页
        1.7 单位物理距离内染色体交换率的计算第50-51页
        1.8 目标区域基因预测第51页
    2 结果与分析第51-57页
        2.1 Ingra/Cpslo17 F_1、Ingra/IR36 F_1半不育的遗传学分析第51-52页
        2.2 S7位点的广亲和测验第52-53页
        2.3 S7的精细定位第53-55页
        2.4 单位物理距离内染色体交换率的分析第55-56页
        2.5 S7目的区域内基因预测和分析第56-57页
    3 讨论第57-60页
        3.1 中性等位基因在籼粳杂种优势利用的应用第57-58页
        3.2 重组抑制第58-60页
第四章 S7候选基因的遗传转化和功能分析第60-78页
    1 材料与方法第61-63页
        1.1 材料及种植第61页
        1.2 DNA的提取及PCR分析第61页
        1.3 目标区域基因序列测定第61-62页
        1.4 RNA干扰载体的构建第62页
        1.5 农杆菌介导的水稻遗传转化第62页
        1.6 RNA干扰转基因植株的PCR鉴定第62页
        1.7 I_2-KI染色法测定花粉育性第62页
        1.8 核特异荧光染色与整体透明技术观察胚囊发育第62-63页
        1.9 小穗育性的考察第63页
        1.10 Real-time PCR (RT-PCR)第63页
        1.11 同源序列比对和系统进化分析第63页
    2 结果与分析第63-73页
        2.1 ORF3的组织表达分析和氨基酸序列比对第63-65页
        2.2 RNAi转基因植株的PCR检测及表型分析第65-72页
        2.3 ORF3等位基因的进化分析第72-73页
    3 讨论第73-78页
        3.1 杂种不育基因的克隆和功能研究第73-74页
        3.2 杂种不育与基因互作第74-76页
        3.3 水稻起源与水稻杂种不育位点的进化模式第76-78页
第五章 全文总结第78-82页
    1 全文结论第78-80页
        1.1 Ingra/Cpslo17、Ingra/IR36杂种F_1小穗半不育由胚囊败育导致第78-79页
        1.2 杂种F_1中败育胚囊基因型分别为S7~(cp)、S7~i第79页
        1.3 S7位于第7染色体着丝粒附近的139 kb范围内第79页
        1.4 Ingra/Cpslo17 F_(2:3)群体中重组抑制可能与逆转录转座子富集有关第79-80页
        1.5 编码包含TPR结构域蛋白质的ORF3参与S7控制的杂种胚囊败育第80页
    2 本研究创新之处第80-82页
参考文献第82-102页
附录第102-114页
在读期间发表的论文第114-116页
致谢第116页

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