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表达高致病性禽流感(AIV H5N1)HA重组鸭瘟病毒的构建与鉴定

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第10-28页
    1 禽流感的概况第10-12页
        1.1 禽流感病毒的特征第10-11页
        1.2 禽流感病毒的基因组结构第11-12页
        1.3 禽流感病毒的主要结构蛋第12页
    2 鸭瘟的概况第12-16页
        2.1 鸭瘟病毒的特征第13页
        2.2 鸭瘟病毒的生物学研究进展第13-15页
        2.3 鸭瘟病毒载体的研究进展第15-16页
    3 禽流感疫苗的研究进展第16-17页
        3.1 灭活全病毒疫苗第16页
        3.2 亚单位疫苗第16页
        3.3 病毒活载体疫苗第16-17页
        3.4 核酸疫苗第17页
    4 细菌人工染色体的研究进展第17-20页
        4.1 BAC载体系统的简介第17-19页
        4.2 BAC分子克隆化病毒第19页
        4.3 细菌人工染色体修饰技术第19-20页
    5 本研究的意义第20-22页
    参考文献第22-28页
第二章 表达HA(H5N1)的重组鸭瘟病毒的构建第28-52页
    1 试验材料第28-29页
        1.1 病毒、质粒与细胞第28页
        1.2 主要试剂第28-29页
        1.3 主要仪器设备第29页
    2 试验方法第29-43页
        2.1 引物设计与合成第29页
        2.2 HA表达盒的构建与鉴定第29-34页
        2.3 DEV GS1783电转化感受态的制备第34-35页
        2.4 表达HA鸭瘟病毒转移载体(pDEV BAC-HA)的构建与验证第35-38页
        2.5 表达HA重组鸭瘟病毒的构建第38-40页
        2.6 重组病毒的鉴定第40-42页
        2.7 重组病毒的生物学活性第42-43页
    3 结果与分析第43-50页
        3.1 质粒pT-PHAE的鉴定第43-44页
        3.2 质粒pT-PHAE-Kan+的验证第44-45页
        3.3 HA表达盒的PCR扩增第45页
        3.4 表达HA鸭瘟病毒转移载体(pDEV -HA)的验证第45-46页
        3.5 重组病毒的纯化结果第46-47页
        3.6 重组病毒HA表达盒的PCR扩增结果第47-48页
        3.7 间接免疫荧光鉴定结果第48页
        3.8 重组鸭瘟病毒HA基因表达产物Western blotting鉴定结果第48-49页
        3.9 鸭瘟弱毒株DEV~(C-KCE)、重组病毒DEV-H5 (UL55)、gC恢复株病毒DEV~(C-KCE)gC~RCID50第49-50页
    4 讨论第50-51页
    参考文献第51-52页
第三章 表达HA (AIV H5N1)的重组鸭瘟病毒免疫接种试验第52-58页
    1 材料和方法第52-53页
        1.1 材料第52页
        1.2 方法第52-53页
    2 结果第53-55页
        2.1 对鸭瘟(DEV)保护率第53-54页
        2.2 对AI的免疫保护力第54页
        2.3 DEV-H5(UL55)安全性试验第54-55页
    3 讨论第55-57页
    参考文献第57-58页
全文总结第58-60页
致谢第60页

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