| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略语及符号 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第13-33页 |
| 1. 病原学 | 第13-19页 |
| 1.1 分类地位 | 第13-14页 |
| 1.2 形态与结构 | 第14页 |
| 1.3 理化特性 | 第14-15页 |
| 1.4 致病机理 | 第15页 |
| 1.5 病毒基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.6 病毒基因编码的蛋白及其功能 | 第16-18页 |
| 1.7 基因遗传变异 | 第18-19页 |
| 2. 流行病学 | 第19页 |
| 3. 临床症状 | 第19页 |
| 4. 疫苗防制 | 第19-20页 |
| 5. 检测技术 | 第20-26页 |
| 5.1 病毒分离鉴定 | 第20-21页 |
| 5.2 血清学检测技术 | 第21-22页 |
| 5.3 分子生物学检测技术 | 第22-24页 |
| 5.4 PRRS分型鉴别诊断 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-33页 |
| 第二章 HP-PRRSV野毒荧光RT-PCR检测方法的建立 | 第33-59页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| 1.1 细胞、菌株及毒株 | 第34页 |
| 1.2 主要试剂 | 第34页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第34-35页 |
| 1.4 主要用到的生物学信息软件 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-41页 |
| 2.1 引物和探针的设计及合成 | 第35-36页 |
| 2.2 病毒核酸提取及RT-PCR扩增 | 第36页 |
| 2.3 标准品的制备和鉴定 | 第36-39页 |
| 2.4 荧光RT-PCR反应体系及条件优化 | 第39-41页 |
| 2.5 标准曲线绘制与灵敏度测定 | 第41页 |
| 2.6 荧光RT-PCR特异性实验 | 第41页 |
| 2.7 荧光RT-PCR重复性实验 | 第41页 |
| 2.8 荧光RT-PCR与普通RT-PCR的比较 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-53页 |
| 3.1 标准品的制备 | 第41-44页 |
| 3.2 荧光RT-PCR反应体系的优化 | 第44-47页 |
| 3.3 荧光RT-PCR检测的结果 | 第47-52页 |
| 3.4 荧光RT-PCR与普通RT-PCR检测方法的比较 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 第三章 JXA1-R疫苗毒株荧光RT-PCR检测方法的建立 | 第59-79页 |
| 1 材料 | 第59-61页 |
| 1.1 细胞、菌株及毒株 | 第59-60页 |
| 1.2 主要试剂 | 第60页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第60页 |
| 1.4 主要用到的生物学信息软件 | 第60-61页 |
| 2 方法 | 第61-65页 |
| 2.1 引物和Taqman探针的设计及合成 | 第61页 |
| 2.2 病毒核酸提取及RT-PCR扩增 | 第61-62页 |
| 2.3 标准品的制备和鉴定 | 第62-63页 |
| 2.4 荧光RT-PCR反应体系及条件优化 | 第63-64页 |
| 2.5 标准蓝线绘制与灵敏度测定 | 第64页 |
| 2.6 荧光RT-PCR特异性实验 | 第64页 |
| 2.7 荧光RT-PCR重复性实验 | 第64页 |
| 2.8 荧光RT-PCR与普通RT-PCR的敏感性比较 | 第64-65页 |
| 3 结果 | 第65-75页 |
| 3.1 标准品的制备 | 第65-66页 |
| 3.2 荧光RT-PCR反应体系的优化 | 第66-70页 |
| 3.3 荧光RT-PCR检测的结果 | 第70-73页 |
| 3.4 荧光RT-PCR与普通RT-PCR的检测方法比较 | 第73-75页 |
| 4 讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第四章 HP-PRRSV野毒及其疫苗毒株JXA1-R双重荧光RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 | 第79-95页 |
| 1 材料 | 第80-81页 |
| 1.1 细胞、菌株及毒株 | 第80页 |
| 1.2 待检临床样品 | 第80页 |
| 1.3 主要试剂 | 第80页 |
| 1.4 溶液的配制 | 第80-81页 |
| 2 方法 | 第81-82页 |
| 2.1 双重荧光RT-PCR反应条件的优化 | 第81页 |
| 2.2 双重荧光RT-PCR标准曲线的绘制 | 第81页 |
| 2.3 双重荧光RT-PCR敏感性实验 | 第81-82页 |
| 2.4 双重荧光RT-PCR特异性实验 | 第82页 |
| 2.5 双重荧光RT-PCR重复性实验 | 第82页 |
| 2.6 临床样本的检测 | 第82页 |
| 3 结果 | 第82-90页 |
| 3.1 双重荧光RT-PCR反应条件优化结果 | 第82-84页 |
| 3.2 双重荧光RT-PCR标准曲线 | 第84-87页 |
| 3.3 双重荧光RT-PCR敏感性实验结果 | 第87页 |
| 3.4 双重荧光RT-PCR特异性实验结果 | 第87-88页 |
| 3.5 双重荧光RT-PCR重复性实验 | 第88-90页 |
| 3.6 临床血样检测结果 | 第90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-95页 |
| 全文总结 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
