| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 植物花青素的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1.1 花青素的结构和基本功能 | 第11-12页 |
| 1.1.2 花青素的生物合成途径 | 第12-13页 |
| 1.1.3 花青素生物合成代谢途径的分子调控 | 第13-14页 |
| 1.1.4 影响花青素生物合成代谢途径的环境因素 | 第14-15页 |
| 1.2 植物WD40转录因子的研究进展 | 第15-19页 |
| 1.2.1 WD40转录因子的结构特征 | 第15-16页 |
| 1.2.2 WD40转录因子功能的多样性 | 第16-19页 |
| 1.3 苦荞黄酮及其代谢 | 第19-20页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第20页 |
| 2 材料方法 | 第20-32页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 植物材料和菌种 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂和药品 | 第20-21页 |
| 2.1.3 溶液和培养基 | 第21-22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-32页 |
| 2.2.1 苦荞总RNA的提取与cDNA第一链的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.2 5'-RACE和3'-RACE cDNA模板的制备 | 第23页 |
| 2.2.3 苦荞WD40基因的克隆 | 第23-27页 |
| 2.2.4 苦荞花青素含量的组织特异性与WD40基因表达的相关性分析 | 第27页 |
| 2.2.5 逆境胁迫下苦荞花青素含量与FtWD40基因表达量分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6 酵母单杂重组质粒构建及酶切鉴定 | 第28页 |
| 2.2.7 苦荞pBridge-FtWD40重组质粒转化酵母细胞 | 第28-29页 |
| 2.2.8 FtWD40转录激活活性的的滤纸分析 | 第29页 |
| 2.2.9 FtWD40植物表达载体的构建及酶切鉴定 | 第29页 |
| 2.2.10 FtWD40植物表达载体转化农杆菌 | 第29-30页 |
| 2.2.11 农杆菌介导的烟草的遗传转化 | 第30-31页 |
| 2.2.12 转基因烟草的阳性筛选 | 第31页 |
| 2.2.13 转基因烟草中花青素含量的测定 | 第31-32页 |
| 2.2.14 转基因烟草中花青素合成关键酶基因的表达分析 | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-44页 |
| 3.1 FtWD40的基因克隆及序列分析 | 第32-37页 |
| 3.1.1 苦荞总RNA的提取 | 第32页 |
| 3.1.2 苦荞FtWD40基因保守域的克隆 | 第32-33页 |
| 3.1.3 苦荞FtWD40基因5'-cDNA和3'-cDNA末端的克隆 | 第33-34页 |
| 3.1.4 苦荞FtWD40基因cDNA的扩增 | 第34页 |
| 3.1.5 苦荞FtWD40基因的生物信息学分析 | 第34-37页 |
| 3.2 苦荞花青素积累与FtWD40的基因表达的相关性分析 | 第37-39页 |
| 3.2.1 苦荞组织花青素含量测定 | 第37-38页 |
| 3.2.2 FtWD40在苦荞中的表达量分析 | 第38页 |
| 3.2.3 相关性分析 | 第38页 |
| 3.2.4 逆境胁迫下花青素含量测定 | 第38-39页 |
| 3.2.5 逆境胁迫下FtWD40在苦荞中的表达量分析 | 第39页 |
| 3.2.6 相关性分析 | 第39页 |
| 3.3 苦荞转录因子FtWD40的转录激活鉴定 | 第39-41页 |
| 3.3.1 pBridge-FtWD40表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.3.2 苦荞FtWD40的转录激活鉴定 | 第40-41页 |
| 3.4 苦荞FtWD40超表达对转烟草花青素合成的影响 | 第41-44页 |
| 3.4.1 pCMBIA-1301-FtWD40植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
| 3.4.2 FtWD40转基因烟草的筛选和鉴定 | 第42-43页 |
| 3.4.3 FtWD40转基因烟草中花青素含量测定 | 第43页 |
| 3.4.4 转基因烟草中花青素合成途径中酶基因的表达分析 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 WD40-repeat蛋白的进化分析 | 第44-45页 |
| 4.2 WD40-repeat蛋白结构与功能的分析 | 第45-46页 |
| 4.3 WD40-repeat蛋白的调控机理 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-51页 |
