艾蒿花粉过敏相关MHC蛋白表达、纯化和结晶研究
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| 1.花粉过敏的现状 | 第8-9页 |
| 2.花粉过敏相关蛋白简介 | 第9-11页 |
| 3.花粉过敏相关MHC简介 | 第11-15页 |
| 3.1 花粉过敏的一般机理 | 第11页 |
| 3.2 艾蒿花粉过敏相关MHC简介 | 第11-13页 |
| 3.3 艾蒿花粉过敏T细胞免疫应答机理 | 第13-14页 |
| 3.4 艾蒿花粉过敏TCR、MHC结构模型 | 第14页 |
| 3.5 艾蒿花粉过敏治疗的研究进展 | 第14-15页 |
| 4.论文研究的内容和意义 | 第15-16页 |
| 第二章 研究方法 | 第16-25页 |
| 1. 基因的合成 | 第16-18页 |
| 1.1 人工全基因合成 | 第16-18页 |
| 2. 载体的选择 | 第18-19页 |
| 2.1 载体介绍 | 第18页 |
| 2.2 感受态细胞制备原理 | 第18页 |
| 2.3 载体的构建 | 第18-19页 |
| 3. 包涵体的处理 | 第19-21页 |
| 3.1 包涵体的形成 | 第19-20页 |
| 3.2 包涵体的洗涤 | 第20页 |
| 3.3 包涵体的溶解 | 第20页 |
| 3.4 包涵体的复性 | 第20-21页 |
| 4. 蛋白晶体学 | 第21-25页 |
| 5.1 蛋白质晶体学 | 第21-22页 |
| 5.2 蛋白结晶的原理及影响因素 | 第22-23页 |
| 5.3 蛋白质结晶的方法 | 第23-24页 |
| 5.4 蛋白质晶体学的应用 | 第24-25页 |
| 第三章 实验材料和方法 | 第25-48页 |
| 1. 实验材料和仪器 | 第25-26页 |
| 2. 实验试剂配制 | 第26-29页 |
| 3. 全基因的合成 | 第29-36页 |
| 3.1 引物设计 | 第29-30页 |
| 3.2 全基因合成 | 第30-36页 |
| 4. 表达载体构建 | 第36-38页 |
| 5. 蛋白表达 | 第38-41页 |
| 5.1 高表达菌株筛选 | 第38-39页 |
| 5.2 大批量蛋白表达 | 第39页 |
| 5.3 细胞破碎 | 第39-41页 |
| 6. 包涵体纯化 | 第41-43页 |
| 6.1 包涵体的洗涤 | 第41页 |
| 6.2 包涵体的溶解 | 第41-42页 |
| 6.3 包涵体纯度、浓度鉴定 | 第42-43页 |
| 7. 包涵体复性 | 第43-45页 |
| 7.1 高通量包涵体复性的筛选 | 第43页 |
| 7.2 包涵体的复性 | 第43-45页 |
| 8. 蛋白纯化 | 第45-47页 |
| 8.1 SephroseQ柱纯化 | 第45-46页 |
| 8.2 Superdex纯化 | 第46-47页 |
| 9. 晶体筛选 | 第47-48页 |
| 9.1 96 孔晶体筛选 | 第47-48页 |
| 第四章 实验结果与讨论 | 第48-66页 |
| 1. 基因合成比对结果 | 第48-52页 |
| 2. 表达检测及表达优化 | 第52-57页 |
| 3. 包涵体的提取 | 第57-58页 |
| 4. 复性最优条件筛选 | 第58-60页 |
| 5. 纯化结果 | 第60-62页 |
| 6. 结晶生长 | 第62-63页 |
| 7. 结果讨论 | 第63-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
