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PURA和RIP3与食管癌发生发展相关性研究

缩略语索引表第1-10页
摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
引言第14-16页
第一部分 PURα促进食管癌细胞Caspase-8L的抗凋亡功能第16-41页
 摘要第16-17页
 Abstract第17-19页
 引言第19-22页
 材料和方法第22-32页
  一、材料第22-25页
   1. 细胞系第22页
   2. 菌株与质粒第22页
   3. 抗体第22页
   4. 主要仪器第22-23页
   5. 主要试剂第23-24页
   6. 常用溶液的配制第24-25页
  二、方法第25-32页
   1. 细胞培养第25-26页
   2. 细胞全蛋白提取第26页
   3. Bradford法蛋白定量第26页
   4. Western blot analysis第26-27页
   5. 免疫荧光第27-28页
   6. 质粒的扩增和提取第28-29页
   7. 稳定转染细胞系筛选第29-30页
   8. Caspase-8蛋白酶活检测第30-32页
 结果第32-36页
  1. PURα过表达食管癌细胞构建第32-33页
   ·PURα在不同食管癌细胞中的表达第32页
   ·PURα过表达载体构建第32页
   ·PURα过表达细胞系筛选第32-33页
  2. PURα过表达抑制细胞凋亡第33-36页
   ·PURα过表达上调食管癌细胞Caspase-8L表达第33-34页
   ·PURα过表达促进食管癌细胞Caspase-8L胞浆转位第34页
   ·Caspase-8L胞浆定位抑制外源凋亡通路的活化和促进细胞存活第34-36页
 讨论第36-40页
 小结第40-41页
第二部分 PURα过表达引起食管癌细胞EMT第41-70页
 摘要第41-42页
 Abstract第42-43页
 前言第43-44页
 材料和方法第44-46页
  一、材料第44页
   1. 抗体第44页
   2. 试剂第44页
  二、方法第44-46页
   1. 免疫组织化学第44-45页
   2. WST-8法检测细胞生长第45页
   3. 细胞Transwell侵袭实验第45页
   4. 细胞划痕实验和划痕创伤愈合修复分析第45-46页
 结果第46-60页
  1. PURα在食管癌和癌旁食管上皮中的表达第46-47页
  2. KYSE 510-PURα和KYSE 510-pCMV6细胞转录组分析第47-53页
  4. 过表达PURα的KYSE 510细胞形态的检测第53-55页
  5. 过表达PURα对KYSE 510细胞生长影响第55页
  6. E-cadherin和Vimentin在KYSE 510-PURα细胞中的表达第55-56页
  7. EMT相关蛋白在PURα过表达细胞中的表达第56-58页
  8. KYSE 510-PURα细胞迁移能力的分析第58页
  9. KYSE 510-PURα细胞侵袭能力的分析第58-60页
 讨论第60-69页
 小结第69-70页
第三部分 RIP3过表达增强食管癌细胞对顺铂的敏感性第70-92页
 摘要第70-71页
 Abstract第71-72页
 前言第72-73页
 材料和方法第73-77页
  一、材料第73-74页
   1. 细胞系第73页
   2. 抗体第73页
   3. 菌株与质粒第73页
   4. siRNA第73-74页
  二、方法第74-77页
   1. 细胞培养第74页
   2. 细胞转染第74页
   3. WST-8法检测细胞存活率第74-75页
   4. 顺铂处理细胞第75页
   5. 在HEK293T细胞RIP3基因的CRISPR/Cas9稳定敲除第75-77页
 结果第77-82页
  1. KYSE 140细胞敲降RIP3对顺铂敏感性的影响第77页
  2. KYSE 140细胞过表达RIP3对顺铂敏感性的影响第77-78页
  3. KYSE 510细胞过表达RIP3对顺铂敏感性的影响第78页
  4. MEF细胞过表达RIP3对顺铂敏感性的影响第78-79页
  5. HEK293T细胞敲除RIP3基因第79-80页
  6. HEK293T-RIP3KO细胞过表达RIP3对顺铂敏感性的影响第80页
  7. 过表达RIP3对HEK293T-RIP3KO细胞DNA损伤修复通路影响第80-82页
 讨论第82-91页
 小结第91-92页
参考文献第92-99页
文献综述第99-112页
 参考文献第109-112页
个人简历第112-114页
致谢第114-115页
附件:研究生期间获奖证书和发表文章第115-137页

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