| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-15页 |
| ·研究背景 | 第12-13页 |
| ·研究目的 | 第13-14页 |
| ·研究意义 | 第14-15页 |
| 第2章 ID1 蛋白及其家族成员在肿瘤发生发展中的作用与机制 | 第15-21页 |
| ·ID1 蛋白及其家族成员的结构、功能 | 第15-16页 |
| ·ID1 作为 Oncogene | 第16页 |
| ·ID1 与肿瘤浸润和转移 | 第16-18页 |
| ·ID1 及其家族成员与肿瘤干细胞 | 第18-19页 |
| ·ID1 在肿瘤细胞化疗药物耐药性中的作用 | 第19页 |
| ·ID 基因在肿瘤治疗过程中的作用 | 第19-21页 |
| 第3章 材料与方法 | 第21-39页 |
| ·实验材料 | 第21-28页 |
| ·细胞系 | 第21页 |
| ·菌种及质粒 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22-23页 |
| ·siRNA 序列 | 第23页 |
| ·试剂盒 | 第23-24页 |
| ·抗体 | 第24页 |
| ·一般试剂 | 第24-26页 |
| ·常用溶液的配制方法 | 第26-28页 |
| ·其他 | 第28页 |
| ·主要仪器及用品 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-39页 |
| ·DH5α感受态大肠杆菌制备 | 第28-29页 |
| ·DNA 片段克隆及表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·重组质粒双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·定点突变载体的构建 | 第31-32页 |
| ·实验原理 | 第31页 |
| ·实验步骤 | 第31-32页 |
| ·siRNA 转染 | 第32页 |
| ·慢病毒的包装与感染 | 第32-33页 |
| ·病毒感染细胞 | 第33页 |
| ·G418 筛选病毒感染的细胞 | 第33页 |
| ·Dual-luciferase reporter 实验 | 第33页 |
| ·实时定量 RT-PCR ( qRT-PCR ) | 第33-36页 |
| ·提取细胞/组织的总 RNA | 第33-34页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第34页 |
| ·PCR 扩增基因 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第35-36页 |
| ·Western Blot | 第36-37页 |
| ·MTS 法测定细胞活力 | 第37页 |
| ·细胞周期 | 第37-38页 |
| ·细胞凋亡 | 第38页 |
| ·统计学处理 | 第38-39页 |
| 第4章 结果与分析 | 第39-56页 |
| ·ID1 在肿瘤细胞中的表达水平及其抗药性 | 第39-40页 |
| ·过表达 ID1 可以增强细胞抵抗化疗药物的能力 | 第40-41页 |
| ·依托泊苷可以诱导 ID1 的表达 | 第41-42页 |
| ·化疗药物处理会引起 ID1 转录水平的变化 | 第42-44页 |
| ·构建具有转录活性 ID1 promoter 区质粒 | 第42-43页 |
| ·化疗药物可以增强 ID1 转录活性 | 第43-44页 |
| ·ID1 启动子区序列分析 | 第44-46页 |
| ·在 ID1 启动子区 AP-1 DNA 结合位点具有转录活性 | 第46-48页 |
| ·转录因子 c-Jun 和 c-Fos 参与 ID1 表达的调控 | 第48-49页 |
| ·过表达和敲降 ID1 基因的表达会影响周期相关及凋亡相关的基因表达 | 第49-50页 |
| ·过表达或敲降 ID1 可以影响依托泊苷诱导的细胞凋亡 | 第50-51页 |
| ·ID1 对细胞凋亡的抵抗作用依赖 c-Jun/c-Fos 对其的调控 | 第51-53页 |
| ·ID1 促进食管癌细胞增殖、形成单克隆 | 第53-55页 |
| ·转录因子 AP-1 与 ID1 的相关性 | 第55-56页 |
| 第5章 讨论 | 第56-59页 |
| 附录：中英文缩略词汇总 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第72页 |
