2种基因分型方法进行野鸟源AIV HA亚型鉴定的应用研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-25页 |
| ·课题背景 | 第9页 |
| ·禽流感病毒病原学特征 | 第9-15页 |
| ·禽流感病毒的发现及发展历史 | 第9-10页 |
| ·禽流感病毒的分类地位、形态及其命名 | 第10-11页 |
| ·禽流感病毒基因组以及相应蛋白的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·禽流感病毒化学组成和对理化因素的抵抗力 | 第12页 |
| ·禽流感病毒的血凝活性 | 第12-13页 |
| ·禽流感病毒培养以及实验室的宿主系统 | 第13页 |
| ·禽流感病毒的复制(感染) | 第13页 |
| ·禽流感病毒致病力以及毒力 | 第13-14页 |
| ·禽流感病毒的抗原性变异 | 第14-15页 |
| ·禽流感流行病学特征 | 第15-21页 |
| ·传染源及其自然宿主 | 第15页 |
| ·禽流感病毒的传播途径 | 第15-16页 |
| ·野生鸟类带毒 | 第16页 |
| ·潜伏期及临床症状 | 第16-17页 |
| ·AIV在我国流行现状以及防治措施 | 第17页 |
| ·野生鸟类在禽流感流行病学中的作用 | 第17-18页 |
| ·LPAIV向HPAIV转变 | 第18页 |
| ·AIV各HA亚型概况 | 第18-20页 |
| ·禽流感与人类健康 | 第20-21页 |
| ·禽流感主要诊断及检测方法 | 第21-23页 |
| ·禽流感病毒的分离及初步鉴定 | 第21页 |
| ·血清学鉴定 | 第21-22页 |
| ·AI分子生物学诊断技术 | 第22-23页 |
| ·基于RT-PCR的特异性基因分型方法 | 第23页 |
| ·本课题研究的目的意义 | 第23-25页 |
| 2 实验1 简并引物鉴定野鸟源AIV HA亚型 | 第25-35页 |
| ·实验材料和实验仪器 | 第25-27页 |
| ·毒株 | 第25-26页 |
| ·实验试剂 | 第26-27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第27页 |
| ·cDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·PCR扩增 | 第28页 |
| ·PCR结果鉴定 | 第28页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第28-30页 |
| ·PCR方法鉴定重组质粒 | 第30页 |
| ·序列测定 | 第30页 |
| ·序列比较分析 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-35页 |
| ·简并引物RT-PCR扩增结果 | 第30-32页 |
| ·序列测定结果 | 第32-33页 |
| ·BLAST比对结果 | 第33-35页 |
| 3 实验2 通用引物鉴定野鸟源AIV HA亚型 | 第35-47页 |
| ·实验材料和实验仪器 | 第35-37页 |
| ·样品来源及样品采集 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36页 |
| ·实验仪器 | 第36-37页 |
| ·鸡胚及红细胞 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·样品的处理及病毒的分离 | 第37页 |
| ·红细胞凝集试验(HA) | 第37-38页 |
| ·AIV的RT-PCR检测 | 第38页 |
| ·利用通用引物进行PCR扩增 | 第38页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第38-39页 |
| ·PCR方法鉴定重组质粒 | 第39页 |
| ·序列测定 | 第39页 |
| ·序列比较分析 | 第39页 |
| ·补充验证性实验 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-47页 |
| ·血凝试验(HA)结果 | 第39页 |
| ·AIV的RT-PCR检测结果 | 第39-40页 |
| ·通用引物RT-PCR扩增结果 | 第40-41页 |
| ·序列测定结果 | 第41-42页 |
| ·亚型鉴定结果 | 第42-44页 |
| ·验证性实验结果 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| ·野生鸟类在传播AIV中的作用 | 第47页 |
| ·HA基因的特性 | 第47页 |
| ·禽流感HA亚型鉴定方法的比较 | 第47-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
