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东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST毕赤酵母表达体系的构建

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
缩略语表第6-9页
1 绪论第9-16页
   ·抗菌肽研究的起源与进展第9页
   ·抗菌肽的分类第9-11页
     ·根据抗菌肽的一级结构及氨基酸组成分类第9-10页
     ·根据抗菌肽的分子结构及功能分类第10页
     ·根据抗菌肽的来源分类第10-11页
   ·抗菌肽的理化性质第11页
   ·抗菌肽的抗菌作用机理及其生物学活性第11-12页
     ·抗菌肽的抗菌作用机理第11页
     ·抗菌肽的生物学活性第11-12页
   ·抗菌肽基因工程的研究第12-16页
     ·原核表达体系第13页
     ·真核表达体系第13-15页
     ·本研究的目的及意义第15页
     ·本研究需要解决的关键问题第15-16页
2 实验材料与方法第16-30页
   ·实验材料第16-20页
     ·实验动物第16页
     ·主要生化试剂第16-17页
     ·主要仪器第17-18页
     ·实验试剂的配制第18-20页
   ·实验方法第20-30页
     ·东北林蛙皮肤总RNA提取及检测第20-21页
     ·含His6的目的基因dybowskin-1ST的合成第21-24页
     ·真核表达载体的构建第24-25页
     ·真核表达载体的毕赤酵母转化第25-27页
     ·重组毕赤酵母的诱导表达第27页
     ·表达产物dybowskin-1ST的SDS-PAGE电泳检测第27-28页
     ·重组dybowskin-1ST的Ni-Agarose His纯化第28页
     ·重组dybowskin-1ST的HPLC纯度检测第28页
     ·重组dybowskin-1ST抑菌试验第28-29页
     ·重组dybowskin-1ST最小抑菌浓度(MIC)测定第29-30页
3 结果与分析第30-40页
   ·东北林蛙皮肤总RNA的提取第30页
   ·目的基因的PCR第30-32页
     ·dybowskin-1ST的PCR电泳检测第30-31页
     ·His6的PCR电泳检测第31页
     ·PCR连接产物的电泳检测第31-32页
   ·提取的质粒pPIC9K的电泳检测第32-33页
   ·重组毕赤酵母GS115的菌液PCR电泳检测第33-34页
   ·dybowskin-1ST的SDS-PAGE电泳检测第34页
   ·dybowskin-1ST的HPLC检测第34-35页
   ·重组dybowskin-1ST的抑菌试验第35-37页
   ·dybowskin-1ST的最小抑菌浓度实验第37页
   ·讨论第37-40页
     ·实验过程中技术关键的解决第37-38页
     ·重组抗菌肽dybowskin-1ST的抗微生物学特性第38-40页
结论第40-41页
参考文献第41-46页
攻读学位期间发表的学术论文第46-47页
致谢第47-48页

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