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植物发育相关基因Tip41在小麦中的遗传效应分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-12页
插图清单第12-15页
附表清单第15-16页
缩略词表第16-17页
第一章 文献综述第17-40页
   ·QTL分析与关联分析第17-24页
     ·选择牵连效应第18-19页
     ·选择牵连效应与基因进化第19-22页
     ·基因发掘的重要途径第22-24页
     ·选择牵连效应对理论研究与育种实践的指导意义第24页
   ·氮代谢研究进展第24-28页
     ·氮对植物生长发育的影响第24-26页
     ·氮吸收利用相关的遗传基础研究第26-28页
   ·TOR信号通路研究进展第28-34页
     ·TOR调控营养代谢途径及细胞生长过程第28-32页
     ·TOR通路成员TP41研究进展第32-33页
     ·TAP42/α4/TAP46的研究进展第33-34页
   ·PP2A蛋白磷酸酶参与植物开花时期调节第34-36页
   ·本研究的目的意义和技术路线第36-40页
第二章 材料与方法第40-61页
   ·实验材料第40-45页
     ·植物材料与BAC文库第40页
     ·各种酶与试剂第40-41页
     ·植物培养所需材料及引物序列第41-44页
     ·主要仪器第44-45页
     ·菌体材料和载体第45页
   ·常用培养基配方第45-46页
   ·实验方法第46-61页
     ·含Xgwm212-BAC阳性克隆的分离与鉴定第46页
     ·CTAB法提取小麦和拟南芥DNA第46-47页
     ·基因克隆第47-48页
     ·T克隆载体与目标基因连接及阳性克隆鉴定第48页
     ·质粒提取、纯化及测序第48-49页
     ·小麦叶片和拟南芥RNA的提取方法第49-50页
     ·籽粒RNA提取方法第50页
     ·总RNA反转录第50-51页
     ·荧光定量PCR第51页
     ·分子标记开发第51-52页
     ·SSR扫描毛细血管电泳检测法第52-53页
     ·变性聚丙烯酰胺电泳第53页
     ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染检测第53页
     ·用于亚细胞定位的载体构建第53页
     ·Bio-Rad Helios手持式基因枪转化洋葱表皮细胞第53-55页
     ·目的基因-GFP质粒转化小麦原生质体第55-57页
     ·酵母双杂实验第57-58页
     ·拟南芥过表达载体、互补载体的构建及转化、鉴定第58-59页
     ·互补载体构建的构建方法和步骤第59-60页
     ·干扰载体的构建与小麦遗传转化第60-61页
第三章 实验结果与分析第61-106页
   ·含有Xgwm212标记位点的BAC分析第61-65页
     ·BAC阳性克隆筛选与测序第61-62页
     ·基因预测第62-64页
     ·Xgwm212所在基因组区段与短柄草及水稻共线性分析第64页
     ·候选基因确定第64-65页
   ·TaTip41基因克隆与亚细胞定位第65-71页
     ·Tip41的保守性分析第65-66页
     ·TaTip41基因克隆第66-69页
     ·TaTIP41亚细胞定位第69-71页
   ·Tip41在拟南芥中的基本生物学功能分析第71-83页
     ·突变体attip41纯合体鉴定与表型观察第71-73页
     ·TaTip41转基因拟南芥筛选与鉴定第73-75页
     ·三种基因型拟南芥表型比较第75-77页
     ·TIP41在TOR途径中的作用机制探讨第77-80页
     ·TIP41在开花途径中的作用机制探讨第80-82页
     ·互补载体构建转化第82-83页
   ·Tip41在小麦中的遗传效应分析第83-100页
     ·TaTip41-5A单元型分析第83页
     ·TaTip41-5A的染色体定位第83-84页
     ·TaTip41-5A的遗传效应分析第84-88页
     ·TaTip41-5B单元型分析第88-89页
     ·TaTip41-5B的染色体定位第89-90页
     ·TaTip41-5B的遗传效应分析第90-93页
     ·TaTip41-5D单元型分析第93-94页
     ·TaTip41-5D的遗传效应分析第94-100页
   ·TaTip41-5D在选择导入系中的表型分析第100-101页
   ·TaTip41对氮胁迫的响应第101-102页
     ·TaTip41-5A对氮胁迫的响应第101页
     ·TaTip41-5B对氮胁迫的响应第101-102页
     ·TaTip41-5D对氮胁迫的响应第102页
   ·TaTip41的组织表达分析第102-104页
   ·TaTip41-RNAi转基因小麦的检测与表达分析第104-106页
第四章 结果讨论与结论第106-110页
   ·结果讨论第106-109页
     ·基于全基因组关联分析方法发掘新基因第106-107页
     ·候选基因的序列多态性和关联分析第107-108页
     ·TIP41影响植物的开花与氮代谢第108-109页
   ·结论第109-110页
附录:上游调控序列的插入缺失对HMW-GS 1Bx的表达影响第110-122页
 前言第110-111页
 实验结果第111-119页
   ·Glu-1Bx上游调控序列比较分析第111-114页
   ·转基因水稻GUS组织染色及定量分析第114-116页
   ·转基因水稻拷贝数鉴定第116页
   ·HMW-GS启动子进化分析第116-117页
   ·分子标记开发及其在自然群体中分布情况第117-119页
 小结与讨论第119-122页
   ·1Bx7~(OE)-1047 bp处43 bp插入与超表达紧密相关第119-120页
   ·1Bx14-874 bp处185 bp MITE片段对转录具有正向微调作用第120页
   ·胚乳特异元件“54 bp”对其特异性是必须的,其串联重复利于提高其活性第120页
   ·1Bx7~(OE)标记的开发及应用第120-122页
参考文献第122-130页
致谢第130-132页
作者简介第132页

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