摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
1 文献综述 | 第10-21页 |
·研究目的和意义 | 第10页 |
·水通道蛋白的研究进展 | 第10-12页 |
·水通道蛋白的发现 | 第10-11页 |
·植物水通道蛋白研究的理论背景 | 第11-12页 |
·植物水分运动的影响因素 | 第11页 |
·植物细胞中水分跨膜运输方式 | 第11-12页 |
·植物水通道蛋白的多样性及分类 | 第12-13页 |
·植物水通道蛋白的基本特征 | 第13-14页 |
·植物水通道蛋白的结构 | 第13-14页 |
·植物水通道蛋白的分布和含量 | 第14页 |
·植物水通道蛋白的表达调控 | 第14-17页 |
·植物水通道蛋白转录水平层次的调控 | 第14-16页 |
·生长发育阶段的调控 | 第15页 |
·环境胁迫因子调控 | 第15页 |
·植物激素调控 | 第15页 |
·其他转录水平调控 | 第15-16页 |
·植物水通道蛋白转录后水平的调控 | 第16-17页 |
·磷酸化调控和 Ca2+调节 | 第16页 |
·糖基化调控 | 第16页 |
·基因异聚化调控 | 第16页 |
·pH 调控 | 第16-17页 |
·压力和溶质梯度调控 | 第17页 |
·植物水通道蛋白膜运输的调控 | 第17页 |
·植物水通道蛋白的生理功能 | 第17-19页 |
·植物水通道蛋白的运输功能 | 第17页 |
·水分的长距离运输 | 第17页 |
·水分的跨膜快速运输 | 第17页 |
·运输其他小分子物质 | 第17页 |
·渗透调节作用 | 第17-18页 |
·调节细胞的胀缩 | 第18页 |
·维持水势的平衡 | 第18页 |
·植物生长发育中的作用 | 第18-19页 |
·细胞的伸长和分化 | 第18页 |
·叶片的发育 | 第18页 |
·有性繁殖与开花 | 第18页 |
·果实的成熟和种子的萌发、成熟 | 第18-19页 |
·植物水通道蛋白耐旱研究 | 第19-20页 |
·研究内容与技术路线 | 第20-21页 |
·主要研究内容 | 第20页 |
·研究技术路线 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-38页 |
·材料 | 第21-23页 |
·试验材料 | 第21页 |
·试验处理 | 第21页 |
·载体与菌株 | 第21页 |
·生化试剂与酶 | 第21-22页 |
·PCR 引物 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-38页 |
·黄瓜 PIP 基因的生物信息学分析 | 第23页 |
·黄瓜 PIP1 和 PIP2 亚家族基因的荧光定量 | 第23-25页 |
·利用 RNAiso Plus(Total RNA)试剂盒提取 RNA | 第23-24页 |
·RNA 的反转录实验 | 第24页 |
·荧光定量 PCR 检测 PIP1 和 PIP2 的基因表达变化 | 第24-25页 |
·黄瓜 Csa019689 基因的克隆 | 第25-31页 |
·利用 RNAiso Plus(Total RNA)试剂盒提取 RNA | 第25-26页 |
·RNA 的反转录实验 | 第26页 |
·分离黄瓜 PIP 中的 Csa019689 基因 | 第26-27页 |
·PCR 产物的回收 | 第27-28页 |
·PCR 产物与 T 载体的连接反应 | 第28页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第28-29页 |
·菌落的挑选以及摇菌 | 第29页 |
·菌液 PCR 的鉴定 | 第29-30页 |
·大肠杆菌内质粒 DNA 的提取 | 第30页 |
·克隆载体酶切验证 | 第30-31页 |
·DNA 序列测定与分析 | 第31页 |
·黄瓜 PIP 基因 Csa019689 的表达载体的构建 | 第31-35页 |
·表达载体引物设计 | 第31页 |
·PCR 扩增 | 第31-32页 |
·克隆载体和表达载体的酶切 | 第32-33页 |
·酶切产物回收及电泳检测 | 第33页 |
·目的片段与载体片段的连接 | 第33页 |
·连接产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第33页 |
·菌落的挑选以及摇菌 | 第33页 |
·菌液 PCR 的鉴定 | 第33-34页 |
·DNA 序列检测 | 第34页 |
·表达载体质粒的提取 | 第34-35页 |
·农杆菌介导的 GV3103 对拟南芥的遗传转化 | 第35-38页 |
·连接产物转化感受态细胞 | 第35-36页 |
·菌落的筛选摇菌 | 第36页 |
·菌液 PCR 的鉴定 | 第36-37页 |
·农杆菌侵染拟南芥 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-50页 |
·黄瓜 PIP 基因的生物信息学分析 | 第38-40页 |
·黄瓜叶片 PIP 基因与拟南芥响应干旱胁迫 PIP 基因的同源性比较 | 第38页 |
·黄瓜 PIP 基因的编码蛋白的性质分析 | 第38-40页 |
·黄瓜 PIP1 和 PIP2 亚家族的基因表达分析 | 第40-44页 |
·PIP 基因在 PEG6000 模拟干旱胁迫条件下的表达模式分析 | 第40-44页 |
·黄瓜 Csa019689 基因的克隆 | 第44-46页 |
·黄瓜叶片总 RNA 的提取以及纯度检测 | 第44-45页 |
·黄瓜 Csa019689 基因全长 cDNA 的克隆与菌液检测 | 第45页 |
·Csa019689 基因的测序结果比对 | 第45-46页 |
·黄瓜 Csa019689 基因的表达载体的构建 | 第46-49页 |
·pCAMBIA2301 表达载体的构建 | 第46-47页 |
·大肠杆菌阳性转化子的 PCR 验证和酶切鉴定 | 第47-48页 |
·农杆菌中重组质粒的 PCR 检测 | 第48-49页 |
·黄瓜基因 Csa019689 对拟南芥的遗传转化 | 第49-50页 |
·转基因拟南芥植株 T0 代种子的收获 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |