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柑橘采后生防菌柠檬形克勒克酵母(34-9)产生的活性物质及其他抑菌机制的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-15页
第一章 文献综述第15-33页
 1 柑橘采后病害的发生第15-20页
   ·柑橘采后主要病害第15-16页
   ·柑橘青、绿霉第16-17页
   ·病原菌浸染的影响因素第17-20页
     ·机械损伤第17-18页
     ·柑橘自身抗病能力第18-19页
     ·病菌自身致病力第19-20页
     ·温度和湿度等环境因素第20页
 2 柑橘采后病害的生物防治第20-31页
   ·杀菌剂是现行控制柑橘真菌性病害的主要方法第20-21页
   ·生物防治第21-25页
   ·酵母拮抗菌拮抗效率的改造第25-27页
   ·酵母菌拮抗机理的研究第27-31页
     ·营养或空间竞争第27-28页
     ·对病原菌的直接寄生第28-29页
     ·诱导寄主产生抗性第29-30页
     ·分泌抗菌素第30-31页
 3 酵母拮抗菌的安全性第31-32页
 4 研究的目的及意义第32-33页
第二章 柠檬形克勒克酵母(KA)分泌抗菌物质的研究第33-67页
 1 引言第33页
 2 实验材料与方法第33-62页
   ·实验材料第33-35页
     ·拮抗菌第33页
     ·病原菌第33-34页
     ·供试柑橘第34页
     ·培养基第34-35页
   ·实验方法第35-43页
     ·抗菌物质的提取第35-36页
       ·(NH_4)_2SO_4沉淀第35页
       ·超低温干燥第35页
       ·有机溶剂萃取第35-36页
       ·琼脂扩散法检测抗菌活性第36页
     ·粗提取物的基本性质研究第36-38页
       ·粗提取物的大量提取第36页
       ·温度对粗提取物抗菌效果的影响第36页
       ·抗菌物质与菌量的关系第36-37页
       ·粗提取物MIC和MFC的测定第37页
       ·粗提取物对青霉亚细胞结构的影响第37-38页
       ·粗提取物质对分离自不同产区和柑橘品种青霉菌的抑制作用第38页
     ·抗菌物质的分离纯化与鉴定第38-40页
       ·TLC分离纯化第38-39页
       ·HPLC分离纯化第39页
       ·LC-MS检测第39-40页
       ·GC-MS检测第40页
     ·苯乙醇(PEA)和苯乙酸(PAA)抗菌效果研究第40-41页
       ·MIC的测定第40页
       ·柑橘果实活体抗菌实验第40页
       ·柑橘贮藏实验第40-41页
     ·苯乙醇(PEA)对KA酵母自身的影响第41页
     ·KA生长中苯乙醇(PEA)浓度的测定第41页
     ·苯乙醇(PEA)对意大利青霉基因表达的影响第41-43页
       ·样品处理和总RNA提取第41-43页
       ·数字表达谱升级版检测及差异基因的结果验证第43页
   ·实验结果第43-62页
     ·抗菌物质的有效提取第43-44页
     ·粗提取物中抗菌物质热稳定性和挥发性第44-45页
     ·KA抗菌物质的分泌与生物量密切相关第45-46页
     ·粗提取物明显抑制PIB3孢子萌发和芽管生长第46-47页
     ·粗提取物可以抑制分离自不同产区和柑橘品种的青、绿霉菌株第47-50页
     ·粗提取物中抗菌物质的分离与纯化第50-52页
     ·抗菌物质的结构鉴定第52-54页
     ·苯乙醇(PEA)和苯乙酸(PAA)可以很好的防治柑橘青、绿霉第54-57页
     ·苯乙醇(PEA)对KA酵母自身的影响第57页
     ·KA分泌苯乙醇(PEA)的动态分析第57-58页
     ·苯乙醇(PEA)抗菌机理的研究第58-62页
 3 讨论第62-67页
第三章 柠檬形克勒克酵母(KA)及其分泌物诱导柑橘果实抗性的研究第67-94页
 1 引言第67页
 2 实验材料与方法第67-86页
   ·实验材料第67页
   ·实验方法第67-74页
     ·果实的处理第67-68页
     ·PR相关蛋白的测定第68-70页
       ·SOD活性的测定第68页
       ·POD活性的测定第68页
       ·CAT活性的测定第68页
       ·β-1,3-葡聚糖酶活性的测定第68-69页
       ·几丁质酶的测定第69-70页
       ·PAL活性的测定第70页
     ·抗性相关激素和信号的测定第70-71页
       ·H_2O_2含量的测定第70页
       ·多胺的测定第70-71页
       ·木质素的测定第71页
     ·柑橘基因芯片第71-74页
       ·样品的处理第71页
       ·RNA提取第71-72页
       ·芯片杂交与生物信息学分析第72页
       ·Real time RT-PCR第72-74页
   ·实验结果第74-86页
     ·KA和PEA对柑橘果皮PR蛋白等抗性相关的影响第74-78页
       ·果皮SOD活性的诱导第74页
       ·果皮CAT活性的诱导第74-75页
       ·果皮POD活性的诱导第75-76页
       ·果皮PAL活性的诱导第76页
       ·果皮几丁质酶活性的诱导第76-77页
       ·果皮β-1,3-葡聚糖酶活性的诱导第77-78页
       ·果皮木质素的诱导第78页
     ·KA和PEA对柑橘果皮抗性相关信号物质的影响第78-79页
       ·对果皮H_2O_2含量的影响第78-79页
       ·对果皮多胺含量的影响第79页
     ·KA和PEA对柑橘果皮抗性的影响第79-80页
     ·基因芯片分析第80-86页
       ·RNA质量检测第80-82页
       ·芯片杂交第82页
       ·生物信息学分析第82-85页
       ·Real time-PCR验证第85-86页
 3 讨论第86-94页
第四章 柠檬形克勒克酵母(KA)其他抗菌机理的研究第94-105页
 1 引言第94页
 2 实验材料与方法第94-102页
   ·实验材料第94-95页
   ·实验方法第95-96页
     ·KA和青、绿霉可利用的碳、氮源分析第95页
     ·外源营养物质或激素对KA防治的影响第95页
     ·KA絮凝率测定第95-96页
     ·SEM观察柑橘表面KA以及KA与病菌互作第96页
   ·实验结果第96-102页
     ·KA和青、绿霉可利用的碳、氮源差异分析第96-99页
     ·外源营养物质或激素的影响KA防治效果第99-100页
     ·KA易絮凝第100页
     ·KA在柑橘果实表面形成biofilm第100-101页
     ·柑橘伤口处KA可与柑橘青霉互作第101-102页
 3 讨论第102-105页
小结第105-109页
展望第109-111页
参考文献第111-137页
图版和说明第137-147页
攻读博士期间发表的论文第147-149页
致谢第149页

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