猪流行性腹泻病毒S、M、ORF3基因的克隆和序列分析
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-12页 |
| 1 猪流行性腹泻研究进展 | 第12-20页 |
| ·猪流行性腹泻病毒 | 第12-13页 |
| ·猪流行性腹泻流行情况 | 第13-14页 |
| ·猪流行性腹泻病毒S基因的研究进展 | 第14-15页 |
| ·猪流行性腹泻病毒M基因的研究进展 | 第15-16页 |
| ·猪流行性腹泻病毒ORF3基因的研究进展 | 第16-17页 |
| ·猪流行性腹泻诊断方法研究概况 | 第17-20页 |
| 2 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·病料 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-22页 |
| ·所需主要实验器材 | 第22页 |
| ·主要溶液及缓冲液的配制 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·引物的设计与合成 | 第22-23页 |
| ·样品处理 | 第23页 |
| ·总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·反转录合成cDNA | 第24-25页 |
| ·PCR扩增反应体系及反应条件 | 第25-26页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第26页 |
| ·PCR产物与pMD18-T载体的连接 | 第26-27页 |
| ·感受态的制备(氯化钙法) | 第27页 |
| ·转化 | 第27-28页 |
| ·质粒的小量制备 | 第28页 |
| ·质粒的PCR鉴定 | 第28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·序列分析 | 第28-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-48页 |
| ·S基因、M基因和ORF3基因的扩增结果 | 第32-33页 |
| ·质粒的鉴定、测序及序列拼接 | 第33页 |
| ·S基因的测序结果及分析 | 第33-40页 |
| ·S基因的分子特征分析 | 第33-34页 |
| ·S基因的同源性分析 | 第34-38页 |
| ·S基因的分子进化分析 | 第38-40页 |
| ·M基因的测序结果及分析 | 第40-44页 |
| ·M基因的分子特征分析 | 第40-42页 |
| ·M基因的同源性分析 | 第42页 |
| ·M基因的分子进化分析 | 第42-43页 |
| ·PEDV M蛋白的跨膜区分析 | 第43-44页 |
| ·ORF3基因的测序结果及分析 | 第44-48页 |
| ·ORF3基因的分子特征分析 | 第44-45页 |
| ·ORF3基因的同源性分析 | 第45-46页 |
| ·ORF3基因的分子进化分析 | 第46-47页 |
| ·PEDV ORF3蛋白的跨膜区分析 | 第47-48页 |
| 5 讨论 | 第48-51页 |
| ·PEDV S基因 | 第48-49页 |
| ·PEDV M基因 | 第49-50页 |
| ·PEDV ORF3基因 | 第50-51页 |
| 6 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 附录 | 第60-68页 |
| 附录1 | 第60-66页 |
| 附录2 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
