| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 本文所用英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-25页 |
| ·核酸适配体及 SELEX | 第11-14页 |
| ·核酸适配体性质及特点 | 第11-12页 |
| ·SELEX 原理与流程 | 第12-13页 |
| ·SELEX 靶标与类型 | 第13-14页 |
| ·肿瘤细胞核酸适配体的筛选及发展 | 第14-16页 |
| ·肿瘤细胞核酸适配体筛选优势 | 第14页 |
| ·已筛选的肿瘤核酸适配体种类 | 第14-16页 |
| ·肿瘤细胞核酸适配体在肿瘤诊治中的应用 | 第16-23页 |
| ·核酸适配体用于肿瘤标志物的发现 | 第16-17页 |
| ·核酸适配体用于肿瘤细胞的体外、体内成像 | 第17-20页 |
| ·核酸适配体在肿瘤治疗中的应用 | 第20-23页 |
| ·本论文拟开展的工作 | 第23-25页 |
| 第2章 基于 cell-SELEX 技术筛选人胆管癌细胞株 QBC-939 核酸适配体 | 第25-43页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·实验材料、仪器与方法 | 第25-32页 |
| ·实验材料与仪器 | 第25-28页 |
| ·细胞株的选择 | 第28页 |
| ·文库与引物的设计 | 第28-29页 |
| ·文库的预处理及细胞准备 | 第29页 |
| ·正筛选 | 第29页 |
| ·反筛选 | 第29-30页 |
| ·PCR 扩增 | 第30页 |
| ·ssDNA 文库的制备 | 第30-31页 |
| ·多轮筛选 | 第31页 |
| ·克隆和测序 | 第31页 |
| ·流式细胞分析 | 第31-32页 |
| ·激光共聚焦荧光成像 | 第32页 |
| ·实验结果与讨论 | 第32-42页 |
| ·PCR 条件的优化 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增筛选文库 | 第33-34页 |
| ·筛选文库富集程度的监测 | 第34-35页 |
| ·克隆测序与核酸适配体的序列分析 | 第35-39页 |
| ·流式细胞术表征核酸适配体与靶细胞的结合情况 | 第39-40页 |
| ·核酸适配体与细胞的荧光成像 | 第40-41页 |
| ·核酸适配体亲和力的测定 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第3章 核酸适配体优化及不同核酸适配体对细胞表面结合位点的考察 | 第43-55页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料、仪器与方法 | 第43-46页 |
| ·实验材料与仪器 | 第43-44页 |
| ·流式细胞分析 | 第44-45页 |
| ·激光共聚焦荧光成像 | 第45-46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-54页 |
| ·核酸适配体序列的优化与结果分析 | 第46-49页 |
| ·核酸适配体序列亲和力的测定 | 第49-50页 |
| ·核酸适配体序列特异性的考察 | 第50-51页 |
| ·温度对核酸适配体与靶细胞结合能力的影响 | 第51-52页 |
| ·酶对核酸适配体与靶细胞结合能力的影响 | 第52-53页 |
| ·不同核酸适配体与靶细胞结合位点的分析 | 第53-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 附录 A 攻读学位期间所发表的学术论文及专利 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |