| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| ·根瘤菌与豆科植物 | 第12页 |
| ·根瘤的发育过程 | 第12-13页 |
| ·结瘤机制和共生固氮机制 | 第13-18页 |
| ·结瘤机制 | 第13-14页 |
| ·共生固氮机制 | 第14-15页 |
| ·共生固氮效率与固氮量 | 第15页 |
| ·影响共生固氮的环境因素 | 第15-17页 |
| ·乙炔还原法测固氮作用 | 第17-18页 |
| ·根瘤菌的系统发育与分类 | 第18-20页 |
| ·传统分类 | 第19页 |
| ·现代分类 | 第19-20页 |
| ·根瘤菌在污染修复中的作用 | 第20-22页 |
| ·根瘤菌在保持水土及改良土壤中起着重要作用 | 第20-21页 |
| ·根瘤菌修复有机污染的土壤 | 第21-22页 |
| ·根瘤菌对重金属污染的修复作用 | 第22页 |
| ·根瘤菌-豆科植物共生体研究的意义 | 第22-23页 |
| ·根瘤菌与胞外多糖 | 第23-26页 |
| ·根瘤菌多糖的种类和作用 | 第23页 |
| ·根瘤菌胞外多糖的国内研究进展 | 第23-24页 |
| ·根瘤菌胞外多糖的国外研究进展 | 第24-26页 |
| ·本研究课题的目的 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-42页 |
| ·菌株与质粒 | 第27-28页 |
| ·本研究中所用到的引物 | 第28页 |
| ·本研究所用培养基 | 第28-30页 |
| ·培养大肠杆菌用的培养基 | 第28-29页 |
| ·培养根瘤菌使用的培养基 | 第29页 |
| ·菌株的培养以及保藏 | 第29-30页 |
| ·本研究中用到的抗生素 | 第30页 |
| ·所用缓冲液、溶液 | 第30-31页 |
| ·所用实验耗材和植株材料 | 第31-32页 |
| ·总DNA的提取 | 第32页 |
| ·提取质粒(碱裂法) | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·纯化DNA | 第33-34页 |
| ·限制性内切酶消化DNA | 第34页 |
| ·DNA酶切片段回收 | 第34-35页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第35-36页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·模板的制备 | 第35页 |
| ·PCR反应体系、条件 | 第35-36页 |
| ·DNA连接 | 第36-37页 |
| ·DNA转化 | 第37-38页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第37页 |
| ·化学转化 | 第37-38页 |
| ·三亲本接合 | 第38-39页 |
| ·根瘤菌生长情况测定 | 第39页 |
| ·在TY培养基上的生长曲线 | 第39页 |
| ·在含盐培养基上的生长曲线 | 第39页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第39-40页 |
| ·YMA平板检测 | 第39-40页 |
| ·摇瓶发酵检测 | 第40页 |
| ·细菌运动性检测 | 第40页 |
| ·植株试验 | 第40-41页 |
| ·乙炔还原法测固氮酶活 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-64页 |
| ·exoR、exoD基因生物信息学 | 第42-45页 |
| ·exoR、exoD基因的多重序列比对 | 第42-43页 |
| ·exoR基因的结构域分析 | 第43-44页 |
| ·exoD基因的结构域分析 | 第44-45页 |
| ·exoR、exoD基因克隆 | 第45-49页 |
| ·WGF03基因组DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·基因全长以及左右臂片段的扩增 | 第46-47页 |
| ·连接与转化 | 第47-49页 |
| ·exoR、exoD基因突变体的构建 | 第49-52页 |
| ·exoR、exoD基因突变体的筛选 | 第50-51页 |
| ·突变体的PCR验证 | 第51-52页 |
| ·exoR、exoD突变体的功能互补 | 第52-56页 |
| ·互补片段的扩增 | 第53-54页 |
| ·互补片段克隆至pLAFR6载体上 | 第54-55页 |
| ·互补菌株的筛选与验证 | 第55-56页 |
| ·△exoR、△exoD突变体的基本培养特性 | 第56-59页 |
| ·△exoR、△exoD突变体在固体培养基上的生长情况 | 第56-57页 |
| ·AexoR、AexoD突变体在TY液体培养基上的生长曲线测定 | 第57-59页 |
| ·△exoR、△exoD的运动性检测 | 第59页 |
| ·△exoR、△exoD突变体的耐盐研究 | 第59-61页 |
| ·植株实验 | 第61-64页 |
| ·exoR、exoD突变体结瘤时间测定 | 第61-62页 |
| ·突变体结瘤情况 | 第62-63页 |
| ·乙炔还原法测定突变体的固氮酶活 | 第63-64页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第64-67页 |
| ·总结 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第76页 |