| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-26页 |
| 第一章 哺乳动物传统核移植研究进展 | 第14-26页 |
| 1、传统核移植研究进展 | 第14-15页 |
| ·核移植的供体类型 | 第14-15页 |
| ·异种核移植的研究 | 第15页 |
| 2、表观遗传重编程在克隆中的研究 | 第15-19页 |
| ·X-染色体失活 | 第15-16页 |
| ·端粒长度的调整 | 第16-17页 |
| ·印记基因的表达 | 第17页 |
| ·DNA甲基化 | 第17-18页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第18-19页 |
| 3、体细胞核移植的应用前景及存在的问题 | 第19-22页 |
| ·体细胞核移植的应用前景 | 第19-21页 |
| ·体细胞核移植存在的问题 | 第21-22页 |
| 4、手工克隆技术研究进展 | 第22-23页 |
| 5、手工克隆技术的应用前景及存在的问题 | 第23页 |
| 6、组蛋白去乙酰化酶抑制剂VPA的应用 | 第23-25页 |
| ·VPA在核移植重编程中的应用 | 第24页 |
| ·VPA在抗肿瘤中的应用 | 第24-25页 |
| 7、研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-61页 |
| 第二章 手工克隆(HMC)猪胚胎体系的优化 | 第26-35页 |
| 摘要 | 第26页 |
| 1、材料与方法 | 第26-31页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-30页 |
| ·试验设计 | 第30页 |
| ·数据统计 | 第30-31页 |
| 2、结果与分析 | 第31-32页 |
| ·DC处理结合蛋白酶消化后恢复时间对去核率的影响 | 第31页 |
| ·不同粘合方法对融合效率的影响 | 第31-32页 |
| ·HMC技术优化前后胚胎发育效果的比较 | 第32页 |
| 3、讨论 | 第32-34页 |
| ·DC处理结合链酶蛋白酶消化后恢复时间对卵母细胞去核率的影响 | 第32-33页 |
| ·半卵粘合方法及电激参数对融合效率的影响 | 第33-34页 |
| 4、结论 | 第34-35页 |
| 第三章 丙戊酸处理对不同类型供体细胞猪HMC胚胎发育效果的影响 | 第35-45页 |
| 摘要 | 第35页 |
| 1、材料与方法 | 第35-38页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·试验设计 | 第38页 |
| ·数据统计 | 第38页 |
| 2、结果与分析 | 第38-43页 |
| ·不同浓度VPA处理GC为供体的猪HMC重构胚24h对其发育效果的影响 | 第38-40页 |
| ·不同浓度VPA处理PFF为供体的猪HMC重构胚24h对其发育效果的影响 | 第40-41页 |
| ·不同浓度VPA处理Tr-PFF为供体猪HMC重构胚24h对其发育效果的影响 | 第41-43页 |
| 3、讨论 | 第43-44页 |
| 4、结论 | 第44-45页 |
| 第四章丙戊酸处理对HMC猪重构胚的组蛋白H3K14乙醜化水平的影响 | 第45-52页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 1、材料与方法 | 第45-47页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-47页 |
| ·试验设计 | 第47页 |
| ·数据统计 | 第47页 |
| 2、结果与分析 | 第47-50页 |
| ·免疫荧光染色的最佳条件 | 第47-48页 |
| ·不同来源胚胎不同发育阶段的组蛋白乙酰化水平的比较 | 第48-50页 |
| 3、讨论 | 第50-51页 |
| 4、结论 | 第51-52页 |
| 第五章 丙戊酸处理对HMC猪重构胚的发育相关基因表达水平的影响 | 第52-61页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1、材料与方法 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-54页 |
| ·试验设计 | 第54页 |
| ·数据统计 | 第54-55页 |
| 2、结果与分析 | 第55-59页 |
| ·乙酰化相关基因HAT1,HDAC2 mRNA在PA,HMC,HMC-V胚胎中的表达情况 | 第55-57页 |
| ·多能性相关基因OCT4,NANOG mRNA在PA,HMC,HMC-V胚胎的中的表达情况 | 第57-59页 |
| 3、讨论 | 第59-60页 |
| 4、结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 图片与说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读硕士期间发表学术论文 | 第69页 |
