| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 1. 前言 | 第12-26页 |
| ·国内外橡胶树选育种现状 | 第12-13页 |
| ·茉莉酸信号途径研究进展 | 第13-22页 |
| ·茉莉酸的生物合成及生理功能 | 第13-14页 |
| ·COI1-JAZ-MYC2是茉莉酸信号途径的核心组件 | 第14-22页 |
| ·JAZ家族的转录机制研究进展 | 第22-25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 2. 材料与方法 | 第26-59页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·质粒与菌种 | 第26-27页 |
| ·酵母培养用培养基 | 第27页 |
| ·其他试剂 | 第27页 |
| ·茉莉酸信号途径关键环节相关的MYC与JAZ家族基因的表达与产量的相关性分析 | 第27-32页 |
| ·材料的选取 | 第27页 |
| ·胶乳总RNA的提取 | 第27-29页 |
| ·基因组DNA的去除和cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30-32页 |
| ·HbJAZ1-HbJAZ7基因转录因子的鉴定 | 第32-50页 |
| ·HbJAZ1-HbJAZ7基因启动子Bait质粒的构建 | 第32-41页 |
| ·HbJAZ1-HbJAZ7基因启动子Bait菌株的构建 | 第41-44页 |
| ·酵母单杂交cDNA文库的构建 | 第44-47页 |
| ·Bait菌株与cDNA文库质粒的大规模杂交 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆的确定与互作分析 | 第48-50页 |
| ·点对点酵母单杂交鉴定HbJAZ基因的MYC转录因子 | 第50-55页 |
| ·热研7-33-97胶乳总RNA的提取 | 第50页 |
| ·基因组DNA的去除和cDNA第一链的合成 | 第50页 |
| ·Prey质粒的构建 | 第50-54页 |
| ·点对点酵母单杂交鉴定HbJAZ1、HbJAZ2和HbJAZ5的MYC转录因子 | 第54-55页 |
| ·橡胶树HbJAZ3突变体蛋白的原核表达及纯化 | 第55-59页 |
| ·引物设计 | 第55-56页 |
| ·HbJAZ3基因CDS的扩增 | 第56页 |
| ·HbJAZ3基因CDS结构域缺失片段的扩增 | 第56页 |
| ·加“A”反应 | 第56-57页 |
| ·目的片段的克隆与重组子的鉴定 | 第57页 |
| ·pet28a(+)-JAZ3,pet28a(+)-JAZ3-ZIM-mut,pet28a(+)-JAZ3-Jas-mut原核表达载体的构建 | 第57-58页 |
| ·JAZ3、JAZ3-Jas-mut及JAZ3-ZIM-mut原核表达菌株的构建 | 第58页 |
| ·原核表达蛋白的纯化 | 第58-59页 |
| 3. 结果与分析 | 第59-77页 |
| ·茉莉酸信号途径关键环节基因的表达分析 | 第59-63页 |
| ·RNA质量检测 | 第59页 |
| ·引物特异性检测及其扩增效率 | 第59-60页 |
| ·胶乳中的HbJAZ2,HbJAZ3,HblMYC1,HblMYC3 4个基因在成龄高产品种和低产种质中的定量表达分析 | 第60-61页 |
| ·胶乳中的HbJAZ2,HbJAZ3,HblMYC1,HblMYC3 4个基因在成龄高产品种和幼树高产品种的定量表达分析 | 第61-62页 |
| ·胶乳中的HblMYC1,HblMYC3 2个基因在橡胶树杂交后代的定量表达分析 | 第62-63页 |
| ·HbJAZ1,HbJAZ2和HbJAZ5基因转录因子的鉴定 | 第63-71页 |
| ·橡胶树基因组DNA的提取 | 第63-64页 |
| ·Bait质粒与Bait菌株的构建 | 第64-65页 |
| ·Bait菌株AbA本底浓度的确定 | 第65-66页 |
| ·cDNA文库的构建 | 第66-67页 |
| ·利用酵母单杂交筛选cDNA文库及阳性克隆的复筛 | 第67-69页 |
| ·阳性克隆序列分析 | 第69-71页 |
| ·点对点酵母单杂交鉴定HbJAZ1,HbJAZ2和HbJAZ5基因的MYC转录因子 | 第71-73页 |
| ·橡胶树HbJAZ3突变体蛋白的原核表达及纯化 | 第73-77页 |
| ·HbJAZ3基因编码序列CDS及结构域缺失片段的扩增 | 第73-74页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第74-75页 |
| ·原核表达蛋白的鉴定及纯化 | 第75-77页 |
| 4. 讨论 | 第77-79页 |
| ·茉莉酸信号途径关键环节基因与胶乳产量相关性 | 第77页 |
| ·巴西橡胶树乳管细胞中茉莉酸信号途径关键环节JAZ基因家族具有多种转录因子 | 第77-78页 |
| ·HbJAZ3及其突变体蛋白原核表达实验系统的建立为进一步鉴定乳管细胞茉莉酸信号途径的关键环节打下了良好的基础 | 第78-79页 |
| 5. 结论 | 第79页 |
| 6. 创新之处 | 第79页 |
| 7. 后续研究 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 附录 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
