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川牛膝多糖对小鼠免疫反应的影响及机理研究

摘要第1-18页
ABSTRACT第18-23页
缩略词表第23-24页
第一章 研究背景第24-60页
 第一节 川产道地药材免疫调节作用的研究进展第24-32页
  1 川牛膝的免疫调节作用第24-25页
   ·对体液免疫的影响第24页
   ·对细胞免疫的影响第24-25页
   ·对红细胞免疫的影响第25页
   ·对机体免疫低下的保护作用第25页
  2 杜仲的免疫调节作用第25-26页
   ·对体液免疫的影响第25-26页
   ·对细胞免疫的影响第26页
   ·对免疫器官的影响第26页
  3 川明参的免疫调节作用第26-27页
   ·对体液免疫的影响第26-27页
   ·对细胞免疫的影响第27页
  4 川麦冬免疫调节作用第27-28页
   ·对细胞免疫的影响第27页
   ·对免疫器官的影响第27页
   ·对免疫低下的保护作用第27-28页
   ·对过敏反应的影响第28页
  5 川续断免疫调节作用第28-29页
   ·对细胞免疫的影响第28页
   ·对免疫低下的保护作用第28-29页
  6 丹参的免疫调节作用第29-30页
   ·对细胞免疫的影响第29页
   ·对红细胞免疫的影响第29页
   ·对免疫器官的影响第29页
   ·对细胞因子的影响第29-30页
   ·对机体免疫低下的保护作用第30页
  7 川泽泻的免疫调作用第30页
  8 川芎的免疫调节作用第30-31页
  9 川白芷免疫调节作用第31页
  10 川佛手的免疫调节作用第31-32页
 第二节 中药多糖免疫调节作用的研究进展第32-41页
  1 中药多糖的免疫调节作用第32-36页
   ·对体液免疫的影响第32页
   ·对细胞免疫的影响第32-33页
   ·对细胞因子的影响第33-34页
   ·对红细胞免疫的影响第34-35页
   ·对细胞毒淋巴细胞(NK,CTL)杀伤活性的影响第35页
   ·对单核吞噬细胞系统的影响第35-36页
  2 中药多糖免疫调节作用的途径第36-41页
   ·通过促进树突细胞成熟和迁移途径激活机体免疫反应第36-39页
     ·树突细胞的来源及其在免疫反应中的作用第36-37页
     ·树突细胞的迁移在免疫反应中的作用第37-38页
     ·树突细胞的成熟在免疫反应中的作用第38-39页
   ·通过Toll样受体通路激活免疫反应第39-40页
     ·Toll样受体在机体免疫反应中的作用第39页
     ·免疫增强剂对Toll样受体的调节第39-40页
   ·通过CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞发挥调节作用第40-41页
     ·调节性Treg细胞在机体免疫反应中的作用第40页
     ·免疫增强剂对Treg细胞的调节作用第40-41页
 第三节 中药川牛膝的研究进展第41-46页
  1 川牛膝的本草考证第41-42页
  2 栽培、加工炮制与品质研究第42-43页
  3 药理作用第43-46页
   ·对血液循环系统的影响第43页
   ·对机体免疫功能的影响第43-44页
   ·对泌尿生殖系统的影响第44-45页
   ·抗肿瘤作用第45页
   ·抗病毒作用第45页
   ·抗衰老作用第45页
   ·抗炎作用第45-46页
   ·补益作用第46页
  4 临床应用概况第46页
 第四节 立题依据、研究内容、技术路线与方法第46-49页
  1 立题依据第46-47页
  2 研究内容、技术路线与方法第47-49页
   ·研究内容第47-48页
   ·技术路线第48-49页
   ·方法第49页
 参考文献第49-60页
第二章 十种川产道地药材水提物对小鼠注射卵清白蛋白(OVA)免疫反应的影响第60-67页
 1 材料第60-62页
   ·主要试剂第60-62页
     ·试验用中药第60页
     ·免疫试剂第60页
     ·ELISA主要试剂第60-62页
   ·主要仪器第62页
   ·试验动物第62页
 2 方法第62-65页
   ·中药水提物的制备第62页
   ·动物分组和免疫程序第62-63页
   ·血样采集第63-64页
   ·OVA特异性IgG水平的检测第64页
   ·OVA特异性IgG亚类水平的检测第64-65页
   ·统计学分析第65页
 3 结果第65-66页
   ·十种中药水提物对血清中OVA特异性IgG抗体水平的影响第65页
   ·三种中药水提物对血清中OVA特异性抗体亚类IgG1、IgG2a、IgG2b水平的影响第65-66页
 4 讨论第66页
 5 小结第66-67页
第三章 不同剂量川牛膝水提物对小鼠注射卵清白蛋白(OVA)免疫反应的影响第67-78页
 1 材料第67-68页
   ·主要试剂第67-68页
     ·动物免疫试剂第67页
     ·中药第67页
     ·ELISA所用试剂第67页
     ·T淋巴细胞增殖所用试剂第67-68页
     ·细胞因子检测所用试剂第68页
   ·主要仪器第68页
   ·试验动物第68页
 2 方法第68-71页
   ·川牛膝水提物的制备第68页
   ·动物分组和免疫程序第68-69页
   ·血样采集第69页
   ·内毒素检测第69页
   ·OVA特异性IgG水平的检测第69页
   ·OVA特异性抗体亚类(IgG1、IgG2a和IgG2b)水平的检测第69页
   ·T淋巴细胞增殖能力检测第69-70页
   ·淋巴细胞培养上清液中细胞因子浓度的检测第70-71页
   ·统计学分析第71页
 3 结果第71-75页
   ·RC对血清OVA特异性IgG抗体水平的影响第71-72页
   ·RC对血清OVA特异性抗体亚类IgG1,IgG2a,IgG2b水平的影响第72页
   ·RC对T淋巴细胞增殖能力的影响第72-73页
   ·RC对脾淋巴细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ含量的影响第73-74页
   ·RC对小鼠体重的影响第74-75页
 4 讨论第75-76页
   ·RC对OVA受免小鼠体液免疫反应的影响第75页
   ·RC对OVA受免小鼠细胞因子的影响第75-76页
   ·RC对OVA受免小鼠细胞免疫反应的影响第76页
   ·RC对小鼠的安全性第76页
 5 小结第76页
 参考文献第76-78页
第四章 川牛膝多糖体外免疫活性研究第78-90页
 1 材料第78-80页
   ·主要试剂与药品第78-80页
     ·川牛膝多糖第78页
     ·测定淋巴细胞最大安全浓度所用试剂第78-79页
     ·淋巴细胞增殖所用试剂第79页
     ·细胞因子检测所用试剂第79页
     ·NK细胞杀伤试验染色主要试剂第79-80页
   ·主要仪器第80页
   ·试验动物第80页
 2 方法第80-84页
   ·对脾淋巴细胞最大安全浓度测定第80页
   ·淋巴细胞增殖能力检测第80-81页
   ·脾淋巴细胞培养上清液中细胞因子浓度的检测第81-82页
   ·NK细胞杀伤活力检测第82-84页
     ·效应细胞的制备第82页
     ·K562细胞的复苏及培养第82页
     ·细胞的传代与培养第82-83页
     ·细胞计数和细胞活力第83页
     ·靶细胞(K562)染色第83页
     ·NK细胞杀伤活力检测第83-84页
   ·统计学分析第84页
 3 结果第84-87页
   ·RCPS对脾淋巴细胞最大无毒浓度的测定第84-85页
   ·RCPS体外对淋巴细胞增殖的影响第85页
   ·RCPS体外对脾淋巴细胞分泌细胞因子能力的影响第85-86页
   ·RCPS在体外对NK细胞杀伤活性的影响第86-87页
 4 讨论第87-88页
   ·RCPS在体外对淋巴细胞的毒性第87-88页
   ·RCPS在体外对淋巴细胞增值能力的影响第88页
   ·RCPS在体外对淋巴细胞分泌细胞因子的影响第88页
   ·RCPS在体外对NK细胞杀伤活性的影响第88页
 5 小结第88-89页
 参考文献第89-90页
第五章 川牛膝多糖对小鼠注射卵清白蛋白(OVA)免疫反应的影响及机理研究第90-120页
 1 材料第90-92页
   ·主要试剂第90-92页
     ·动物免疫试剂第90页
     ·川牛膝多糖第90-91页
     ·ELISA所用试剂第91页
     ·T淋巴细胞增殖所用试剂第91页
     ·胞内细胞因子及表面分子荧光染色试剂第91页
     ·体内CTL染色主要试剂第91页
     ·NK细胞杀伤试验所用试剂第91页
     ·腹腔巨噬细胞吞噬试验主要试剂第91-92页
     ·内毒素检测所用试剂第92页
   ·主要仪器第92页
   ·试验动物第92页
 2 方法第92-96页
   ·动物分组及免疫第92-93页
   ·血样采集第93页
   ·内毒素检测第93页
   ·OVA特异性IgG水平的检测第93页
   ·OVA特异性抗体亚类(IgG1、IgG2a和IgG2b)水平的检测第93页
   ·T淋巴细胞增殖能力检测第93页
   ·脾淋巴细胞培养上清液中细胞因子浓度的检测第93页
   ·胞内细胞因子染色及检测第93-94页
   ·体内CTL杀伤能力检测第94-95页
     ·靶细胞的制备第94页
     ·小鼠体内CTL杀伤活性检测第94-95页
   ·NK细胞杀伤能力检测第95页
   ·腹腔巨噬细胞吞噬活性检测第95页
   ·共刺激信号分子(CD40、CD80、CD86)的表达水平的检测第95-96页
   ·CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的表达水平的检测第96页
   ·统计学分析第96页
 3 结果第96-113页
   ·RCPS对血清特异性IgG抗体水平的影响第96页
   ·RCPS对血清特异性抗体亚类IgG1,IgG2a,IgG2b水平的影响第96-97页
   ·RCPS对T淋巴细胞增殖能力的影响第97-98页
   ·RCPS对脾淋巴细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ含量的影响第98-99页
   ·RCPS对胞内细胞因子表达水平的影响第99-105页
     ·CD4~+T细胞IL-2表达水平第99页
     ·CD4~+T细胞IL-4表达水平第99-100页
     ·CD4~+T细胞IFN-γ表达水平第100页
     ·CD8~+T细胞IFN-γ表达水平第100-105页
   ·RCPS对CTL体内杀伤能力的影响第105页
   ·RCPS对NK杀伤能力的影响第105-106页
   ·RCPS对腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响第106-107页
   ·RCPS对树突细胞共刺激信号分子(CD40、CD80、CD86)表达水平的影响第107-108页
     ·共刺激信号分子CD40表达水平第107页
     ·共刺激信号分子CD80表达水平第107-108页
     ·共刺激信号分子CD86表达水平第108页
   ·RCPS对CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的表达水平的影响第108-113页
   ·RCPS对试验小鼠体重的影响第113页
 4 讨论第113-117页
   ·RCPS对OVA受免小鼠体液免疫反应的影响第113-114页
   ·RCPS对OVA受免小鼠细胞因子的影响第114页
   ·RCPS对OVA受免小鼠细胞免疫反应的影响第114-116页
     ·RCPS对OVA受免小鼠T淋巴细胞增殖能力的影响第115页
     ·RCPS对OVA受免小鼠CTL、NK细胞杀伤能力的影响第115页
     ·RCPS对OVA受免小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响第115-116页
   ·RCPS对OVA受免小鼠树突细胞(DCs)成熟的影响第116页
   ·RCPS对OVA受免小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的影响第116-117页
   ·RCPS对小鼠的安全性第117页
 5 小结第117页
 参考文献第117-120页
第六章 川牛膝多糖对小鼠注射口蹄疫疫苗免疫反应的影响及分子机制研究第120-161页
 1 材料第120-121页
   ·主要试剂第120-121页
     ·动物免疫试剂第120页
     ·川牛膝多糖第120页
     ·ELISA所用试剂第120页
     ·T淋巴细胞增殖所用试剂第120-121页
     ·细胞因子及表面分子荧光染色试剂第121页
     ·体内CTL染色主要试剂第121页
     ·NK细胞杀伤试验所用试剂第121页
     ·腹腔巨噬细胞吞噬试验所需试剂第121页
     ·Real-Time PCR试验所用试剂第121页
   ·主要仪器第121页
   ·试验动物第121页
 2 方法第121-128页
   ·动物分组及免疫第121-122页
   ·血样采集第122页
   ·FMDV特异性IgG水平的检测第122-123页
   ·FMDV特异性抗体亚类(IgG1、IgG2a和IgG2b)水平的检测第123页
   ·T细胞增殖能力检测第123-124页
   ·胞内细胞因子染色及检测第124页
   ·体内CTL杀伤能力检测第124页
     ·靶细胞的制备第124页
     ·小鼠体内CTL杀伤活性检测第124页
   ·NK细胞杀伤能力检测第124页
   ·腹腔巨噬细胞吞噬试验第124页
   ·Real-Time PCR检测细胞因子及信号通路分子第124-128页
     ·总RNA的提取第124-125页
     ·cDNA第一链的合成第125-126页
     ·PCR引物的设计第126页
     ·Real-time PCR反应体系及反应程序第126-128页
   ·共刺激信号分子(CD40、CD80、CD86)的检测第128页
   ·CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的检测第128页
   ·统计学分析第128页
 3 结果第128-150页
   ·RCPS对血清FMDV特异性IgG抗体水平的影响第128页
   ·RCPS对血清FMDV特异性抗体亚类(IgG1,IgG2a,IgG2b)水平的影响第128-130页
   ·RCPS对T淋巴细胞增殖能力的影响第130页
   ·RCPS对胞内细胞因子表达水平的影响第130-136页
     ·CD4~+T细胞IL-2表达水平第130-131页
     ·CD4~+T细胞IL-4表达水平第131页
     ·CD4~+T细胞IFN-γ表达水平第131页
     ·CD8~+T细胞IFN-γ表达水平第131-136页
   ·RCPS对CTL体内杀伤能力的影响第136-137页
   ·RCPS对NK体内杀伤能力的影响第137页
   ·RCPS对腹腔巨噬细胞的吞噬活性的影响第137-138页
   ·RCPS对DCs共刺激信号分子(CD40、CD80、CD86)的表达水平的影响第138-143页
     ·共刺激信号分子CD40表达水平第138页
     ·共刺激信号分子CD80表达水平第138-139页
     ·共刺激信号分子CD86表达水平第139-143页
   ·RCPS对树突细胞MHC Ⅰ、MHC Ⅱ mRNA表达水平的影响第143页
   ·RCPS对DC趋化因子受体CXCR4、CCR7 mRNA表达水平的影响第143-144页
   ·RCPS对脾淋巴细胞中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的mRNA表达水平第144-145页
   ·RCPS对脾淋巴细胞中转录因子T-bet和GATA-3的mRNA表达水平的影响第145-146页
   ·RCPS对脾淋巴细胞中TLR-2、TLR-4 mRNA表达水平的影响第146-147页
   ·RCPS对脾淋巴细胞中TGF-β mRNA表达水平的影响第147-148页
   ·RCPS对CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞表达水平的影响第148-150页
   ·RCPS对试验小鼠体重的影响第150页
 4 讨论第150-157页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠体液免疫反应的影响第150-151页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠细胞因子的产生和初始T细胞分化的影响第151-152页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠细胞免疫反应的影响第152-153页
     ·RCPS对FMDV受免小鼠T淋巴细胞增殖能力的影响第152页
     ·RCPS对FMDV受免小鼠CTL、NK细胞杀伤能力的影响第152-153页
     ·RCPS对FMDV受免小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响第153页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠树突细胞成熟及迁移的影响第153-155页
     ·RCPS对树突细胞成熟的影响第153-154页
     ·RCPS对树突细胞迁移的影响第154-155页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠TOLL样受体(TLR-2,TLR-4)的影响第155页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠转化生长因子β(TGF-β)的影响第155-156页
   ·RCPS对FMDV受免小鼠CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞的影响第156页
   ·RCPS对小鼠的安全性第156-157页
 5 小结第157页
 参考文献第157-161页
第七章 全文结论第161-162页
本研究的创新点第162页
有待进一步研究的问题第162-163页
附录:试验的部分图片第163-170页
致谢第170-171页
攻读博士期间发表的学术论文及参加科研情况第171页

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