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胡萝卜MADS-box基因克隆与表达分析

摘要第1-12页
Abstract第12-14页
1 前言第14-24页
   ·研究的目的和意义第14页
   ·胡萝卜概述第14-15页
   ·MADS-box基因的概述第15-22页
     ·MADS-box基因的起源和分类第15-16页
     ·ABC到ABCDE模型的发展第16-18页
     ·MADS-box基因在ABCDE模型中的分类和功能第18-22页
   ·RACE技术第22-24页
     ·RACE原理第22-23页
     ·RACE植物基因克隆的应用现状和展望第23-24页
2 材料与方法第24-36页
   ·实验材料第24页
   ·实验方法第24-36页
     ·胡萝卜花芽Total RNA的提取第24-25页
     ·Total RNA的纯化第25页
     ·Total RNA的检测第25-26页
     ·3’RACE第一链cDNA的反转录合成第26页
     ·3’RACE PCR扩增第26-27页
     ·3’RACE PCR产物的回收第27-28页
     ·3’RACE连接反应第28页
     ·3’RACE连接产物的转化第28-29页
     ·3’RACE阳性克隆培养及菌液PCR鉴定第29-30页
     ·3’RACE基因测序以及序列分析第30页
     ·5’RACE第一链cDNA的反转录合成第30-31页
     ·纯化RT产物第31页
     ·TdT加尾第31页
     ·5’RACE PCR扩增第31-33页
     ·5’RACE PCR产物的回收第33页
     ·5’RACE连接反应第33页
     ·5’RACE连接产物的转化第33页
     ·5’RACE克隆培养及菌液PCR鉴定第33页
     ·DcSEP1和DcAGL6 5’RACE基因测序以及全长分析第33页
     ·半定量RT-PCR第33-35页
     ·荧光定量PCR第35-36页
3 结果与分析第36-58页
   ·胡萝卜MADS-box基因DcAP1的结果与分析第36-43页
     ·RNA检测结果第36页
     ·3’端cDNA的检测结果第36-37页
     ·3’RACE PCR扩增结果第37页
     ·3’RACE菌液检测结果第37页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcAP1的序列分析第37-39页
     ·DcAP1基因的同源性比对及系统进化树分析第39-41页
     ·半定量RT-PCR结果分析第41-42页
     ·Realtime荧光定量PCR结果分析第42-43页
   ·胡萝卜MADS-box基因DcSEP1的结果与分析第43-50页
     ·RNA检测结果第43页
     ·3’端cDNA检测结果第43页
     ·3’RACE PCR扩增结果第43页
     ·3’RACE菌液检测结果第43页
     ·5’端cDNA检测结果第43页
     ·5’RACE PCR扩增结果第43-44页
     ·5’RACE菌液检测第44页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcSEP1的序列分析第44-46页
     ·DcSEP1基因的同源性比对及系统进化树分析第46-48页
     ·半定量RT-PCR结果分析第48-49页
     ·Realtime荧光定量PCR第49-50页
   ·胡萝卜MADS-box基因DcAGL6的结果与分析第50-58页
     ·RNA检测结果第50页
     ·3’端cDNA检测结果第50页
     ·3’RACE PCR扩增结果第50页
     ·3’RACE菌液检测结果第50页
     ·5’端cDNA检测结果第50-51页
     ·5’RACE PCR扩增结果第51页
     ·5’RACE菌液检测第51页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcAGL6的序列分析第51-53页
     ·DcAGL6基因的同源性比对及系统进化树分析第53-55页
     ·半定量RT-PCR结果分析第55-56页
     ·Realtime荧光定量PCR第56-58页
4 讨论第58-61页
   ·RACE技术第58-59页
     ·TDT加尾法第58页
     ·引物设计第58页
     ·cDNA的合成第58-59页
     ·对于MADS-box基因家族研究的局限性第59页
   ·胡萝卜MADS-box基因第59-60页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcAP1第59页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcSEP1第59-60页
     ·胡萝卜MADS-box基因DcAGL6第60页
   ·对于实验的展望第60-61页
5 结论第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-71页
附录第71-73页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第73页

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