| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| ·研究目的和意义 | 第11-12页 |
| ·文献综述 | 第12-24页 |
| ·植物脂肪酸的重要性 | 第12-15页 |
| ·FAD2基因的研究进展 | 第15-18页 |
| ·子房注射法的研究进展 | 第18-20页 |
| ·南瓜育种的研究进展 | 第20-24页 |
| ·本实验研究内容 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-32页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·子房注射法将FAD2转化南瓜 | 第32-34页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·试验方法 | 第32-34页 |
| ·抗性苗的筛选及分子生物学鉴定 | 第34-39页 |
| ·转化株的筛选 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的分子生物学鉴定 | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·植物表达载体构建 | 第39-44页 |
| ·FAD2基因和NAPIN基因的PCR扩增 | 第39页 |
| ·目的基因与pMD19-T simple vector的连接 | 第39页 |
| ·重组子的鉴定 | 第39-40页 |
| ·目的基因序列的测定和验证 | 第40-43页 |
| ·重组子pCMBIA2300-FAD2的双酶切验证 | 第43页 |
| ·重组子pCMBIA2300-NAPIN-FAD2的双酶切验证 | 第43-44页 |
| ·子房注射法将FAD2转化南瓜 | 第44-45页 |
| ·种子收获和结果率统计 | 第44页 |
| ·注射时间的确定 | 第44-45页 |
| ·抗性苗的筛选及分子生物学鉴定 | 第45-49页 |
| ·最佳抗生素筛选浓度的确定 | 第45-46页 |
| ·T_0代植株的抗性筛选 | 第46页 |
| ·抗性植株的PCR鉴定 | 第46-47页 |
| ·PCR阳性植株的PCR-Southern检测 | 第47页 |
| ·PCR鉴定T1代转基因植株 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·目的基因的选择 | 第49页 |
| ·子房注射法在转基因南瓜上的应用 | 第49-50页 |
| ·子房注射法转化时间的确定 | 第50-51页 |
| ·今后研究方向与展望 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
