| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-43页 |
| ·植物脂肪酸代谢 | 第14-24页 |
| ·植物脂肪酸的生物合成 | 第14-17页 |
| ·植物脂类的生物合成 | 第17-24页 |
| ·植物膜脂的合成 | 第18-19页 |
| ·植物油脂的合成 | 第19-24页 |
| ·Kennedy途径 | 第20-23页 |
| ·酰基编辑 | 第23-24页 |
| ·磷脂酰胆碱与溶血磷脂酰胆碱 | 第24-31页 |
| ·磷脂酰胆碱 | 第24-28页 |
| ·磷脂酰胆碱的理化性质 | 第24-25页 |
| ·磷脂酰胆碱的生物合成 | 第25-26页 |
| ·磷脂酰胆碱的生理功能 | 第26-28页 |
| ·溶血磷脂酰胆碱 | 第28-30页 |
| ·溶血磷脂酰胆碱及代谢 | 第28-29页 |
| ·溶血磷脂酰胆碱的生物学效应 | 第29-30页 |
| ·血小板活化因子和溶血血小板活化因子 | 第30-31页 |
| ·溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶及其研究进展 | 第31-37页 |
| ·Lands cycle | 第31-32页 |
| ·LPCAT的功能 | 第32-34页 |
| ·已克隆LPCAT的研究进展 | 第34-37页 |
| ·酵母LPCAT | 第34-35页 |
| ·动物LPCAT | 第35-37页 |
| ·植物LPCAT | 第37页 |
| ·转基因技术在植物油脂改良上的应用 | 第37-41页 |
| ·促进脂肪酸合成 | 第37-38页 |
| ·过量表达Kennedy途径中的关键酶 | 第38-39页 |
| ·调控碳代谢的其他途径 | 第39-40页 |
| ·转录调控植物油脂积累 | 第40-41页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第41-43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-56页 |
| ·实验材料和试剂 | 第43页 |
| ·cDNA文库构建 | 第43-47页 |
| ·酵母表达载体构建 | 第43-44页 |
| ·RNA和mRNA的提取和纯化 | 第44-45页 |
| ·cDNA合成 | 第45页 |
| ·SfiI酶切双链cDNA和cDNA片段分级 | 第45-46页 |
| ·连接和转化 | 第46-47页 |
| ·文库滴度测定和扩增 | 第47页 |
| ·文库质粒插入片段检测 | 第47页 |
| ·LPCAT基因筛选 | 第47-49页 |
| ·高效酵母转化 | 第47-48页 |
| ·lyso-PAF筛选 | 第48页 |
| ·酵母中质粒的提取和测序 | 第48-49页 |
| ·测序结果分析 | 第49页 |
| ·BnLPCAT蛋白序列比对和进化分析 | 第49页 |
| ·基因表达载体构建 | 第49-50页 |
| ·Lyso-PAF敏感实验 | 第50-51页 |
| ·酶活性分析 | 第51-54页 |
| ·微粒体分离 | 第51-52页 |
| ·检测微粒体的蛋白质浓度 | 第52页 |
| ·酶促反应分析的一般步骤 | 第52-53页 |
| ·酶促反应最适酶量测定 | 第53页 |
| ·酶促反应最适时间测定 | 第53页 |
| ·最适酰基辅酶A浓度测定 | 第53-54页 |
| ·最适溶血磷脂浓度测定 | 第54页 |
| ·酶对不同溶血磷脂的偏爱性分析 | 第54页 |
| ·酶对不同脂酰辅酶A的偏爱性分析 | 第54页 |
| ·定量Real-time RT-PCR | 第54-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-77页 |
| ·通过互补酵母lca1△筛选拟南芥LPCAT基因 | 第56-59页 |
| ·通过互补酵母lca1A筛选油菜LPCAT基因 | 第59-67页 |
| ·油菜种子cDNA酵母表达文库的构建 | 第59-61页 |
| ·油菜LPCAT基因的筛选 | 第61-67页 |
| ·BnLPCAT蛋白序列及进化分析 | 第67-70页 |
| ·BnLPCAT蛋白的酶活性分析 | 第70-75页 |
| ·lyso-PAF敏感实验 | 第70-71页 |
| ·蛋白浓度测定和酶促反应标准化 | 第71-73页 |
| ·底物偏爱性分析 | 第73-75页 |
| ·BnLPCAT基因的组织特异性表达分析 | 第75-77页 |
| 4 讨论 | 第77-83页 |
| ·利用lyso-PAF作选择试剂的酵母转化体系的优化 | 第77-78页 |
| ·AtLPLAT1和AtLPLAT2是拟南芥中仅有的能互补lca1△的LPLAT基因 | 第78页 |
| ·通过异源互补筛选到油菜中的3个LPCAT基因 | 第78-79页 |
| ·BnLPCAT1-1和BnLPCAT2的蛋白活性分析 | 第79-80页 |
| ·BnLPCAT1-1和BnLPCAT2的表达差异显著 | 第80-81页 |
| ·异源互补酵母lca1△突变体筛选LPCAT基因的局限性探讨 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-100页 |
| 附录 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |
