摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略语 | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-41页 |
·苏云金芽胞杆菌研究进展 | 第13-21页 |
·苏云金芽胞杆菌简介 | 第13-14页 |
·苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白大量合成的机制 | 第14-19页 |
·cry基因的转录机制 | 第14-17页 |
·Cry蛋白合成的翻译调控 | 第17-18页 |
·Cry蛋白的翻译后调控 | 第18-19页 |
·营养成分对Cry蛋白合成的影响 | 第19-20页 |
·氮源 | 第19页 |
·碳源 | 第19-20页 |
·矿物质 | 第20页 |
·细胞代谢对Cry蛋白合成的影响 | 第20-21页 |
·小结 | 第21页 |
·蛋白质组学研究进展 | 第21-39页 |
·蛋白质组学的产生和相关概念 | 第21-22页 |
·蛋白质组学发展近况 | 第22-26页 |
·蛋白质组学技术 | 第23页 |
·生物信息学 | 第23-24页 |
·糖蛋白质组学 | 第24页 |
·细胞生物学 | 第24-25页 |
·微生物蛋白质组学 | 第25页 |
·植物蛋白质组学 | 第25页 |
·动物蛋白质组学 | 第25-26页 |
·生物医学蛋白质组学 | 第26页 |
·微生物蛋白质组学研究进展 | 第26-33页 |
·胁迫条件下的微生物蛋白质组学 | 第26-29页 |
·病原微生物蛋白质组学 | 第29-30页 |
·微生物生理的定量蛋白质组学 | 第30-31页 |
·微生物亚蛋白质组学 | 第31页 |
·基因工程微生物蛋白质组学 | 第31页 |
·发酵工程微生物蛋白质组学 | 第31-32页 |
·微生物蛋白质组学与多组学的结合 | 第32页 |
·展望 | 第32-33页 |
·芽胞杆菌蛋白质组研究进展 | 第33-39页 |
·枯草芽胞杆菌全细胞蛋白质组鉴定 | 第33-34页 |
·枯草芽胞杆菌细胞生理研究 | 第34-36页 |
·枯草芽胞杆菌对压力和饥饿的适应性 | 第36-37页 |
·蜡状芽胞杆菌群蛋白质组研究 | 第37-38页 |
·苏云金芽胞杆菌的蛋白质组研究现状 | 第38-39页 |
·小结 | 第39页 |
·课题的立题背景及研究目的 | 第39-41页 |
·立题背景 | 第39-40页 |
·研究目的 | 第40-41页 |
2 材料和方法 | 第41-60页 |
·实验材料 | 第41-47页 |
·菌株 | 第41页 |
·培养基 | 第41页 |
·主要实验仪器 | 第41-42页 |
·引物 | 第42-43页 |
·相关试剂、缓冲液的配方 | 第43-47页 |
·实验方法 | 第47-60页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520生长曲线的测定 | 第47页 |
·苏云金芽胞杆菌全细胞蛋白质提取 | 第47-48页 |
·蛋白质的定量(Bradford法) | 第48页 |
·标准法 | 第48页 |
·微量法 | 第48页 |
·蛋白质双向电泳 | 第48-51页 |
·蛋白样品上样量的选择 | 第48页 |
·第一向等点聚焦IEF | 第48-50页 |
·第二向SDS-PAGE电泳 | 第50-51页 |
·蛋白胶的染色(质谱兼容) | 第51-52页 |
·Neuhoff胶体考马斯亮蓝G-250染色法 | 第51-52页 |
·可兼容质谱分析的硝酸银染色方法 | 第52页 |
·双向电泳胶图分析流程 | 第52-53页 |
·蛋白质的胶内胰蛋白酶酶解 | 第53页 |
·蛋白质的鉴定 | 第53-54页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520总RNA的提取 | 第54-55页 |
·实时荧光定量PCR(real-time PCR) | 第55-58页 |
·RNA的定量及质量检测 | 第55-56页 |
·RNA样品中DNA的消化 | 第56页 |
·RNA的反转录PCR | 第56-57页 |
·实时荧光定量PCR反应 | 第57-58页 |
·能量代谢物质的高效液相法检测 | 第58-60页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520细胞内能量物质的提取 | 第58页 |
·YBT-1520细胞内能量物质的HPLC分离 | 第58-60页 |
3 结果与分析 | 第60-89页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520在合成培养基中的生长 | 第60-62页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520最适合成培养基的确定 | 第60页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520生长曲线的建立 | 第60-62页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520理论蛋白质图谱分析 | 第62-63页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520双向电泳图谱建立 | 第63-65页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520不同生长期蛋白质组差异分析 | 第65-71页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520生长和碳代谢相关基因表达分析 | 第71-72页 |
·YBT-1520总RNA的提取 | 第71-72页 |
·YBT-1520生长和碳代谢相关基因表达量的荧光定量PCR分析 | 第72页 |
·苏云金芽胞杆菌YBT-1520生长相关蛋白表达变化分析 | 第72-74页 |
·苏云金芽胞杆菌不同生长期代谢变化分析 | 第74-83页 |
·YBT-1520代谢相关蛋白表达变化分析 | 第74-77页 |
·碳水化合物代谢变化分析 | 第77-83页 |
·糖酵解途径 | 第78页 |
·TCA循环 | 第78-79页 |
·脂肪酸代谢和聚2-羟基丁酸(PHB)代谢分析 | 第79-80页 |
·丙酮酸的来源 | 第80页 |
·乙酰辅酶A的去向 | 第80-82页 |
·氨基酸代谢分析 | 第82-83页 |
·小结 | 第83页 |
·蛋白质组学揭示的能量代谢变化 | 第83-84页 |
·不同生长期的能量代谢物质含量的HPLC分析 | 第84-86页 |
·细胞信号转导相关蛋白的表达变化 | 第86-88页 |
·蛋白酶与毒力因子 | 第88-89页 |
4 讨论 | 第89-96页 |
·杀虫晶体蛋白氨基酸前体来源 | 第89-91页 |
·合成杀虫晶体蛋白能量来源 | 第91-93页 |
·杀虫晶体蛋白翻译调控相关蛋白表达变化 | 第93页 |
·苏云金芽胞杆菌不同生长时期代谢变化与杀虫晶体蛋白合成翻译调控间关系 | 第93-96页 |
5 总结与展望 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
攻读博士期间发表和参与发表文献 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
附录 | 第114-119页 |