| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-38页 |
| 1.非生物胁迫与植物的生长发育 | 第13-21页 |
| ·干旱、盐渍及低温胁迫 | 第13-15页 |
| ·受胁迫调节的信号网络 | 第15-19页 |
| ·胁迫引起的损伤和细胞应答机制 | 第19-21页 |
| 2.LEA蛋白与植物的耐逆性 | 第21-32页 |
| ·LEA蛋白概述 | 第21-22页 |
| ·LEA蛋白的分类和性质 | 第22-26页 |
| ·LEA蛋白的功能 | 第26-30页 |
| ·尚需进一步研究的问题 | 第30-32页 |
| 3.小麦wcs120基因研究概况 | 第32-38页 |
| ·wcs120基因的发现 | 第32页 |
| ·wcs120基因的结构特点 | 第32页 |
| ·WCS120蛋白家族状况 | 第32-33页 |
| ·wcs120基因在染色体上的定位 | 第33-34页 |
| ·wcs120基因的结构及表达调节机制 | 第34-36页 |
| ·wcs120基因的功能及应用前景 | 第36-38页 |
| 第二章 研究工作 | 第38-88页 |
| 引言 | 第38-39页 |
| 一、材料与方法 | 第39-61页 |
| 1.实验材料、仪器及试剂 | 第39-42页 |
| ·植物材料 | 第39页 |
| ·载体和菌株 | 第39-40页 |
| ·试剂及配制 | 第40页 |
| ·培养基和常用溶液配方 | 第40-42页 |
| 2.实验步骤和方法 | 第42-61页 |
| ·小麦编码低温驯化蛋白的基因——wcs120的克隆 | 第42-47页 |
| ·从小麦cDNA及全长库中克隆获得wcs120完整编码区序列 | 第47-48页 |
| ·wcs120基因的半定量RT-PCR分析 | 第48-49页 |
| ·wcs120基因原核表达研究 | 第49-52页 |
| ·wcs120基因亚细胞定位研究 | 第52-55页 |
| ·wcs120基因启动子的克隆和分析 | 第55-56页 |
| ·携带wcs120基因的重组E.coil(BL21)菌株胁迫(斑点)试验 | 第56页 |
| ·植物真核表达载体的构建及农杆菌转化 | 第56-57页 |
| ·拟南芥菜遗传转化及鉴定 | 第57-59页 |
| ·转wcs120基因拟南芥菜表型分析 | 第59页 |
| ·烟草遗传转化及鉴定 | 第59-60页 |
| ·转wcs120基因烟草表型分析 | 第60-61页 |
| 二、结果与分析 | 第61-84页 |
| 1.小麦wcs120基因的筛选、全长克隆及序列分析 | 第61-65页 |
| 2.小麦wcs120基因表达模式的研究 | 第65-67页 |
| 3.小麦wcs120基因的原核表达 | 第67-70页 |
| ·wcs120基因原核表达载体的构建 | 第67-68页 |
| ·wcs120基因的原核表达 | 第68-70页 |
| 4.小麦wcs120基因的亚细胞定位 | 第70-72页 |
| ·瞬时表达载体的构建 | 第70-71页 |
| ·小麦wcs120基因的瞬时表达 | 第71-72页 |
| 5.小麦wcs120基因启动子的克隆及序列分析 | 第72-73页 |
| 6.小麦wcs120基因与大肠杆菌的抗逆性 | 第73-75页 |
| 7.植物表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 8.拟南芥菜转化及表型分析 | 第76-80页 |
| ·拟南芥菜转化及阳性植株的筛选 | 第76-77页 |
| ·转wcs120基因拟南芥菜表型试验 | 第77-80页 |
| 9.烟草转化及表型分析 | 第80-84页 |
| ·烟草转化及阳性株系的筛选 | 第80-81页 |
| ·转wcs120基因烟草表型研究 | 第81-84页 |
| 三、讨论 | 第84-87页 |
| 1.wcs120基因对盐、渗透以及低温胁迫的响应 | 第84-85页 |
| 2.WCS120蛋白定位于细胞核和细胞质中 | 第85页 |
| 3.WCS120蛋白具有热稳定性 | 第85-86页 |
| 4.小麦wcs120基因的启动子的多样性与其表达活性 | 第86页 |
| 5.异源过表达wcs120基因可增强转基因株系对胁迫的耐受性 | 第86-87页 |
| 四、工作总结及展望 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第103页 |
