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小麦及其衍生材料/近缘禾草谷醇溶蛋白基因的分离与功能特性研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号说明第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·小麦种子储藏蛋白的组成及分类第11-13页
   ·小麦醇溶蛋白和低分子量谷蛋白的染色体定位第13-14页
   ·谷醇溶蛋白与小麦面粉品质及育种的关系第14-16页
   ·研究谷醇溶蛋白亚基功能特性的方法第16-19页
     ·谷醇溶蛋白基因体外实验第16-17页
     ·谷醇溶蛋白基因在小麦中的过表达第17-18页
     ·RNAi技术在谷醇溶蛋白功能特性研究中的应用第18-19页
   ·体细胞杂交引起小麦胚乳贮藏蛋白的变异第19-20页
   ·乳糜泻疾病(Celiac Disease)及与谷醇溶蛋白的关系第20-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
第二章 小麦体细胞渐渗系Ⅱ-12及双亲中的γ-醇溶蛋白基因第23-38页
   ·材料与方法第23-28页
     ·植物材料第23页
     ·γ-醇溶蛋白基因ORFs的克隆和测序第23-28页
       ·叶片DNA的提取第23-24页
       ·γ-醇溶蛋白基因的基因组PCR扩增第24-25页
       ·PCR产物的克隆第25-27页
       ·阳性转化子的菌落PCR筛选第27-28页
       ·γ-醇溶蛋白基因的序列分析第28页
   ·结果与分析第28-35页
     ·小麦体细胞杂种渐渗系Ⅱ-12及双亲中γ-醇溶蛋白基因分离和序列分析第28-31页
     ·基于γ-醇溶蛋白基因推导的氨基酸序列的特点第31-33页
     ·乳糜泻抗原决定簇位点分析第33-34页
     ·γ-醇溶蛋白基因的进化关系第34-35页
   ·讨论第35-38页
     ·γ-醇溶蛋白基因在Ⅱ-12与双亲中的分化第35-36页
     ·Ⅱ-12中γ-醇溶蛋白基因的变异第36-37页
     ·Ⅱ-12中γ-醇溶蛋白基因在小麦育种中的重要作用第37-38页
第三章 二倍体长穗偃麦草中LMW-GS基因的分离及Ee34的功能特性第38-55页
   ·材料与方法第38-47页
     ·植物材料第38页
     ·二倍体长穗偃麦草中LMW-GS基因克隆与测序第38-39页
       ·植物叶片DNA的提取第38页
       ·LMW-GS基因组PCR扩增第38-39页
       ·PCR产物的克隆及阳性转化子的菌落PCR筛选第39页
       ·LMW-GS基因的序列分析第39页
     ·Ee34原核表达载体的构建与原核表达第39-45页
       ·相关质粒的提取第39-40页
       ·原核表达载体的构建第40-42页
       ·原核表达蛋白的提取及电泳分析第42-45页
     ·Ee34原核表达蛋白的纯化第45-46页
     ·N-端氨基酸测序第46页
     ·配粉和揉面实验第46页
     ·GenBank登录序列号第46-47页
   ·结果与分析第47-53页
     ·LMW-GS基因的克隆第47-48页
     ·推导的氨基酸序列分析第48页
     ·二倍体长穗偃麦草中低分子量麦谷蛋白亚基基因的进化分析第48-51页
     ·Ee34的原核表达与纯化第51页
     ·Ee34蛋白功能特性第51-53页
   ·讨论第53-55页
     ·二倍体长穗偃麦草来源的LMW-GS基因与其它Glu-3位点编码的LMW-GS基因进化关系的研究第53-54页
     ·与面粉品质相关的讨论第54-55页
第四章 小麦体细胞杂种渐渗系Ⅱ-12中LMW-GS的分离与1-50,1-94的功能特性研究第55-73页
   ·材料与方法第55-60页
     ·植物材料第55页
     ·LMW-GS基因克隆与测序第55-56页
       ·植物叶片DNA的提取第55页
       ·LMW-GS基因组PCR扩增第55-56页
       ·PCR产物的克隆及阳性转化子的菌落PCR筛选第56页
     ·克隆1-50,1-94在原核表达载体的构建与原核表达第56-59页
       ·相关质粒的提取第56页
       ·原核表达载体的构建第56-59页
       ·原核表达蛋白的提取及电泳分析第59页
     ·1-50和1-94原核表达蛋白的纯化第59页
     ·N-端氨基酸测序第59页
     ·配粉和揉面实验第59-60页
   ·结果与分析第60-67页
     ·Ⅱ-12中LMW-GS基因的克隆第60页
     ·Ⅱ-12中LMW-GS序列特点分析第60-61页
     ·基于氨基酸序列的LMW-GS家族的进化分析第61-65页
     ·1-50和1-94的原核表达与纯化第65页
     ·1-50,1-94蛋白功能特性第65-67页
   ·讨论第67-73页
     ·小麦体细胞杂种渐渗系Ⅱ-12中LMW-GS基因的起源第67-68页
     ·影响LMW-GS对面粉品质贡献因素第68-73页
参考文献第73-84页
致谢第84-85页
硕士学习期间发表的文章及参加的学术会议第85-86页
学位论文评阅及答辩情况表第86页

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