| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 第一部分 前言 | 第10-25页 |
| 1 课题的提出 | 第10-12页 |
| 2 植物遗传转化的研究进展 | 第12-17页 |
| ·植物基因工程原理 | 第12-13页 |
| ·遗传转化的转化方法 | 第13-17页 |
| ·农杆菌介导的基因转移 | 第13-15页 |
| ·外源基因的直接导入法 | 第15-17页 |
| ·基因枪介导法 | 第15页 |
| ·植物种质系统的基因转移 | 第15-17页 |
| 3 遗传转化在棉花上的应用 | 第17-20页 |
| ·模式基因的转化 | 第17-18页 |
| ·目的基因的转化 | 第18-20页 |
| ·抗除草剂基因的转化 | 第18页 |
| ·抗虫基因的转移 | 第18-19页 |
| ·抗逆境基因的转化 | 第19-20页 |
| 4 叶片衰老与延缓衰老的分子遗传研究 | 第20-23页 |
| ·叶片衰老过程中的表达与调控 | 第20-22页 |
| ·细胞分裂素在延衰中的应用 | 第22-23页 |
| 5 棉花体细胞胚胎发生与植株再生 | 第23-24页 |
| 6 本课题研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 材料和方法 | 第25-36页 |
| 1 试验材料 | 第25-26页 |
| ·根癌农杆菌和质粒 | 第25页 |
| ·棉花材料 | 第25页 |
| ·部分来源 | 第25页 |
| ·PCR引物 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-31页 |
| ·棉花基因转化受体系统建立试验 | 第26-28页 |
| ·无菌苗获得 | 第26页 |
| ·茎尖再生体系 | 第26页 |
| ·优化的体细胞再生体系的建立 | 第26-28页 |
| ·胚性愈伤的诱导与继代 | 第26-27页 |
| ·分化培养基的选择 | 第27页 |
| ·愈伤生长速度 | 第27-28页 |
| ·胚状体的成熟 | 第28页 |
| ·成苗培养及幼苗的生根和移栽 | 第28页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第28-29页 |
| ·农杆菌的繁殖和保存 | 第28页 |
| ·转化程序 | 第28-29页 |
| ·用质粒DNA注射棉花子房 | 第29-30页 |
| ·基因枪介导转化棉花花粉 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的包被 | 第30页 |
| ·花粉材料的制备与转化 | 第30-31页 |
| ·转化频率的统计 | 第31页 |
| ·GUS的活性检测 | 第31页 |
| 3 转化再现生苗的检测 | 第31-36页 |
| ·Kan的抗性检测 | 第31页 |
| ·分子检测 | 第31-36页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·棉花DNA的提取(CTAB) | 第32-33页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第33-34页 |
| ·Southern-blot分析 | 第34-36页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第36-49页 |
| 1 棉花基因转移受体系统建立 | 第36-41页 |
| ·茎尖受体系统的建立 | 第36-37页 |
| ·基本培养基、活性碳和AgNO_3对茎尖培养的影响 | 第36页 |
| ·茎尖发育状态和第一片真叶的出生 | 第36-37页 |
| ·植物激素对茎尖再生的影响 | 第37页 |
| ·棉花体细胞高效再生体系 | 第37-41页 |
| ·胚性愈伤组织诱导和继代的激素试验 | 第38页 |
| ·AgNO_3在体细胞再生过程中的效应 | 第38-41页 |
| ·愈伤组织诱导阶段 | 第38页 |
| ·愈伤组织继代培养阶段 | 第38-40页 |
| ·分化培养基试验 | 第40页 |
| ·成苗培养和移栽 | 第40-41页 |
| 2 农杆菌介导的P基因转化棉花 | 第41-47页 |
| ·预培养对转化效率的影响 | 第41页 |
| ·抽真空对转化效率的影响 | 第41-42页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对转化的影响 | 第42页 |
| ·不同受体的转化效率 | 第42-44页 |
| ·转化受体的选择 | 第44页 |
| ·菌液浓度对转化率的影响 | 第44页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第44-45页 |
| ·抗性愈伤组织DNA的分子检测结果 | 第45-46页 |
| ·抗性愈伤再生的苗 | 第46页 |
| ·农杆菌介导的茎尖转化 | 第46-47页 |
| 3 基因枪介导转化棉花花粉 | 第47页 |
| 4 子房注射法转化植株的鉴定 | 第47-49页 |
| 第四部分 讨论 | 第49-53页 |
| 1 棉花体细胞胚胎发生与植株再生 | 第49页 |
| 2 影响根癌农杆菌介导转化棉花的因素 | 第49-50页 |
| 3 不同转化系统的评价 | 第50-51页 |
| 4 自我调控叶片衰老系统及其应用潜力 | 第51-53页 |
| 主要参考文献 | 第53-62页 |
| 致谢 | 第62页 |