缩略词表 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
0 引言 | 第12-80页 |
1 文献综述 | 第14-30页 |
1.1 植物核雄性不育研究概况 | 第14-19页 |
1.1.1 植物核雄性不育的生理生化研究 | 第15页 |
1.1.2 植物核雄性不育发生的细胞学研究 | 第15-17页 |
1.1.2.1 四分体以前发生败育的GMS | 第15-16页 |
1.1.2.2 四分体后发生败育的GMS | 第16-17页 |
1.1.2.3 绒毡层异常与小孢子败育 | 第17页 |
1.1.3 植物核雄性不育分子机理的研究 | 第17-19页 |
1.2 mRNA差别显示技术及其研究概况 | 第19-23页 |
1.2.1 mRNA差别显示技术原理 | 第20页 |
1.2.2 mRNA差别显示技术 | 第20-22页 |
1.2.3 mRNA差别显示技术在植物研究上的应用 | 第22-23页 |
1.2.3.1 生物体对外界刺激反应的研究 | 第22页 |
1.2.3.2 杂种优势机理的研究 | 第22-23页 |
1.2.3.3 植物发育机理的研究 | 第23页 |
1.3 RACE方法及其研究进展 | 第23-27页 |
1.3.1 RACE原理 | 第24页 |
1.3.2 传统RACE的改良 | 第24-26页 |
1.3.2.1 简并引物的使用 | 第24-25页 |
1.3.2.2 随机引物的使用 | 第25-26页 |
1.3.2.3 任意引物的使用 | 第26页 |
1.3.2.4 以cDNA第一链为模板的PCR技术的改进 | 第26页 |
1.3.2.4.1 嗜热逆转录酶的使用 | 第26页 |
1.3.2.4.2 DNA聚合酶精确性的提高 | 第26页 |
1.3.2.4.3 反应特异性的提高 | 第26页 |
1.3.3 新型RACE | 第26-27页 |
1.3.3.1 RNA连接酶介导的RACE | 第26-27页 |
1.3.3.2 Oligo-capping方法 | 第27页 |
1.4 RAPD分子标记及其应用基础 | 第27-30页 |
2 白菜细胞核雄性不育两用系的性状比较分析 | 第30-36页 |
2.1 材料与方法 | 第30-31页 |
2.1.1 试验材料 | 第30页 |
2.1.2 植株形状观察与育性鉴定 | 第30页 |
2.1.3 花粉扫描电镜 | 第30-31页 |
2.1.4 花器形态比较观察 | 第31页 |
2.1.5 花蕾总蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-34页 |
2.2.1 植株形状和花器形态的比较 | 第31-34页 |
2.2.2 花粉生活力的检测及育性鉴定 | 第34页 |
2.2.3 花蕾总蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第34页 |
2.3 讨论 | 第34-36页 |
3 白菜细胞核雄性不育两用系小孢子发生的细胞学形态观察 | 第36-42页 |
3.1 材料与方法 | 第36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-40页 |
3.2.1 两用系可育株的小孢子发育过程 | 第36-37页 |
3.2.2 两用系不育株的小孢子发育过程 | 第37-40页 |
3.3 讨论 | 第40-42页 |
3.2.1 两用系不育株小孢子败育发生时期 | 第40页 |
3.3.2 两用系不育株小孢子发育过程中异常现象 | 第40-42页 |
4 白菜细胞核雄性不育基因的RAPD标记及遗传分析 | 第42-53页 |
4.1 材料与方法 | 第42-44页 |
4.1.1 材料 | 第42页 |
4.1.2 白菜总DNA的提取与检测 | 第42-43页 |
4.1.3 RAPD扩增 | 第43-44页 |
4.1.4 玻璃奶(glassmilk)法回收特异DNA片断 | 第44-47页 |
4.1.5 RAPD标记的克隆和测序 | 第47-44页 |
4.2 结果与分析 | 第44-50页 |
4.2.1 白菜总DNA的提取与检测 | 第44-46页 |
4.2.2 不同复性温度的比较 | 第46页 |
4.2.3 随机引物的筛选 | 第46页 |
4.2.4 S107-B RAPD标记的单株遗传验证 | 第46页 |
4.2.5 S107-B片断的克隆与分析 | 第46-50页 |
4.3 讨论 | 第50-53页 |
4.3.1 白菜基因组DNA提取中的纯化、降解与产率问题 | 第50页 |
4.3.2 RAPD-PCR条件的优化 | 第50-51页 |
4.3.3 RAPD-PCR反应可重复性问题 | 第51页 |
4.3.4 RAPD随机引物的筛选 | 第51页 |
4.3.5 S107-B RAPD标记的单株遗传验证及遗传分析 | 第51-53页 |
5 白菜细胞核雄性不育两用系花蕾的mRNA差别显示及其差异片断的分析 | 第53-66页 |
5.1 材料与方法 | 第53-57页 |
5.1.1 研究材料 | 第53页 |
5.1.2 三种锚定引物及随机引物 | 第53页 |
5.1.3 RNA提取与检测 | 第53-54页 |
5.1.4 cDNA第一链合成 | 第54页 |
5.1.5 cDNA第一链合成的PCR扩增 | 第54页 |
5.1.6 PCR扩增产物电泳、银染及回收 | 第54-55页 |
5.1.7 cDNA差异片断Northern印迹分析 | 第55-56页 |
5.1.8 经Northern杂交验证的cDNA差异片断的克隆、测序 | 第56-57页 |
5.2 结果与分析 | 第57-64页 |
5.2.1 RNA的提取与检测 | 第57-58页 |
5.2.2 cDNA第一链合成 | 第58页 |
5.2.3 mRNA差别显示和cDNA差异片断的获得 | 第58-61页 |
5.2.4 cDNA差异片断的分析 | 第61-64页 |
5.2.4.1 cDNA差异片断的Northern验证 | 第61页 |
5.2.4.2 B0302-4 cDNA差异片断的克隆与鉴定 | 第61-63页 |
5.2.4.3 B0302-4差异片断序列测定 | 第63-64页 |
5.3 讨论 | 第64-66页 |
6 含B0302-4差异片断全长基因mf-CYP450基因的获得及其序列分析 | 第66-80页 |
6.1 材料与方法 | 第66-68页 |
6.1.1 花蕾总RNA | 第66页 |
6.1.2 各种生化试剂 | 第66页 |
6.1.3 B0302-4片断的3’RACE | 第66-67页 |
6.1.4 B0302-4片断的5’RACE | 第67-68页 |
6.1.5 差异cDNA片断B0302-4的5’端序列扩增 | 第68页 |
6.1.6 PCR产物回收、回收产物的连接与克隆及序列分析 | 第68页 |
6.2 结果与分析 | 第68-76页 |
6.2.1 B0302-4片断的3’RACE及序列分析 | 第68-70页 |
6.2.2 B0302-4片断的5’RACE | 第70页 |
6.2.3 B0302-4片断的5’PCR扩增 | 第70-71页 |
6.2.4 mf-CYP450基因的序列分析 | 第71-76页 |
6.3 讨论 | 第76-80页 |
6.3.1 mf-CYP450基因的功能验证 | 第76-77页 |
6.3.2 细胞色素P450在植物生长发育中的作用 | 第77-78页 |
6.3.3 mf-CYP450基因与白菜的核雄性不育 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
英文摘要 | 第88-91页 |
作者简介 | 第91页 |