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重组菌株合成类胡萝卜素的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-2页
目录第2-8页
前言第8-13页
材料与方法第13-27页
 一、 菌株与质粒第13页
 二、 培养基第13-14页
  1. LB培养基第13页
  2. 玉米粉培养基第13-14页
  3. 糖蜜培养基第14页
 三、 试剂第14-16页
 四、 仪器设备第16页
 五、 重组菌株的构建第16-20页
  1. GGPS基因的PCR扩增第16-17页
  2. 制备大肠杆菌DH10B感受态细胞第17页
  3. 质粒转化第17-18页
  4. 抽提质粒第18-19页
  5. 琼脂糖凝胶电泳第19-20页
 六、 重组菌株显色最佳条件及与对照菌株的对比第20-21页
  1. 重组菌株的平板培养第20页
  2. 重组菌株的液体培养第20-21页
  3. 与对照菌株的对比第21页
 七、 产类胡萝卜素黄色菌株的筛选第21-22页
 八、 重组菌株类胡萝卜素的抽提第22-23页
  1. 研磨破壁萃取法第22页
  2. 盐酸破壁溶剂萃取法第22页
  3. 类胡萝卜素含量的计算第22-23页
 九、 重组菌株产类胡萝卜素的最佳条件第23-25页
  1. LB培养基培养重组菌株第23页
  2. 重组菌、对照菌和原始菌在LB培养基中生长曲线的测定第23页
  3. 玉米粉培养基培养重组菌株第23-24页
  4. 糖蜜培养基培养重组菌株第24页
  5. 重组菌株在糖蜜培养基中生长曲线的测定第24页
  6. 通气量对重组菌株色的影响第24-25页
 十、 小型发酵罐培养重组菌株第25-26页
  1. 1 L发酵罐培养条件优化及生长曲线的测定第25页
  2. 3L发酵罐培养条件优化及生长曲线的测定第25-26页
 十一、薄板层析第26-27页
  1. 展层剂的选择第26页
  2. 薄板层析第26-27页
结果第27-46页
 一、 重组菌株的获得第27-29页
  1. 载体质粒的选取第27-28页
  2. 质粒的体外重组第28-29页
  3. 琼脂糖凝胶电泳第29页
 二、 重组菌株显色最佳条件及与对照菌株的对比第29-32页
  1. 平板显色的最佳条件第29-30页
  2. 重组菌株与对照菌株的对比第30页
  3. 液体培养显色的最佳条件第30-32页
 三、 产类胡萝卜素黄色菌株的筛选第32-33页
 四、 重组菌株类胡萝卜素抽提方法的优化第33-34页
  1. 研磨破壁萃取法第33页
  2. 盐酸破壁溶剂萃取法第33-34页
 五、 重组菌株产类胡萝卜素的最佳条件第34-41页
  1. LB培养基培养重组菌株第34-35页
  2. 重组菌株、原始菌株(大肠杆菌)和对照菌株的生长曲线第35-37页
  3. 玉米粉培养基的最佳培养条件第37-38页
  4. 糖蜜培养基的最佳培养条件第38-40页
  5. 糖蜜培养基培养重组菌株的生长曲线第40页
  6. 摇瓶培养的最佳通气量第40-41页
 六、 小型发酵罐试验结果第41-44页
  1. 1L发酵罐培养第41-43页
  2. 3L发酵罐培养第43-44页
 七、 薄板层析第44-46页
  1. 合适展层剂的选择第44页
  2. 薄板层析第44-46页
讨论第46-58页
 一、 类胡萝卜素的生物合成途径第46-49页
 二、 重组菌的构建及表达第49-51页
  1. 重组菌外源基因的表达第49-50页
  2. 重组菌质粒稳定性第50-51页
 三、 重组菌类胡萝卜素的最佳抽提方法第51-52页
 四、 重组菌最佳发酵条件第52-55页
  1. 玉米粉浓度第53页
  2. 糖蜜浓度第53页
  3. 培养温度第53-54页
  4. pH值第54页
  5. 加诱导剂IPTG前的培养时间第54页
  6. 通气量第54-55页
  7. 培养时间第55页
 五、 小型发酵罐试验第55-56页
 六、 重组菌类胡萝卜素成分分析第56-57页
 七、 结束语第57-58页
附页第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63页

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