符号说明 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
1 前言 | 第13-27页 |
·小麦抗纹枯病研究进展 | 第13-15页 |
·小麦纹枯病病原种类及致病力 | 第13-14页 |
·小麦纹枯病害发生的症状、规律及影响因素 | 第14-15页 |
·小麦对纹枯病的抗病机理与抗病遗传 | 第15页 |
·植物分子的抗病机制 | 第15-19页 |
·植物抗病反应 | 第16页 |
·抗病(Resistance,R)基因及其利用 | 第16-17页 |
·R 基因的抗病的作用模式 | 第17页 |
·R 基因的结构特点 | 第17-18页 |
·R 基因与持久、广谱抗病基因工程 | 第18-19页 |
·植物防卫基因(PLANT DEFENSE GENES) | 第19-22页 |
·脂质转移蛋白质及其在抗真菌基因工程中的应用 | 第20页 |
·多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白及其在抗真菌基因工程中的应用 | 第20-21页 |
·ERF 转录因子及其在抗真菌基因工程中的应用 | 第21-22页 |
·启动子的分类及其应用 | 第22-26页 |
·组成型启动子的功能及结构特点 | 第23-24页 |
·组织特异型启动子 | 第24-25页 |
·病原诱导型启动子 | 第25-26页 |
·本研究意义、研究内容、预期目标 | 第26-27页 |
2. 材料与方法 | 第27-53页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·植物材料 | 第27页 |
·病菌材料 | 第27页 |
·菌种和表达载体 | 第27-28页 |
·酶、主要试剂及试剂盒 | 第28页 |
·引物及测序 | 第28页 |
·方法 | 第28-53页 |
·植物总RNA 的提取及纯化 | 第28-30页 |
·cDNA 第一条链的合成 | 第30-31页 |
·植物防卫基因TaLTP4 和PvPGIP2 的克隆 | 第31-32页 |
·琼脂糖电泳法 | 第32-33页 |
·PCR 产物的回收 | 第33-34页 |
·转基因表达载体的构建 | 第34-35页 |
·转化 | 第35-37页 |
·转基因表达载体的鉴定 | 第37-39页 |
·质粒DNA 的提取 | 第39-40页 |
·幼胚和成熟胚的基因枪转化方法 | 第40-41页 |
·基因总DNA 的提取 | 第41页 |
·转Ubi::TaLTP4 基因和Ubi::PvPGIP2 基因的小麦PCR 检测 | 第41-43页 |
·转TaLTP4 基因小麦的Q-RT-PCR 扩增方法 | 第43-44页 |
·小麦纹枯病培养、接种与鉴定 | 第44-45页 |
·转TaLTP4 基因小麦纹枯病抗性的离体鉴定 | 第45页 |
·转TaLTP4 基因小麦纹枯病的分子鉴定 | 第45-47页 |
·转R551P::TiERF1 基因小麦的组织特异性分析 | 第47-51页 |
·转 RSS1P::TiERF1 基因小麦的纹枯病抗性鉴定及农艺性状调查 | 第51页 |
·人工改造R551P 启动子的GUS 基因表达分析 | 第51-53页 |
3 结果与分析 | 第53-67页 |
·植物防卫基因TALTP4 和PVPGIP2 的克隆及序列分析 | 第53-67页 |
·总RNA 的提取及第一链cDNA 的合成 | 第53-54页 |
·基因的克隆与序列分析 | 第54-55页 |
·转基因表达载体的鉴定 | 第55页 |
·转基因小麦再生植株的获得与PCR 检测 | 第55-57页 |
·转基因小麦中TaLTP4 基因的表达分析 | 第57-58页 |
·转TaLTP4 基因小麦的纹枯病抗性鉴定 | 第58-61页 |
·转R551P::TiERF1 基因小麦的获得及分子检测 | 第61-62页 |
·转基因植株 TiERF1 的组织特异性表达分析 | 第62-63页 |
·转基因小麦的纹枯病抗性鉴定 | 第63-64页 |
·转基因小麦的农艺性状 | 第64-65页 |
·水稻启动子R551P2897的克隆与GUS 表达载体的构建 | 第65页 |
·小麦愈伤组织中R551P 相关启动子启动GUS 基因组织化学染色 | 第65-67页 |
4. 讨论 | 第67-70页 |
·TALTP4 基因的表达量分析与抗病性关系 | 第67页 |
·利用离体培养法和PCR 检测法进行纹枯病抗性进行鉴定 | 第67-68页 |
·转基因双价表达载体的构建与转基因植株的检测 | 第68-69页 |
·转R551P::TIERF1 基因小麦的分子检测组织特异性表达分析 | 第69-70页 |
·人工改造R551P 启动子的分析 | 第70页 |
5. 结论 | 第70-73页 |
·转TALTP4 基因小麦的获得与抗病性分析 | 第70-71页 |
·植物防卫基因PVPGIP2 和TALTP4 的克隆及双价载体的转化 | 第71页 |
·转R551P::TIERF1 基因抗病小麦材料的创制及组织特异性分析 | 第71-72页 |
·人工改造R551P 启动子的分析 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
附录1.小麦LTP 基因的抗菌性活性(SUN 等,2008) | 第81-82页 |
附录2.本研究所使用引物名称及序列 | 第82-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读学位期间发论文表情况 | 第85-86页 |
附件 | 第86页 |