| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| ·蒙古羊的起源和分化 | 第9-10页 |
| ·蒙古羊的起源 | 第9页 |
| ·蒙古羊品种的分化 | 第9-10页 |
| ·影响羊肉品质的因素 | 第10-12页 |
| ·影响羊肉品质的非遗传因素 | 第10-11页 |
| ·畜龄 | 第10页 |
| ·性别 | 第10页 |
| ·品种 | 第10-11页 |
| ·去势与不去势 | 第11页 |
| ·肥育性能 | 第11页 |
| ·营养与饲料 | 第11页 |
| ·遗传因素-目前发掘的影响羊肉品质的主效基因 | 第11-12页 |
| ·脂肪酸结合蛋白( FABP)基因 | 第11页 |
| ·钙蛋白酶(Calpain) 基因 | 第11-12页 |
| ·Callipyge 基因 | 第12页 |
| ·其他基因 | 第12页 |
| ·mRNA 差异显示技术简介 | 第12-14页 |
| ·mRNA 差异显示技术的原理 | 第12-13页 |
| ·mRNA 差异显示技术在研究基因差异表达中的应用 | 第13页 |
| ·在猪中的应用 | 第13页 |
| ·在小鼠中的应用 | 第13页 |
| ·mRNA 差异显示技术的发展前景 | 第13-14页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术简介 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术的原理 | 第14页 |
| ·实时定量 PCR 的应用现状 | 第14页 |
| ·实时定量 PCR 技术的展望 | 第14-15页 |
| ·立题依据及研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 2 实验一 蒙古羊肌肉组织中总 RNA 的提取及反转录 | 第16-20页 |
| ·仪器和试剂 | 第16页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-18页 |
| ·蒙古羊肌肉组织的采集 | 第16页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第16-17页 |
| ·DNase I（RNase free）处理总 RNA | 第17-18页 |
| ·总 RNA 的反转录 | 第18页 |
| ·结果与分析 | 第18-20页 |
| ·蒙古羊肌肉组织总 RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·管家基因β-actin PCR 检测cDNA 的质量 | 第19-20页 |
| 3 实验二 mRNA 差异显示方法筛选不同发育阶段蒙古羊肌肉组织中差异基因 | 第20-28页 |
| ·仪器和试剂 | 第20-21页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20页 |
| ·载体与菌种 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·引物的合成 | 第21页 |
| ·差异 PCR 反应 | 第21-22页 |
| ·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备、电泳和差异片段的回收 | 第22页 |
| ·凝胶的银染法显色及差异条带的回收 | 第22-23页 |
| ·二次 PCR 反应和电泳检测后对目的条带的回收 | 第23-24页 |
| ·差异片段与pMG-18T 载体的连接 | 第24页 |
| ·重组质粒的转化 | 第24页 |
| ·重组质粒 DNA 鉴定与提取 | 第24-25页 |
| ·含有目的片段的阳性重组质粒测序 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·不同发育阶段蒙古羊肌肉组织的mRNA 差异显示结果 | 第25-26页 |
| ·二次 PCR 结果 | 第26-27页 |
| ·菌落 PCR 鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·特异条带序列分析结果 | 第28页 |
| 4 实验三 TPM1 基因在不同发育阶段蒙古羊肌肉组织中的表达差异 | 第28-34页 |
| ·仪器和试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·特异性引物的设计与合成 | 第29页 |
| ·实时定量 RT-PCR 检测 TPM1 基因 | 第29-30页 |
| ·实时荧光定量 PCR 方法的建立 | 第29页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
| ·不同发育阶段蒙古羊肌肉组织中 TPM1 基因表达差异的检测 | 第30页 |
| ·TPM1 扩增产物的鉴定 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·TPM1 与β-actin 基因的标准曲线 | 第30-32页 |
| ·TPM1 与β-actin 基因相对定量PCR 溶解曲线 | 第32页 |
| ·相对定量 PCR 产物电泳结果 | 第32-33页 |
| ·测序结果与序列分析 | 第33页 |
| ·不同发育阶段蒙古羊肌肉组织中 TPM1 基因表达量的差异 | 第33-34页 |
| 5 讨论 | 第34-35页 |
| 6 结论 | 第35-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 附录 | 第40-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
