摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 引言 | 第8-15页 |
·牛肉品质评定的主要指标 | 第8-10页 |
·感官指标 | 第8-9页 |
·内在指标 | 第9-10页 |
·加工指标 | 第10页 |
·影响牛肉品质的非遗传因素 | 第10-11页 |
·饲料因素 | 第10页 |
·环境因素 | 第10-11页 |
·屠宰后成熟 | 第11页 |
·影响牛肉质性状的主要候选基因 | 第11-14页 |
·脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding proteins, FABP)基因 | 第11-12页 |
·钙蛋白酶(calpain, CAPN)基因 | 第12-13页 |
·Leptin 基因 | 第13页 |
·其他相关基因 | 第13-14页 |
·立题依据及研究目的意义 | 第14-15页 |
2 实验一影响蒙古牛肉质性状主要候选基因的筛选 | 第15-27页 |
·材料 | 第15-16页 |
·主要实验仪器 | 第15-16页 |
·实验药品 | 第16页 |
·载体与菌种 | 第16页 |
·实验用主要试剂的配方 | 第16页 |
·方法 | 第16-23页 |
·蒙古牛肌肉样本的采集 | 第16-17页 |
·引物的设计与合成 | 第17页 |
·蒙古牛肌肉组织总 RNA 的提取 | 第17-18页 |
·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织cDNA 池的建立 | 第18页 |
·差异表达基因的筛选 | 第18-22页 |
·差异 PCR 反应 | 第18-19页 |
·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳 | 第19页 |
·凝胶的染色(银染法) | 第19-20页 |
·差异片段的回收 | 第20页 |
·二次 PCR | 第20-21页 |
·二次 PCR 产物的鉴定与回收 | 第21-22页 |
·目的片段 DNA 与载体的连接 | 第22页 |
·转化感受态细胞 TOP10 | 第22页 |
·筛选阳性克隆菌 | 第22-23页 |
·阳性克隆菌的扩增与测序 | 第23页 |
·结果 | 第23-26页 |
·蒙古牛肌肉组织总 RNA 的提取结果 | 第23页 |
·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织的 mRNA 差异显示结果 | 第23-24页 |
·二次 PCR 结果 | 第24-25页 |
·菌落 PCR 鉴定结果 | 第25页 |
·测序结果与序列分析 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26-27页 |
3 实验二不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因的差异表达 | 第27-35页 |
·材料 | 第28-29页 |
·主要仪器设备 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-31页 |
·特异性引物的设计与合成 | 第29页 |
·cDNA 模板的获得 | 第29页 |
·相对定量 PCR 检测 CFL2 基因的表达差异 | 第29-31页 |
·相对定量 PCR 方法的建立 | 第29-30页 |
·CFL2 与β-actin 基因标准曲线的绘制 | 第30页 |
·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因表达差异的检测 | 第30-31页 |
·CFL2 扩增产物的鉴定 | 第31页 |
·结果 | 第31-34页 |
·CFL2 与β-actin 基因标准曲线绘制 | 第31-32页 |
·CFL2 与β-actin 基因相对定量PCR 溶解曲线分析 | 第32-33页 |
·相对定量 PCR 产物电泳结果 | 第33页 |
·测序结果与序列分析 | 第33-34页 |
·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因表达量的差异 | 第34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
4 结论 | 第35-36页 |
附录 | 第36-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
作者简介 | 第45页 |