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影响蒙古牛肉质性状主要候选基因的筛选

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-15页
   ·牛肉品质评定的主要指标第8-10页
     ·感官指标第8-9页
     ·内在指标第9-10页
     ·加工指标第10页
   ·影响牛肉品质的非遗传因素第10-11页
     ·饲料因素第10页
     ·环境因素第10-11页
     ·屠宰后成熟第11页
   ·影响牛肉质性状的主要候选基因第11-14页
     ·脂肪酸结合蛋白(fatty acid-binding proteins, FABP)基因第11-12页
     ·钙蛋白酶(calpain, CAPN)基因第12-13页
     ·Leptin 基因第13页
     ·其他相关基因第13-14页
   ·立题依据及研究目的意义第14-15页
2 实验一影响蒙古牛肉质性状主要候选基因的筛选第15-27页
   ·材料第15-16页
     ·主要实验仪器第15-16页
     ·实验药品第16页
     ·载体与菌种第16页
     ·实验用主要试剂的配方第16页
   ·方法第16-23页
     ·蒙古牛肌肉样本的采集第16-17页
     ·引物的设计与合成第17页
     ·蒙古牛肌肉组织总 RNA 的提取第17-18页
     ·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织cDNA 池的建立第18页
     ·差异表达基因的筛选第18-22页
       ·差异 PCR 反应第18-19页
       ·6%非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备及电泳第19页
       ·凝胶的染色(银染法)第19-20页
       ·差异片段的回收第20页
       ·二次 PCR第20-21页
       ·二次 PCR 产物的鉴定与回收第21-22页
     ·目的片段 DNA 与载体的连接第22页
     ·转化感受态细胞 TOP10第22页
     ·筛选阳性克隆菌第22-23页
     ·阳性克隆菌的扩增与测序第23页
   ·结果第23-26页
     ·蒙古牛肌肉组织总 RNA 的提取结果第23页
     ·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织的 mRNA 差异显示结果第23-24页
     ·二次 PCR 结果第24-25页
     ·菌落 PCR 鉴定结果第25页
     ·测序结果与序列分析第25-26页
   ·讨论第26-27页
3 实验二不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因的差异表达第27-35页
   ·材料第28-29页
     ·主要仪器设备第28页
     ·主要试剂第28-29页
   ·方法第29-31页
     ·特异性引物的设计与合成第29页
     ·cDNA 模板的获得第29页
     ·相对定量 PCR 检测 CFL2 基因的表达差异第29-31页
       ·相对定量 PCR 方法的建立第29-30页
       ·CFL2 与β-actin 基因标准曲线的绘制第30页
       ·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因表达差异的检测第30-31页
     ·CFL2 扩增产物的鉴定第31页
   ·结果第31-34页
     ·CFL2 与β-actin 基因标准曲线绘制第31-32页
     ·CFL2 与β-actin 基因相对定量PCR 溶解曲线分析第32-33页
     ·相对定量 PCR 产物电泳结果第33页
     ·测序结果与序列分析第33-34页
     ·不同发育阶段蒙古牛肌肉组织中 CFL2 基因表达量的差异第34页
   ·讨论第34-35页
4 结论第35-36页
附录第36-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
作者简介第45页

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