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嗜热菌糖苷酶基因转染奶牛乳腺上皮细胞的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 引言第8-18页
   ·动物细胞体外培养进展第8-12页
     ·动物细胞体外培养的研究历程第8页
     ·动物细胞体外培养技术第8-11页
     ·影响动物细胞体外生长的因素第11-12页
   ·乳腺上皮细胞的体外培养及研究状况第12-16页
     ·乳腺上皮细胞培养方法的研究进展第12-13页
     ·体外培养的牛乳腺上皮细胞的形态、功能第13-14页
     ·牛乳腺上皮细胞的体外培养方法第14-15页
     ·影响乳腺上皮细胞体外增殖与分化的因素第15-16页
   ·动物乳腺生物反应器第16页
     ·动物乳腺生物反应器表达载体的研究第16页
     ·嗜热菌糖苷酶基因(lacS)第16页
   ·真核细胞转染的研究进展第16-17页
     ·真核细胞转染的研究方法第16-17页
     ·脂质体转染法第17页
     ·阳离子脂质体转染法第17页
   ·本研究的立题依据及目的、意义第17-18页
2 实验一 牛乳腺上皮细胞的分离培养与鉴定第18-28页
   ·材料第18-19页
     ·主要仪器设备第18页
     ·主要试剂第18页
     ·活体材料第18页
     ·主要溶液配制第18-19页
   ·方法第19-21页
     ·组织块法分离培养牛乳腺上皮细胞第19页
     ·细胞传代培养及乳腺上皮细胞的纯化第19页
     ·牛乳腺上皮细胞冻存和复苏培养第19-20页
     ·牛乳腺上皮细胞生长曲线的绘制第20页
     ·牛乳腺上皮细胞染色体分析第20页
     ·荧光免疫细胞染色法鉴定牛乳腺上皮细胞第20-21页
   ·结果第21-26页
     ·两种培养液对乳腺上皮细胞原代培养的影响第21-22页
     ·乳腺上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化培养第22-23页
     ·乳腺上皮细胞的解冻复苏培养第23页
     ·乳腺上皮细胞生长曲线的绘制第23-24页
     ·乳腺上皮细胞染色体分析第24页
     ·荧光免疫细胞染色分析细胞角蛋白 K14、K15 的表达第24-26页
   ·讨论第26-28页
     ·牛乳腺细胞的原代培养第26-27页
     ·不同培养液对乳腺上皮细胞培养的影响第27-28页
     ·乳腺上皮细胞的体外鉴定第28页
   ·结论第28页
3 实验二 LacS 基因转染牛乳腺上皮细胞的研究第28-40页
   ·材料第29页
     ·主要仪器设备第29页
     ·主要试剂第29页
     ·主要溶液配制第29页
   ·方法第29-33页
     ·转染条件的优化第29-30页
     ·转染细胞DNA 检测第30-31页
     ·整合外源基因的细胞诱导表达第31-33页
   ·结果第33-38页
     ·转染条件的优化第33-36页
     ·转染阳性细胞的DNA 检测第36-37页
     ·整合外源基因的细胞诱导表达第37-38页
   ·讨论第38-39页
   ·结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
作者简介第45页

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